山奈酚在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用制造技術

本發明專利技術公開了山奈酚在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用。山奈酚存在于多種可食植物(包括水果、蔬菜和豆類)及傳統中藥(菊花、覆盆子、菟絲子、黃芪和銀杏葉等)中。通過觀察山奈酚對過氧化氫(H

Kaempferol in preparation for prevention and treatment of drug application in retinal injury disease

The present invention discloses the preparation of kaempferol in the prevention and treatment of drug application in retinal injury disease. Kaempferol in a variety of edible plants (including fruits, vegetables and legumes) and traditional Chinese medicine (chrysanthemum, raspberry, dodder, Astragalus and gingko biloba) in. Through the observation of kaempferol on hydrogen peroxide (H

【技術實現步驟摘要】
山奈酚在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用
本專利技術涉及一種天然植物單體新的藥理作用，具體的涉及山奈酚在制備預防和治療視網膜損傷性疾病的保健品或新藥中的應用，為眼科相關疾病的預防和臨床治療開拓新的方法和思路。
技術介紹
視網膜色素上皮細胞(RPE)具有復雜的生物學功能，為感覺層視網膜的外層細胞提供營養、吞噬和消化光感受器細胞外節盤膜，維持新陳代謝等重要功能。RPE與脈絡膜最內層的玻璃膜(Bruch膜)粘連極緊密，與脈絡膜毛細血管層共同組成一個統一的功能單位，即RPE-玻璃膜-脈絡膜毛細血管復合體，對維持光感受器微環境有重要作用。RPE細胞的損傷可引起該復合體的損害，進一步引起很多眼底病的發生，如年齡相關性黃斑變性，視網膜色素變性和各種脈絡膜視網膜病變等。年齡相關性黃斑變性(age-relatedmaculardegeneration，AMD)是一種隨著年齡增長發病率逐漸升高的眼部退行性病變，能造成進行性的、不可逆的中心視力喪失。在發達國家中，AMD己經成為老齡人口視力喪失的主要原因，大型的流行病學調查顯示，西方國家43歲以上人群中AMD的患病率為1.7％-15.6％。世界衛生組織的調查報告表明，全球盲人中大約有8.7％為AMD導致的不可逆盲。全世界大約有3000萬AMD患者，每年大約有50萬人因AMD而致盲。在我國，由于老齡化進程加快，AMD患者也逐年增多，在部分地區，50歲以上人群中AMD的患病率可以達到15.5％以上，而且患病率和致盲率隨年齡增加而增加。隨著社會經濟水平和醫療事業的發展，白內障和角膜病等可逆性致盲性眼病己經得到了有效地控制，但是AMD作為一種不可逆的致盲性眼病，其發病率逐年上升，己經成為了一項不可忽視的公共衛生問題。氧化應激是多種AMD的危險因素中可能的共同作用機制。AMD是與年齡相伴隨的疾病，隨著年齡增長，衰老細胞中產生過多的活性氧產物，造成機體氧化系統與抗氧化系統之間的不平衡，從而造成組織損傷和功能缺失。環境因素如紫外線照射增多、吸煙等也是與AMD相關的危險因素，這兩者都己被證明可以造成活性氧的增多，從而造成視網膜組織的氧化應激。其他因素如抗氧化維生素攝入不足以及肥胖等也可以造成視網膜組織氧化應激水平的增加，相關的臨床試驗結果則證實了抗氧化維生素與AMD的關系。綜上所述，氧化應激是AMD的重要發病機制之一。AMD是一種退行性改變的致盲疾病，雖然進展緩慢，但一旦發展成滲出型AMD(濕性AMD)則可在短期內對視力造成極大的損害。因此，當前對滲出型AMD的治療主要是針對脈絡膜新生血管(CNV)。視網膜光凝術是一種最早用于治療AMD的方法，此外還有經瞳孔溫熱療法(Transpupillarythermotherapy,TTT)、光動力療法(Photodynamictherapy，PDT)、手術治療和近年來成為研究熱點的抗血管內皮生長因子(VEGF)藥物治療。雖然這些治療均取得一定效果，但黃斑區位置特殊，多數治療只能針對已形成的CNV，并且費用昂貴，因此尋找另一種可預防AMD的發生、可逆轉AMD的發展、價格經濟和副作用少的新療法變得很必要。越來越多研究表明植物提取物對預防和逆轉AMD有顯著效果。在當前眾多的植物提取物研究中，學者們對類胡籮卜素特別是葉黃素和玉米黃質尤為關注。Nidhi等研究證實在日常飲食中多攝取類胡蘿卜素，尤其是葉黃素和玉米黃質有助于減低患AMD的風險。但這些植物提取物對RPE細胞損傷的保護作用弱，有效藥物濃度高，藥效低，因此尋求優于葉黃素的更強有效的藥物治療AMD變得十分必要。山萘酚(Kaempferol)屬于黃酮醇類化合物，主要來源于姜科植物山奈的根莖，并大量存在于水果蔬菜和豆類中(如、西蘭花、卷心菜、甘藍、豆類、韭菜、番茄、樹莓、草莓和葡萄等)，另外還存在于某些傳統中草藥(例如菊花、覆盆子、菟絲子、黃芪、銀杏等)中。近年來，人們對于山奈酚的抗癌方面做了大量研究，并證實一定濃度山奈酚有誘導肺癌、胃癌、食管癌、肝癌細胞凋亡的作用。關于山奈酚對氧化應激狀態下的視網膜色素上皮細胞的影響國內外尚未有相關報道，山奈酚是否有可能通過減少視網膜色素上皮細胞的氧化應激損傷來延緩AMD的發生和發展，還有待于研究。
技術實現思路
本專利技術的目的是通過證實山奈酚對于氧化應激狀態下的視網膜色素上皮細胞的保護作用，并通過細胞凋亡途徑來研究山奈酚保護作用的分子機制，為開發山奈酚未知的生物活性及將來的臨床治療作用提供新的理論支持。本專利技術采用的技術方案是：山奈酚單用或與抗視網膜損傷保護藥物聯合在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用。上述的應用，所述的視網膜損傷性疾病包括視網膜色素上皮細胞損傷引起的視網膜損傷性疾病。上述的應用，所述的視網膜損傷性疾病包括氧化應激損傷視網膜色素上皮細胞引起的視網膜損傷性疾病。上述的應用，所述的視網膜色素上皮細胞為ARPE-19。上述的應用，所述的視網膜損傷性疾病包括年齡相關性黃斑變性疾病、視網膜色素變性疾病和脈絡膜視網膜病變疾病。上述的應用，所述的抗視網膜損傷保護藥物為葉黃素，胡蘿卜素，花青素，槲皮素，枸杞多糖和黃芪多糖。上述的應用，有效劑量20nM-50nM。本專利技術的有益效果是：本專利技術通過對山奈酚對于氧化應激狀態下的視網膜色素上皮細胞的保護作用，并通過細胞凋亡途徑來研究山奈酚保護作用的分子機制，通過研究發現，山奈酚對氧化應激損傷的ARPE-19人視網膜色素上皮細胞具有保護作用，而對正常的ARPE-19細胞沒有表現出明顯的毒性作用，對RPE細胞損傷的保護作用更強，而且藥效較高，未來可能成為臨床上治療AMD的一種強有效的藥物。而且可以通過與現有的治療眼部疾病的藥物(如葉黃素，胡蘿卜素，花青素，槲皮素，枸杞多糖，黃芪多糖等)聯合，達到治療和預防RPE細胞損傷引起的包括年齡相關性黃斑變性疾病、視網膜色素變性疾病和脈絡膜視網膜病變疾病。附圖說明圖1是本專利技術的實驗機理示意圖。圖2A是不同濃度的過氧化氫(H2O2)對ARPE-19細胞模型建立圖。圖2B是不同濃度的山奈酚對ARPE-19細胞毒性圖。圖2C是不同濃度的山奈酚對氧化應激損傷的ARPE-19細胞存活率的影響圖。圖2D是不同濃度的葉黃素對氧化應激損傷的ARPE-19細胞存活率的影響圖(陽性藥對照)。圖3A是流式細胞儀AnnexinV-FITC/PI法檢測山奈酚(20nM，50nM)對H2O2誘導的APRE-19細凋亡的影響圖。圖3B是流式細胞術檢測的各實驗組ARPE-19細胞凋亡率(％)圖。圖4A是山奈酚(20nM，50nM)對H2O2氧化應激損傷的各實驗組ARPE-19細胞的ROS活性檢測圖。圖4B是山奈酚(20nM，50nM)對H2O2氧化應激損傷的各實驗組ARPE-19細胞的SOD活性檢測圖。圖5A是山奈酚(20nM，50nM)對H2O2氧化應激損傷的ARPE-19細胞的BaxmRNA表達水平。圖5B是山奈酚(20nM，50nM)對H2O2氧化應激損傷的ARPE-19細胞的Bcl-2mRNA表達水平。圖5C是山奈酚(20nM，50nM)對H2O2氧化應激損傷的ARPE-19細胞的Caspase-3mRNA表達水平。圖6A是Westernblot檢測各實驗組細胞Bax、Bcl-2和Caspase-3蛋本文檔來自技高網...

【技術保護點】
山奈酚單用或與抗視網膜損傷保護藥物聯合在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用。

【技術特征摘要】
1.山奈酚單用或與抗視網膜損傷保護藥物聯合在制備預防和治療視網膜損傷性疾病藥物中的應用。2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的視網膜損傷性疾病包括視網膜色素上皮細胞損傷引起的視網膜損傷性疾病。3.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的視網膜損傷性疾病包括氧化應激損傷視網膜色素上皮細胞引起的視網膜損傷性疾病。4.根據權利要求2或3所述的應用，其特征在于，...

【專利技術屬性】
技術研發人員：張東蕾，杜威威，何偉，何向東，
申請(專利權)人：何偉，
類型：發明
國別省市：遼寧,21