一種絲裂霉素C多泡脂質(zhì)體及其制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種絲裂霉素Ｃ多泡脂質(zhì)體及其制備方法，該制備方法包括下列步驟：①將包括中性磷脂、膽固醇和中性脂質(zhì)的脂質(zhì)成分溶于有機(jī)溶劑中，使中性磷脂含量為２０～４０ｍｇ／ｍｌ，以作為脂質(zhì)相；②將絲裂霉素Ｃ溶于緩沖鹽溶液中使其濃度為２０μｇ／ｍｌ～３０００μｇ／ｍｌ，以作為內(nèi)水相；③將等體積的所述內(nèi)水相加入脂質(zhì)相上層，混合乳化制得油包水型初乳；④將含有滲透壓調(diào)節(jié)物的外水相加入所述油包水型初乳的上層，攪拌形成水包油包水型復(fù)乳；⑤除去復(fù)乳中的有機(jī)溶劑而制得絲裂霉素Ｃ多泡脂質(zhì)體。該絲裂霉素Ｃ多泡脂質(zhì)體具有較高的包封率，并有較佳的緩釋作用，而取得更佳的抗腫瘤效果。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及一種絲裂霉素C的緩釋制劑，特別涉及一種絲裂霉素C多泡脂質(zhì)體及其制備方法。
技術(shù)介紹
絲裂霉素C(Mitomycin C，MMC)是Hata等人于1955年發(fā)現(xiàn)的抗生素類廣譜抗癌藥物，為細(xì)胞周期非特異性藥物。絲裂霉素C對(duì)腫瘤細(xì)胞的G1期、特別是晚G1期及早S期最敏感，在組織中經(jīng)酶活化后，它的作用類似于雙功能或三功能烷化劑，可與DNA發(fā)生交叉聯(lián)結(jié)，抑制DNA合成，對(duì)RNA及蛋白合成也有一定的抑制作用。到目前為止，本品已經(jīng)在臨床上應(yīng)用了20多年，是治療各種實(shí)體瘤的有效藥物。其臨床上主要用于消化道癌癥，對(duì)肺癌、乳腺癌、宮頸癌等也有顯著療效，還可用于惡性淋巴瘤的聯(lián)合治療。另外，絲裂霉素C還可用于小梁切除術(shù)治療青光眼，因切除手術(shù)后常發(fā)生球結(jié)膜下和鞏膜之間成纖維細(xì)胞過度增生、纖維化、瘢痕形成致濾過通道阻塞，使濾過泡難以形成，發(fā)生率可達(dá)15％～30％，而抗代謝物絲裂霉素C可增加小梁切除術(shù)的成功率，已經(jīng)得到多年臨床應(yīng)用的肯定。絲裂霉素C作為抗癌藥物的一種，有嚴(yán)重的全身性毒性，治療窗窄，而藥物本身性質(zhì)不穩(wěn)定，目前只能制成凍干粉針，臨用前配制成溶液靜脈注射。絲裂霉素C在體內(nèi)半衰期短，治療過程中需多次注射給藥，給藥后需有護(hù)理人員看護(hù)，極為不便，患者順應(yīng)性差。另一方面，Kim等人于1983年最先發(fā)現(xiàn)并研究了多泡(多囊)脂質(zhì)體，他們通過復(fù)乳法，以磷脂、膽固醇和中性脂質(zhì)為成膜材料，以氯仿和乙醚為有機(jī)溶劑，成功制備了多泡脂質(zhì)體，并憑借光學(xué)顯微鏡和電鏡觀察了多泡脂質(zhì)體的微觀結(jié)構(gòu)。在制備過程中，首先將藥物溶液和油相在機(jī)械作用力下形成W/O(油包水)型初乳，再將初乳與外水相混合制得復(fù)乳，通過氮?dú)獯蹈沙ビ袡C(jī)溶劑制得多泡脂質(zhì)體混懸液。多泡脂質(zhì)體顆粒的平均粒徑在5～50μm之間。通過復(fù)乳法制備得多泡脂質(zhì)體具有高包封率(20％～90％)、高載藥量、高穩(wěn)定性(4℃下可保存一年以上)、低滲漏、緩釋作用(可延遲釋放數(shù)天至數(shù)周)。因其非同心圓的拓樸結(jié)構(gòu)，使得多泡脂質(zhì)體在注射部位形成藥物“儲(chǔ)庫”，隨著磷脂雙分子層的不斷代謝，包封在囊泡中的藥物逐步釋放至血液或病變部位，發(fā)揮很好的延遲釋放作用。通過調(diào)節(jié)制備過程中的參數(shù)和處方比例，可以輕松控制藥物釋放時(shí)間在幾天到數(shù)周之間。然而，目前存在的問題是由于不同的藥物活性成分有不同的理化性質(zhì)和作用機(jī)理，其制備包封率和藥物釋放及制劑穩(wěn)定性有較大的差異，因此針對(duì)具體藥物及其釋放要求，需研究采用特定的處方和工藝。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)要解決的技術(shù)問題即為上述課題，提供一種具有緩釋作用的絲裂霉素C多泡脂質(zhì)體及其制備方法。本專利技術(shù)的技術(shù)方案包括一種絲裂霉素C多泡脂質(zhì)體的制備方法，其可以包括下列步驟①將脂質(zhì)成分溶于有機(jī)溶劑中，以作為脂質(zhì)相，其中該脂質(zhì)成分包括重量比為2∶1～4∶1的中性磷脂和膽固醇，以及在脂質(zhì)成分中占摩爾百分比為2～6％的中性脂質(zhì)，該中性磷脂在脂質(zhì)相中的濃度為20～40mg/ml；②將絲裂霉素C溶于緩沖鹽溶液中使其濃度為20μg/ml～3000μg/ml，調(diào)節(jié)pH為7.4～9.2以作為內(nèi)水相；③將等體積的所述內(nèi)水相加入脂質(zhì)相上層，混合乳化制得油包水型初乳； ④將2～6倍體積的外水相加入所述油包水型初乳的上層，攪拌形成水包油包水(W/O/W)型復(fù)乳，其中外水相中含有3.2～6g/100ml的滲透壓調(diào)節(jié)物；⑤除去步驟④得到的復(fù)乳中的有機(jī)溶劑而制得絲裂霉素C多泡脂質(zhì)體。其中，上述中性磷脂及膽固醇為成膜材料；膽固醇為膜穩(wěn)定劑，可通過改變磷脂相轉(zhuǎn)變溫度調(diào)節(jié)脂質(zhì)體膜層的流動(dòng)性，從而改善脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，減小貯存過程中因脂質(zhì)體膜層相變引起的藥物滲漏。膽固醇用量過小，其調(diào)節(jié)作用甚微，當(dāng)用量過大時(shí)難以形成脂質(zhì)體的磷脂雙分子層，研究表明當(dāng)磷脂與膽固醇重量比在2∶1～4∶1之間時(shí)形成的脂質(zhì)體最穩(wěn)定。本專利技術(shù)步驟①中所述的中性磷脂是指處于其等電點(diǎn)時(shí)凈電荷為零的磷脂，其選自卵磷脂、大豆磷脂、腦磷脂、鞘磷脂、氫化大豆磷脂、二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿(DMPC)、二油酰磷脂酰膽堿(DOPC)、磷脂酰乙醇胺、二油酰磷脂酰乙醇胺(DOPE)等天然和合成磷脂中的一種或幾種；本專利技術(shù)優(yōu)選自卵磷脂、二油酰磷脂酰膽堿和二油酰磷脂酰乙醇胺。而本專利技術(shù)所說的中性脂質(zhì)是指本身沒有形成囊泡能力的，并且缺少帶電荷的或親水的“頭部”基團(tuán)的油或脂肪，如三油酸甘油酯、三月桂酸甘油酯、三癸酸甘油酯、三辛酸甘油酯、三己酸甘油酯、維生素E和角鯊烯中的一種或幾種。其在脂質(zhì)體中主要起支架作用，分布于非同心水性腔室磷脂雙分子層節(jié)點(diǎn)處，支撐起多泡(多囊)脂質(zhì)體的拓?fù)浣Y(jié)構(gòu)；中性脂質(zhì)是形成多泡(多囊)脂質(zhì)體的決定性因素之一。本專利技術(shù)優(yōu)選三油酸甘油酯。該有機(jī)溶劑可為能溶解脂質(zhì)成分的任何溶劑，通常選自乙醚、氯仿、二氯甲烷、異丙基乙醚、四氫呋喃、鹵代醚和鹵代酯中的一種或幾種。本專利技術(shù)優(yōu)選二氯甲烷或乙醚-氯仿混合物。更佳為二氯甲烷，因二氯甲烷可有效溶解磷脂和類脂，并且毒性低于氯仿，揮干速率更優(yōu)。該步驟①的脂質(zhì)成分中還可以含有帶負(fù)電荷或正電荷的類脂，帶電荷類脂可有效調(diào)節(jié)脂質(zhì)體表面電荷，使脂質(zhì)體帶負(fù)電或正電，以增強(qiáng)制劑穩(wěn)定性。該類脂與中性磷脂的重量比為1∶5～1∶60，類脂用量太少作用不明顯，太多則增加成本，本專利技術(shù)優(yōu)選1∶5～1∶20。本專利技術(shù)所述的帶負(fù)電荷的類脂選自磷脂酰絲氨酸、二棕櫚酰磷脂酰絲氨酸(DPPS)、二硬脂酰磷脂酰絲氨酸(DSPS)、磷脂酰甘油、二棕櫚酰磷脂酰甘油(DPPG)、二硬脂酰磷脂酰甘油(DSPG)、磷脂酰肌醇、二棕櫚酰磷脂酰肌醇(DPPZ)、二硬脂酰磷脂酰肌醇(DSPZ)、磷脂酸、二棕櫚酰磷脂酸(DPPA)及二硬脂酰磷脂酸(DSPA)中的一種或幾種；而所述帶正電荷的類脂選自二酰基三甲胺丙烷、二酰基二甲胺丙烷、硬脂胺(SA)及膠原蛋白中的一種或幾種。本專利技術(shù)的類脂最優(yōu)選硬脂胺和/或膠原蛋白等帶正電荷的類脂。因?yàn)榻z裂霉素C在堿性條件下呈電負(fù)性，使磷脂雙分子層帶相反電荷有利于提高電負(fù)性藥物的包封率，并可減小藥物滲漏。另外，加入一定電荷類脂可增大水性腔室，從而增大包封體積，并可增加脂質(zhì)體制劑的穩(wěn)定性，減小粒子沉降和聚集。考慮到絲裂霉素C的分子結(jié)構(gòu)中含有氨基苯醌、氨基甲酸醌及氨雜三丙烷3個(gè)重要組成部分，在酸、堿、光照、高溫條件下均不穩(wěn)定，在酸性溶液中三元環(huán)發(fā)生酸催化開環(huán)，而堿性過強(qiáng)氨甲酸酯鏈水解；加之絲裂霉素C的降解產(chǎn)物無療效，且毒性更大。故為了加強(qiáng)絲裂霉素C的穩(wěn)定性，本專利技術(shù)人經(jīng)研究發(fā)現(xiàn)在上述步驟②中，調(diào)節(jié)內(nèi)水相pH值至一定堿性范圍，可減少絲裂霉素C的降解，而pH在8.0～8.7范圍則絲裂霉素C最穩(wěn)定。較佳地，步驟②的內(nèi)水相中絲裂霉素C的濃度為500～1000μg/ml，在此范圍內(nèi)，即可具有較高的藥物濃度，又可取得較高的包封率。而步驟②中所述的緩沖鹽溶液則選用脂質(zhì)體制備領(lǐng)域中最常規(guī)使用的磷酸鹽緩沖溶液。步驟②的內(nèi)水相中還可以加入不超過10％(w/v)，一般不超過4％(w/v)的滲透壓調(diào)節(jié)物，以進(jìn)一步增強(qiáng)制劑穩(wěn)定性；其中，此處及下文中所提及的重量體積(w/v)百分比均指g/100ml。本專利技術(shù)所述滲透壓調(diào)節(jié)物可為現(xiàn)有技術(shù)中常用于調(diào)節(jié)滲透壓的物質(zhì)，如葡萄糖、蔗糖、甘露醇、麥芽糖等碳水化合物類，以及氯化鈉等。本專利技術(shù)優(yōu)選葡萄糖和/或蔗糖。上述步驟③中所述混合乳化可采用現(xiàn)有技術(shù)，如通過攪拌、振蕩、本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種絲裂霉素Ｃ多泡脂質(zhì)體的制備方法，其包括下列步驟：①將脂質(zhì)成分溶于有機(jī)溶劑中，以作為脂質(zhì)相，其中該脂質(zhì)成分包括重量比為２∶１～４∶１的中性磷脂和膽固醇，以及在脂質(zhì)成分中占摩爾百分比為２～６％的中性脂質(zhì)，該中性磷脂在脂質(zhì)相中的濃度為 ２０～４０ｍｇ／ｍｌ；②將絲裂霉素Ｃ溶于ｐＨ為７．４～９．２的緩沖鹽溶液中，使其濃度為２０μｇ／ｍｌ～３０００μｇ／ｍｌ，以作為內(nèi)水相；③將等體積的所述內(nèi)水相加入脂質(zhì)相上層，混合乳化制得油包水型初乳；④將２～６倍體積 的外水相加入所述油包水型初乳的上層，混合形成水包油包水型復(fù)乳，其中外水相中含有３．２～６ｇ／１００ｍｌ的滲透壓調(diào)節(jié)物；⑤除去步驟④得到的復(fù)乳中的有機(jī)溶劑而制得絲裂霉素Ｃ多泡脂質(zhì)體。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陸偉根，陳亭亭，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：上海醫(yī)藥工業(yè)研究院，
類型：發(fā)明
國別省市：31[中國|上海]