齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑的用途制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種α36雌激素受體激活劑，其有效成分為齊墩果酸，濃度為0.01μM-10μM。齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑的用途，齊墩果酸的有效作用濃度為0.01μM-10μM，齊墩果酸與藥物學(xué)上可接受的藥物輔料混合形成散劑、膏劑、粉劑、針劑、水劑或注射劑。本發(fā)明專利技術(shù)還公開了齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑在制備防治骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更年期綜合癥、月經(jīng)不調(diào)、不孕癥、陰道炎、尿道炎、骨關(guān)節(jié)炎、椎間盤退變性疾病與免疫性疾病、心血管疾病、老年性癡呆或腫瘤骨轉(zhuǎn)移的藥物或保健食品中的用途。

Use of oleanolic acid as alpha 36 estrogen receptor activator

The invention discloses a alpha 36 estrogen receptor activator, wherein the effective component is oleanolic acid, and the concentration is 0.01 mu M-10 mu M. Oleanolic acid as activator of estrogen receptor alpha 36 uses effective concentration of oleanolic acid was 0.01 M-10 M, pharmaceutical excipients are mixed to form powder, paste, powder, water injection, or injection of oleanolic acid and pharmaceutically acceptable. The invention also discloses a oleanolic acid as the estrogen receptor alpha 36 activator in the preparation of prevention and treatment of osteoporosis, premature ovarian failure, menopausal syndrome, irregular menstruation, infertility, vaginitis, urethritis, arthritis, degenerative disc disease and autoimmune diseases, cardiovascular disease, Alzheimer's disease or drug use of bone metastases or in health food.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑的用途
本專利技術(shù)涉及一種新型的α36雌激素受體激活劑，并提出該α36雌激素受體激活劑在制備各種形式的預(yù)防和治療雌激素降低引起的骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更年期綜合癥、月經(jīng)不調(diào)、不孕癥、陰道炎、尿道炎、骨關(guān)節(jié)炎性、椎間盤退變性疾病與免疫性疾病、心血管疾病、老年性癡呆、腫瘤骨轉(zhuǎn)移等疾病的藥物或保健食品中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
雌激素降低會(huì)引起一系列疾病，包括骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更年期綜合癥、月經(jīng)不調(diào)、不孕癥、陰道炎、尿道炎、炎性骨病、椎間盤退變性疾病與免疫性疾病、心血管疾病、老年性癡呆、腫瘤骨轉(zhuǎn)移等一系列疾病，臨床上有雌激素替代療法，但副作用顯著。因此需要開發(fā)能與雌激素受體結(jié)合，發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，且結(jié)合力持久及溫和的藥物或保健食品。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的上述不足，根據(jù)本專利技術(shù)的實(shí)施例，希望提供一種能與雌激素受體結(jié)合，發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，且結(jié)合力持久及溫和的α36雌激素受體激活劑，并提出其醫(yī)藥用途。根據(jù)實(shí)施例，本專利技術(shù)技術(shù)方案的提出的一種α36雌激素受體激活劑，其有效成分為齊墩果酸，濃度為0.01μM-10μM。齊墩果酸是從中藥女貞子和墨旱蓮提取的有效組分，它可以競(jìng)爭(zhēng)性與雌激素受體亞型α36結(jié)合，從而發(fā)揮廣泛的生物學(xué)效應(yīng)，作用溫和、持久，且可以避免雌激素替代治療的諸多副作用。根據(jù)實(shí)施例，本專利技術(shù)技術(shù)方案的提出是基于齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑，對(duì)雌激素受體具有競(jìng)爭(zhēng)性激活作用。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，本專利技術(shù)技術(shù)方案的提出是基于發(fā)現(xiàn)齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑，其在患處體液中的有效作用濃度為0.01μM-10μM。根據(jù)一個(gè)實(shí)施例，本專利技術(shù)技術(shù)方案中，齊墩果酸與藥物學(xué)上可接受的藥物輔料混合形成散劑、膏劑、粉劑、針劑、水劑或注射劑。根據(jù)實(shí)施例，齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑，為主要有效成分制備的各種形式的藥物或保健食品，可以用于預(yù)防和治療上述骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更年期綜合癥、月經(jīng)不調(diào)、不孕癥、陰道炎、尿道炎、骨關(guān)節(jié)炎癥性疾病、椎間盤退變性疾病與免疫性疾病、心血管疾病、老年性癡呆、腫瘤骨轉(zhuǎn)移等一系列疾病。在使用時(shí)可以采取皮下、靜脈注射或肛腸給藥；注射液的使用可以任意選用生理鹽水、葡萄糖、穩(wěn)定劑、防腐劑、懸浮劑或乳化劑等。相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)，齊墩果酸是從滋腎陰中藥女貞子、墨旱蓮中提取的天然產(chǎn)物，是一種新型的α36雌激素受體激活劑，它可以競(jìng)爭(zhēng)性與雌激素受體亞型α36結(jié)合，從而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，并且作用溫和，可以避免雌激素治療帶來(lái)的諸多副作用。因此，以齊墩果酸為主要有效成分制備的各種形式的藥物或保健食品，可以用于預(yù)防和治療上述雌激素減少性疾病。附圖說(shuō)明圖1A為齊墩果酸的結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)式。圖1B為不同濃度的齊墩果酸對(duì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，細(xì)胞裂解后，α36雌激素受體被同位素標(biāo)記配體結(jié)合率變化柱狀圖。圖2為α36雌激素受體的表達(dá)細(xì)胞種類示意圖。圖3為齊墩果酸通過(guò)激活α36雌激素受體，抑制破骨細(xì)胞形成的柱狀圖。圖4為齊墩果酸通過(guò)激活α36雌激素受體，抑制破骨細(xì)胞骨吸收功能的柱狀圖。具體實(shí)施方式下面結(jié)合附圖和具體實(shí)施例，進(jìn)一步闡述本專利技術(shù)。這些實(shí)施例應(yīng)理解為僅用于說(shuō)明本專利技術(shù)而不用于限制本專利技術(shù)的保護(hù)范圍。在閱讀了本專利技術(shù)記載的內(nèi)容之后，本領(lǐng)域技術(shù)人員可以對(duì)本專利技術(shù)作各種改動(dòng)或修改，這些等效變化和修改同樣落入本專利技術(shù)權(quán)利要求所限定的范圍。本專利技術(shù)以下實(shí)施例中，齊墩果酸(圖1A)采用市售品或按照中藥領(lǐng)域常用提取方法從滋腎陰中藥女貞子、墨旱蓮中提取。M為摩爾濃度，即mol/L；μM為微摩爾每升。本專利技術(shù)以下實(shí)施例中，未特別標(biāo)示的實(shí)驗(yàn)方法，譬如同位素標(biāo)記配體受體結(jié)合實(shí)驗(yàn)、WesternBlot、破骨細(xì)胞分化系統(tǒng)、骨吸收實(shí)驗(yàn)，均采用本領(lǐng)域通用的實(shí)驗(yàn)方法。實(shí)施例1齊墩果酸是一種新型的α36雌激素受體激活劑，對(duì)雌激素受體具有競(jìng)爭(zhēng)性激活作用：蛇床子素(圖1A)是從滋腎陰中藥女貞子、墨旱蓮中提取的天然產(chǎn)物,分子量456.71。實(shí)驗(yàn)研究中，首先使用人子宮內(nèi)膜癌細(xì)胞系(Ishikawa細(xì)胞株)，敲除雌激素受體β后，該細(xì)胞僅表達(dá)α36雌激素受體。用不同濃度的齊墩果酸對(duì)細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)，細(xì)胞裂解后，通過(guò)對(duì)同位素標(biāo)記配體與受體的結(jié)合進(jìn)行檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)齊墩果酸可以劑量依賴性的競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合α36雌激素受體，表現(xiàn)為同位素標(biāo)記的配體與α36雌激素受體結(jié)合率隨著齊墩果酸濃度增大而逐漸降低。研究發(fā)現(xiàn)0.01μM齊墩果酸干預(yù)細(xì)胞時(shí)，有接近80％的α36雌激素受體仍被同位素標(biāo)記配體結(jié)合，0.1μM齊墩果酸干預(yù)細(xì)胞時(shí)，大約到50％的α36雌激素受體仍被同位素標(biāo)記配體結(jié)合，1μM齊墩果酸時(shí),大約10％的α36雌激素受體仍被同位素標(biāo)記配體結(jié)合。5μM齊墩果酸時(shí),僅有極少量(2％)α36雌激素受體仍被同位素標(biāo)記配體結(jié)合。而在10μM齊墩果酸干預(yù)細(xì)胞時(shí)，完全無(wú)同位素標(biāo)記配體結(jié)合，即10μM齊墩果酸可以完全競(jìng)爭(zhēng)性地結(jié)合α36雌激素受體(圖1B)。因此，齊墩果酸100％抑制率的濃度范圍在0.01μM-10μM之間，作用效果較為持久和溫和。實(shí)施例2首先通過(guò)WesternBlot證明，破骨細(xì)胞中主要高表達(dá)α36雌激素受體(圖2)。在體外采用了原代外骨髓單核/巨噬細(xì)胞培養(yǎng)法，分別加入M-CSF(44ng/ml)和RANKL(100ng/ml)進(jìn)行干預(yù)后。同時(shí)采用骨骼系統(tǒng)內(nèi)的成骨細(xì)胞和骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞進(jìn)行對(duì)照。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，分別檢測(cè)α36雌激素受體表達(dá)情況，實(shí)驗(yàn)結(jié)果驗(yàn)證了α36雌激素受體在M-CSF和RANKL誘導(dǎo)的破骨細(xì)胞的表達(dá)(圖2：破骨1和破骨2)顯著高于成骨細(xì)胞和間充質(zhì)干細(xì)胞。本實(shí)驗(yàn)證實(shí)α36雌激素受體主要影響破骨細(xì)胞的生物學(xué)效應(yīng)。實(shí)施例3在體外采用了原代骨髓單核/巨噬細(xì)胞系分化培養(yǎng)法，驗(yàn)證了齊墩果酸競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合α36雌激素受體后的生物學(xué)效應(yīng)。通過(guò)加入M-CSF(44ng/ml)和RANKL(100ng/ml)誘導(dǎo)破骨細(xì)胞形成，并給予適當(dāng)梯度齊墩果酸干預(yù)原代造血干細(xì)胞-破骨細(xì)胞前體細(xì)胞，發(fā)現(xiàn)0.01μM齊墩果酸即可顯著抑制(P<0.01)破骨細(xì)胞形成，抑制作用隨著濃度增大而增強(qiáng)，10μM齊墩果酸可以完全抑制破骨細(xì)胞的形成。因此證明齊墩果酸與結(jié)合α36雌激素受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合后，的確可以發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)，抑制破骨細(xì)胞形成，從而可以用于雌激素降低引起的骨質(zhì)疏松癥的預(yù)防和治療(圖3)。因此，齊墩果酸可以通過(guò)激活α36雌激素受體，預(yù)防和治療雌激素降低引起的骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更年期綜合癥、月經(jīng)不調(diào)、不孕癥、陰道炎、尿道炎、骨關(guān)節(jié)炎癥性疾病、椎間盤退變性疾病與免疫性疾病、心血管疾病、老年性癡呆、腫瘤骨轉(zhuǎn)移，可以用于制成防治上述疾病的藥物或保健食品中。實(shí)施例4應(yīng)用體外原代骨髓單核/巨噬細(xì)胞系分化培養(yǎng)法，驗(yàn)證了齊墩果酸競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合α36雌激素受體后對(duì)破骨細(xì)胞功能的生物學(xué)效應(yīng)。通過(guò)采用M-CSF(44ng/ml)和RANKL(100ng/ml)誘導(dǎo)破骨細(xì)胞生成，在骨片檢測(cè)及破骨細(xì)胞的骨吸收功能，并給予不同濃度齊墩果酸干預(yù)破骨細(xì)胞的骨吸收功能，發(fā)現(xiàn)0.01μM齊墩果酸即可顯著抑制(P<0.01)破骨細(xì)胞骨吸收功能，抑制作用隨著濃度增大而增強(qiáng)，10μM齊墩果酸可以完全抑制生成的破骨細(xì)胞骨吸收功能(圖4)。因此證明齊墩果酸與結(jié)合α36雌激素受體競(jìng)爭(zhēng)性結(jié)合后，可以發(fā)揮抑制破骨細(xì)胞主導(dǎo)的骨吸收功能，影響人體的骨骼系統(tǒng)本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑的用途。

【技術(shù)特征摘要】
1.齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑的用途。2.根據(jù)權(quán)利要求1的用途，其特征是，齊墩果酸的有效作用濃度為0.01μM-10μM。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的用途，其特征是，齊墩果酸與藥物學(xué)上可接受的藥物輔料混合形成散劑、膏劑、粉劑、針劑、水劑或注射劑。4.齊墩果酸作為α36雌激素受體激活劑在制備防治骨質(zhì)疏松癥、卵巢早衰、更...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：趙東峰，王擁軍，施杞，舒冰，楊燕萍，趙永見，唐德志，梁倩倩，李晨光，崔學(xué)軍，笪巍偉，劉書芬，王成龍，王洪伸，盧盛，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬龍華醫(yī)院，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：上海,31