N?乙酰半胱氨酸的新用途制造技術(shù)

本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)公開(kāi)了N?乙酰半胱氨酸的新用途，即N?乙酰半胱氨酸分別在制備含有β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌或殺菌藥物、制備能夠提高細(xì)菌對(duì)β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的抑菌或殺菌藥物、制備能夠降低細(xì)菌對(duì)β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥性的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)的有益效果為：N?乙酰半胱氨酸能夠顯著提高細(xì)菌對(duì)β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的敏感性，從而降低細(xì)菌發(fā)生耐藥的幾率，將N?乙酰半胱氨酸與β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素聯(lián)合使用，比單獨(dú)使用β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素具有更強(qiáng)的抑菌效果。

The new use of N acetylcysteine

The invention discloses a new application of N N-acetylcysteine, N N-acetylcysteine respectively in the preparation with bacteriostatic or bactericidal drugs, beta lactam antibiotic preparation can improve the bacteria on beta lactam antibiotics sensitivity of bacteriostatic or bactericidal drugs, preparation can reduce the application of beta lactam bacteria antibiotics resistance bacteriostatic or bactericidal drug in. The invention has the advantages that the N acetylcysteine can significantly improve the sensitivity of bacteria to beta lactam antibiotics, so as to reduce the probability of occurrence of bacterial resistance, N acetylcysteine and beta lactam antibiotics with antibacterial effect is stronger than the use of beta lactam antibiotics alone.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
N-乙酰半胱氨酸的新用途
本專(zhuān)利技術(shù)涉及抗生素抑菌殺菌
，具體涉及N-乙酰半胱氨酸的新用途。
技術(shù)介紹
病原菌是眾多感染性疾病的罪魁禍?zhǔn)?，?yán)重危害畜牧業(yè)的可持續(xù)發(fā)展和人類(lèi)的身體健康。抗生素尤其是β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素是治愈細(xì)菌性疾病的常用手段。然而，由于該類(lèi)抗生素的不合理使用，導(dǎo)致耐藥菌株逐年增多，極大地降低了抗生素的療效。目前，β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥性在世界各地發(fā)生，并正在上升到危險(xiǎn)高度。新的耐藥機(jī)制正在出現(xiàn)并在全球蔓延，威脅到治療常見(jiàn)傳染病的能力。由于β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素有效性下降，越來(lái)越多的感染變得更難治療，有時(shí)甚至無(wú)藥可治。因此，采用新的途徑預(yù)防和治療細(xì)菌性疾病顯的非常迫切和重要。其中一種技術(shù)方法，是通過(guò)增強(qiáng)細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的敏感度，在不改變抗生素使用劑量甚至降低使用劑量的情況下，提高β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌作用。因此，發(fā)現(xiàn)可提高細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的分子物質(zhì)，將其與β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素聯(lián)合制備成復(fù)方制劑，對(duì)控制細(xì)菌特別是耐藥菌的感染十分重要。N-乙酰半胱氨酸為一含有巰基的化合物,以往多將其作為黏液溶解劑,是一種療效良好而且安全的呼吸道感染用藥中的祛痰劑。其作用機(jī)理是其分子中的巰基能將痰液中粘蛋白的二硫鍵(-S-S-)斷裂,使黏蛋白分解,從而降低痰的粘滯性,使之容易咳出而改善癥狀。N-乙酰半胱氨酸作為一種巰基供給體,除具有上述作用外,主要還是一種抗氧化劑,具有干擾自由基生成,清除已生成的自由基,調(diào)節(jié)細(xì)胞的代謝活性,預(yù)防DNA的損傷,調(diào)整基因的表達(dá)和信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),抗細(xì)胞凋亡,抗血管生成,抑制惡性腫瘤發(fā)展,以及抑制新生物的生成和轉(zhuǎn)移的作用。然而，關(guān)于N-乙酰半胱氨酸調(diào)節(jié)細(xì)菌β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的研究尚未見(jiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的目的就是針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中的缺陷，提供了N-乙酰半胱氨酸作為一種提高病原菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的小分子物質(zhì)，制備能夠高效抑制細(xì)菌的藥物的新用途。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本專(zhuān)利技術(shù)提供的技術(shù)方案為：N-乙酰半胱氨酸在制備含有β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。本專(zhuān)利技術(shù)的第二個(gè)目的是提供了N-乙酰半胱氨酸在制備能夠提高細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。本專(zhuān)利技術(shù)的第三個(gè)目的是提供了N-乙酰半胱氨酸在制備能夠降低細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥性的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述抑菌或殺菌為抑制或殺滅金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和/或無(wú)乳鏈球菌。細(xì)菌包括但不限于金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌。這些細(xì)菌是人類(lèi)和經(jīng)濟(jì)動(dòng)物的常見(jiàn)病原菌。涵蓋了革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌（金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌）和陰性細(xì)菌（大腸桿菌）；球菌（金黃色葡萄球菌）、鏈球菌（停乳鏈球菌、無(wú)乳鏈球菌）和桿菌（大腸桿菌）。這些細(xì)菌可以是青霉素或氨芐西林的敏感菌株，也可以是耐藥菌株。這些病原菌較為常見(jiàn)的，且常見(jiàn)其耐藥菌株，同時(shí)大腸桿菌又是研究細(xì)菌耐藥的模式細(xì)菌，因此這些細(xì)菌可作為敏感菌株和耐藥菌株的典型代表。進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述的β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素為青霉素、氨芐西林和/或頭孢噻吩?？股匕ǖ幌抻谇嗝顾亍逼S西林和頭孢噻吩。因?yàn)榍嗝顾?、氨芐西林和頭孢噻吩均屬于β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素，這些抗生素的作用機(jī)制均相似，都能抑制胞壁粘肽合成酶，即青霉素結(jié)合蛋白，從而阻礙細(xì)胞壁粘肽合成，使細(xì)菌胞壁缺損，菌體膨脹裂解，因此這些抗生素可作為β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的典型代表。進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述抑菌或殺菌藥物中，N-乙酰半胱氨酸與β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的劑量比例按重量比計(jì)為1：（0.002-4）。進(jìn)一步的，上述的應(yīng)用，所述抑菌或殺菌藥物中，N-乙酰半胱氨酸的使用量為0.32mg/mL-4.8mg/mL。本專(zhuān)利技術(shù)的有益效果為：本專(zhuān)利技術(shù)通過(guò)按一定比例添加N-乙酰半胱氨酸后，發(fā)現(xiàn)青霉素對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度顯著降低，說(shuō)明N-乙酰半胱氨酸可以提高金黃色葡萄球菌對(duì)青霉素的敏感性。進(jìn)一步發(fā)現(xiàn)，N-乙酰半胱氨酸同樣可以降低β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素氨芐西林和頭孢噻吩對(duì)金黃色葡萄球菌的最低抑菌濃度。試驗(yàn)還發(fā)現(xiàn)，N-乙酰半胱氨酸能夠提高停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌分別對(duì)青霉素、氨芐西林頭孢噻吩的敏感性。上述結(jié)果表明，可以通過(guò)N-乙酰半胱氨酸與β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素聯(lián)合使用來(lái)增強(qiáng)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌效果，以達(dá)到治療細(xì)菌性疾病的目的，為治療耐藥細(xì)菌引發(fā)的疾病提供了一種新的技術(shù)方法。通過(guò)本專(zhuān)利技術(shù)所公開(kāi)的內(nèi)容，還可制備出一種新的抑菌或殺菌劑，該劑含有N-乙酰半胱氨酸和β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素；或者一種提高β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素對(duì)耐藥菌抑菌或殺菌作用的制劑，其主要成分為N-乙酰半胱氨酸和β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素。具體實(shí)施方式實(shí)施例1：N-乙酰半胱氨酸提高金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌對(duì)青霉素的敏感性：1.實(shí)驗(yàn)材料：（1）菌株：金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌均來(lái)自于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所微生物課題組。（2）N-乙酰半胱氨酸：為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品，貨號(hào)為A7250。稱(chēng)量粉劑溶于超純水，0.2微米濾器過(guò)濾后4℃保存。（3）水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基：為英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品，貨號(hào)為CM0337B。稱(chēng)量粉劑溶于超純水，121℃高壓滅菌，至室溫50-60℃左右到入一次性90mm培養(yǎng)皿制成水解酪蛋白平板。（4）青霉素E-test試條：為法國(guó)梅里埃公司產(chǎn)品，貨號(hào)為502618。2.實(shí)驗(yàn)方法：用磷酸緩沖液（PBS，PH：7.4）將分離純化的菌株菌液濃度調(diào)至0.5麥?zhǔn)蠁挝?，?xì)菌濃度為5×107-5×108CFU/mL。無(wú)菌條件下制備含有N-乙酰半胱氨酸的水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基20mL（鏈球菌需加5%的無(wú)菌脫纖綿羊血），N-乙酰半胱氨酸的含量分別為0（對(duì)照組）、0.4、0.8和1.6mg/mL。用滅菌的棉簽拭子浸入細(xì)菌懸液中，在管壁將多余的菌液擠出，然后均勻涂布在相應(yīng)水解酪蛋白平板上（鏈球菌需加5%的脫纖綿羊血），室溫靜置3-5mim后，無(wú)菌操作將青霉素E-test試條貼于上述培養(yǎng)基，37℃培養(yǎng)24h，讀取各個(gè)水解酪蛋白平板上青霉素的最低抑菌濃度（MICs）。結(jié)果如表1所示，與對(duì)照組相比，不同濃度的N-乙酰半胱氨酸添加組中青霉素最低抑菌濃度均明顯降低，且隨著N-乙酰半胱氨酸濃度的增大，青霉素最低抑菌濃度降低的幅度也增大。說(shuō)明N-乙酰半胱氨酸可提高金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌對(duì)青霉素的敏感性，且具有N-乙酰半胱氨酸濃度效應(yīng)。表1顯示為N-乙酰半胱氨酸對(duì)金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌的青霉素敏感性的調(diào)節(jié)。表1其中，NAC代表N-乙酰半胱氨酸。實(shí)施例2：N-乙酰半胱氨酸提高金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌對(duì)氨芐西林的敏感性：1.實(shí)驗(yàn)材料：（1）菌株：金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和無(wú)乳鏈球菌均來(lái)自于中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所微生物課題組。（2）N-乙酰半胱氨酸：為美國(guó)Sigma公司產(chǎn)品，貨號(hào)為A7250。稱(chēng)量粉劑溶于超純水，0.2微米濾器過(guò)濾后4℃保存。（3）水解酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基：為英國(guó)Oxoid公司產(chǎn)品，貨號(hào)為CM0337B。稱(chēng)量粉劑溶于超純水，121℃高壓滅菌，至室溫50-60℃左右到入一次性90本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
N?乙酰半胱氨酸在制備含有β?內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。

【技術(shù)特征摘要】
1.N-乙酰半胱氨酸在制備含有β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。2.N-乙酰半胱氨酸在制備能夠提高細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素敏感性的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。3.N-乙酰半胱氨酸在制備能夠降低細(xì)菌對(duì)β-內(nèi)酰胺類(lèi)抗生素耐藥性的抑菌或殺菌藥物中的應(yīng)用。4.根據(jù)權(quán)利要求1-3任一所述的應(yīng)用，其特征在于，所述抑菌或殺菌為抑制或殺滅金黃色葡萄球菌、停乳鏈球菌、大腸桿菌和/或無(wú)乳鏈球菌。5.根...

【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：楊峰，李宏勝，王玲，王旭榮，羅金印，李新圃，張世棟，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：中國(guó)農(nóng)業(yè)科學(xué)院蘭州畜牧與獸藥研究所，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：甘肅,62