結合β?KLOTHO、FGF受體及其復合物的人抗原結合蛋白制造技術

本發明專利技術提供涉及或源自抗原結合蛋白激活FGF21介導信號傳導的組合物和方法。在實施方案中，所述抗原結合蛋白與(i)β?Klotho；(ii)FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c或FGFR4；或(iii)包含β?Klotho以及FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4中之一的復合物特異性結合。在一些實施方案中，抗原結合蛋白誘導FGF21樣信號傳導。在一些實施方案中，抗原結合蛋白是與(i)β?Klotho；(ii)FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c或FGFR4；或(iii)包含β?Klotho以及FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4中之一的復合物特異性結合的全人抗體、人源化抗體或嵌合抗體、此類抗體的結合片段和衍生物以及多肽。其他實施方案提供了編碼此類抗原結合蛋白和片段及其衍生物以及多肽的核酸、包含此類多核苷酸的細胞、制造此類抗原結合蛋白和片段及其衍生物以及多肽的方法，和使用此類抗原結合蛋白和片段及其衍生物以及多肽的方法，包括治療或診斷患有2型糖尿病、肥胖癥、NASH、代謝綜合征和相關病癥或疾患的受試者的方法。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】
本公開涉及編碼抗原結合蛋白的核酸分子，其中所述抗原結合蛋白與(i) 3-Klotho ;(ii)FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c 或 FGFR4 ;或(iii)包含 P-Klotho 以及 FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4中之一的復合物特異性結合。本公開也提供與(i) ^ -Klotho ； (ii)FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c 或 FGFR4 ;或(iii)包含 P-Klotho 以及 FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c 和FGFR4中之一的復合物特異性結合的抗原結合蛋白，包括誘導FGF21樣信號傳導的抗原結合蛋白，以及藥物組合物，其包含與(i) ^ -Klotho ； (ii)FGFRlc, FGFR2c、FGFR3c或FGFR4 ；或(iii)包含P -Klotho以及FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4中之一的復合物特異性結合的抗原結合蛋白，包括誘導FGF21樣信號傳導的抗原結合蛋白，和用于使用此類核酸、多肽或藥物組合物治療代謝紊亂的方法。還提供了使用所述抗原結合蛋白的診斷方法。背景成纖維細胞生長因子21(FGF21)是分泌型多肽，其屬于包括FGF19、FGF21和FGF23的成纖維細胞生長因子(FGF)亞家族(Itoh等人，(2004) Trend Genet.迪563-69)。FGF21是不典型的FGF，在于它是肝素非依賴的并且作為激素在調節葡萄糖、脂類和能量代謝方面發揮作用。它在肝臟和胰中高度表達并且是主要在肝臟中表達的唯一 FGF家族成員。過量表達FGF21的轉基因小鼠顯示緩慢生長率、低血漿葡萄糖和甘油三酯水平的代謝表型并且不存在年齡相關性2型糖尿病、胰島增生和肥胖癥。在嚙齒類和靈長類模型中藥理學施用重組FGF21蛋白導致標準的血漿葡萄糖水平、降低的甘油三酯和膽固醇水平和改善的葡萄糖耐量及胰島素敏感性。此外，FGF21通過增加能量支出、身體活動性和代謝率而降低體重和體脂。實驗性研究為藥理學施用FGF21以治療人中的2型糖尿病、肥胖癥、血脂異常和其他代謝疾患或病癥提供支持。FGF21是肝臟來源的內分泌激素，它通過活化其受體刺激脂肪細胞中的葡萄糖攝入和脂質穩態。有趣地，除典型的FGF受體之外，FGF21受體還包含膜結合的P -Klotho作為必需輔因子。FGF21受體的活化導致對多種代謝參數的多種影響。在哺乳動物中，FGF通過一組四種FGF受體FGFR 1_4介導它們的作用，這轉而以多種剪接變體表達，例如，FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4。每種FGF受體含有一個胞內酪氨酸激酶結構域，該結構域一旦配體結合則激活，導致涉及MAPK(Erkl/2)、RAF1、AKT1和STAT的下游信號傳導途徑(Kharitonenkov等人，(2008) BioDrugs 22 37-44) 幾篇報道表明，FGFR 1-3的“c”-報道基因剪接變體對P-Klotho顯示特殊的親和力并且可能充當FGF21 的內源性受體(Kurosu 等人，(2007)，J. Biol. Chem. 282 :26687-26695) ；Ogawa 等人，(2007)Proc Natl Acad Sci USA 104 :7432-7437) ;Kharitonenkov 等人，(2008) J. CellPhysiol. 215 1-7)。在大量表達P -Klotho和FGFR4的肝臟中，FGF21不誘導MAPK的磷酸化，盡管FGF21與P -Klotho-FGFR4復合物強烈結合。在3T3-L1細胞和白色脂肪組織中，FGFRl是迄今最豐富的受體，并且因此最有可能的是，FGF21在這種組織中的主要功能性受體是 P -Klotho/FGFRlc 復合物。本公開提供了誘導FGF21樣信號傳導的人(或人源化)抗原結合蛋白，如單克隆抗體，例如，模擬FGF21功能的激動性抗體。這種抗體是這樣的分子，其具有FGF21樣活性和選擇性，還具有抗體常見的增加的合乎治療需要的特征，如蛋白質穩定性、缺少免疫原性、易于生產和體內長半壽期。 概述提供了一種分離的抗原結合蛋白，其誘導FGF21介導的信號傳導。另外，提供了與以下中的至少一種特異性結合的分離的抗原結合蛋白(i)3-Klotho ;(ii)FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c 或 FGFR4 ;或(iii)包含 P-Klotho 以及 FGFRlc、FGFR2c、FGFR3c和FGFR4中之一的復合物，其中所述抗原結合蛋白誘導FGF21介導的信號傳導。在一個實施方案中，所提供的抗原結合蛋白包含選自以下的氨基酸序列(a)輕鏈⑶R3，其包含選自以下的序列(i)輕鏈⑶R3序列，其與選自L1-L18的輕鏈⑶R3序列SEQ ID NO :180-194中的⑶R3序列相差不多于總計三個氨基酸添加、置換和/或缺失；(Ii)QVTOX1X2SDHVV (SEQ ID NO :276) ; (iii) QQX3GX4X5X6X7T (SEQ ID NO :283) ; (iv)LQHNSYPLT(SEQ ID NO 267) ； (v)MQSLQTPFT(SEQ ID NO 268) ； (vi)QQYNNWPPT(SEQ IDNO 269) ;(vii)MQSIQLPRT(SEQ ID NO :270) ；(viii)QQANDFPIT(SEQ ID NO :271) ； (ix)MQALQTPCS (SEQ ID NO :272) ； (b)重鏈CDR3序列，其包含選自以下的序列(i)重鏈CDR3序列，其與選自H1-H18的重鏈CDR3序列SEQ ID NO =145-157中的CDR3序列相差不多于總計四個氨基酸添力口、置換和 / 或缺失；(ii)X34X16X17X18GX19YYYX2QGMDV(SEQ ID NO :322)；(iii) SLIVVX21Vy X22LDX23 (SEQ ID NO 326) ； (iv) IVVVPAAIQSYYYYYGMGV (SEQ ID NO:311) ； (v)DPDGDYYYYGMDV(SEQ ID NO :312) ； (vi)TYSSGffYVffDYYGMDV(SEQ ID NO :313)；(vii)DRVLSYYAMAV(SEQ ID NO :314) ； (VIII)VRIAGDYY YYYGMDV(SEQ ID NO :315) ； (ix)ENlVVIPAAIFAGffFDP(SEQ ID NO :316);和(x)DRAAAGLHYYYGMDV(SEQ ID NO :317);或(c)(a)的輕鏈CDR3序列和(b)的重鏈CDR3序列)；其中，X1是G、S或N ;X2是N、S或T ;X3是C、Y或S 34是6或S ;&是六或S 乂是卩或？而是1或不存在；&4是1、￥或3316是1或V ；X17 是 L、T 或 V ；X18 是 L、V、G 或 T ；X19 是 A、G 或不存在；X2(I 是 Y、C 或 D ；X21 是 I 或 M ；X22是A或V ;并且X23是H或Y ;并且其中所述抗原結合蛋白特異性結合⑴@本文檔來自技高網...

【技術保護點】

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：SFS胡，I富爾茨，CT金，李陽，T阿羅拉，
申請(專利權)人：安姆根有限公司，
類型：
國別省市：