本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種利用熱榨花生粕制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，包括以下步驟：花生粕粉碎和脫脂后加入蒸餾水，調(diào)節(jié)pH值，加入復(fù)合植物水解酶ViscozymeL，微波輔助酶解，得到ViscozymeL酶解液；調(diào)節(jié)pH值，加入復(fù)合蛋白酶，微波輔助酶解，滅酶，離心，沉淀冷凍干燥得到發(fā)酵專用花生蛋白。以本發(fā)明專利技術(shù)制得的發(fā)酵專用花生蛋白，蛋白質(zhì)含量高，溶解性好，生物效價(jià)高，可以作為抗生素發(fā)酵、食品釀造、微生物培養(yǎng)的專用氮源，也可直接作為發(fā)酵原料用于制備微生物固態(tài)發(fā)酵蛋白和植物蛋白飼料，適合工業(yè)化生產(chǎn)。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及利用熱榨花生柏制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，屬于食品蛋白加工領(lǐng)域。
技術(shù)介紹
花生是我國重要的油料作物和經(jīng)濟(jì)作物。目前，我國的花生加工利用以榨油為主，每年全國約有50%?60%的花生用于榨油，且多采用熱壓榨工藝提取花生油，榨油后剩下的餅柏由于蛋白過度變性使得營養(yǎng)價(jià)值降低，通常作為家畜飼料、肥料，產(chǎn)品附加值低，資源浪費(fèi)嚴(yán)重。然而，花生柏含有豐富的蛋白質(zhì)資源以及一些不溶性的花生纖維成分，具有很高的利用價(jià)值。因此，開發(fā)熱榨花生蛋白產(chǎn)品，提升資源附加值和延長花生產(chǎn)業(yè)鏈，是實(shí)現(xiàn)花生資源可持續(xù)發(fā)展亟待解決的關(guān)鍵技術(shù)問題。 發(fā)酵專用花生蛋白是一種淡紅棕色、略帶花生香氣的粉末狀固體，蛋白質(zhì)含量高，脂肪含量極低，溶解性好，生物學(xué)效價(jià)高。該產(chǎn)品可作為微生物發(fā)酵的專用氮源，如配制培養(yǎng)基時(shí)替代蛋白胨或酵母浸膏；在金霉素、頭孢霉素、麥迪霉素等抗生素發(fā)酵或有機(jī)酸、氨基酸、維生素、黃原膠等食品釀造發(fā)酵中利用。此外，發(fā)酵專用花生蛋白還可以作為發(fā)酵原料用于微生物固態(tài)發(fā)酵蛋白和植物蛋白飼料的生產(chǎn)中。 目前，制備發(fā)酵專用花生蛋白多采用堿提酸沉法制備花生分離蛋白、乙醇浸提法制備花生濃縮蛋白或直接將花生柏超微粉碎方法。堿提酸沉法得到的分離蛋白雖然蛋白含量高，但是酸、堿處理后蛋白的溶解性低，且酸堿廢液污染環(huán)境，后續(xù)處理成本高。乙醇浸提法中蛋白質(zhì)長時(shí)間在乙醇中，易變性，蛋白功能性質(zhì)差。花生柏直接超微粉碎法得到的產(chǎn)品蛋白含量低，脂肪和其它雜質(zhì)多，易導(dǎo)致發(fā)酵效率低。因此，需要一種條件溫和、環(huán)境友好、成本低、易操作的生產(chǎn)發(fā)酵專用花生蛋白方法。而發(fā)酵專用蛋白的酶法修飾是用蛋白酶對蛋白質(zhì)的有限水解，其中，適度酶解和輕度酶解是限制性酶解。蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白酶水解后部分肽鍵斷裂，外切酶水解后疏水基團(tuán)降解成短鏈、小分子蛋白肽，蛋白質(zhì)分子構(gòu)型改變；經(jīng)內(nèi)切酶水解后使親水基團(tuán)暴露出來，蛋白質(zhì)分子上的極性基團(tuán)增加，則親水性增強(qiáng)，氮溶指數(shù)和溶解性增大，從而實(shí)現(xiàn)蛋白質(zhì)功能性質(zhì)的改變和生理活性的提高。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于為解決上述技術(shù)中存在的技術(shù)難題，提供一種利用熱榨花生柏制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法。該方法將復(fù)合植物水解酶和復(fù)合蛋白酶分步酶解技術(shù)與微波輔助萃取技術(shù)相結(jié)合，共同作用于花生柏組分，花生柏細(xì)胞壁在復(fù)合植物水解酶的作用下被破壞，使得多糖、蛋白等內(nèi)容物充分暴露出來，多糖成分溶于溶劑可離心除去，而蛋白質(zhì)經(jīng)蛋白酶限制性酶解，大分子蛋白水解成短鏈蛋白，不僅提高了蛋白的提取率和純度，還可以改善蛋白的溶解性，微波輔助酶解縮短了反應(yīng)時(shí)間，達(dá)到溫和條件下制備發(fā)酵專用花生蛋白的目的。 為達(dá)到上述目的，本專利技術(shù)所采用的技術(shù)方案是:一種利用熱榨花生柏制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，其步驟包括:一、花生柏粉碎過100目篩，篩下物加入石油醚脫脂，得到花生柏粉，加入蒸餾水，微波加熱混合均勻，調(diào)節(jié)pH值,加入復(fù)合植物水解酶Viscozyme L (其中包括阿拉伯聚糖酶、纖維素酶、葡聚糖酶、半纖維素酶和木聚糖酶在內(nèi)的復(fù)合多糖酶)，微波輔助酶解，得到Viscozyme L 酶解液。 二、調(diào)節(jié)酶解液pH值，加入復(fù)合蛋白酶，微波輔助酶解，滅酶，離心，沉淀冷凍干燥得到發(fā)酵專用花生蛋白。 優(yōu)選地，步驟一所述的花生柏粉碎篩下物與石油醚的質(zhì)量與體積比為1:10.3-12.8 (g/ml)，石油醚的沸程為30_60°C，脫脂條件為52 °C恒溫水浴振蕩器中，275r/min回旋式振蕩脫脂12h，脫脂后的花生柏粉與蒸餾水的質(zhì)量與體積比為1:6.5-8.5(g/ml)，微波功率lOOOw、加熱溫度45°C、加熱時(shí)間2.0min條件下混合均勻，pH值調(diào)節(jié)至 5.0-5.5，Viscozyme L加入量為每克花生柏粉20-25FBG (FBG為Viscozyme L的酶活單位)，微波功率1000?、加熱溫度45-50°C、加熱時(shí)間7.0-9.0min條件下酶解。 優(yōu)選地，步驟二所述的pH值調(diào)節(jié)至6.0-7.0，復(fù)合蛋白酶為風(fēng)味蛋白酶Flavourzyme、中性蛋白酶 Neutral Protease、復(fù)合蛋白酶 Protamex 以 2.02:1.75:1.23 比例混合的復(fù)合酶，加入量為每克花生柏粉3200-4000U(U為復(fù)合蛋白酶的酶活單位)，酶解的條件為微波功率800w、加熱溫度40-46°C、加熱時(shí)間5.5-10.5min, 100°C滅酶5min，7500r/min離心20min，冷凍干燥條件為_55°C、真空度0.1MPa，干燥24h。 本專利技術(shù)的有益效果是:根據(jù)本專利技術(shù)，能夠提供蛋白質(zhì)含量高，溶解性好，生物效價(jià)高，既可以作為抗生素發(fā)酵、食品釀造、微生物培養(yǎng)的專用氮源，也可直接作為發(fā)酵原料用于制備微生物固態(tài)發(fā)酵蛋白和植物蛋白飼料的發(fā)酵專用花生蛋白產(chǎn)品，適合工業(yè)化生產(chǎn)。 【具體實(shí)施方式】 采用GB 5009.5-2010、GB/T5009.6-2003、GB/T5009.3-2010 和 GB/T5009.4-2010對本專利技術(shù)實(shí)施例中制備的發(fā)酵專用花生蛋白的組分蛋白、脂肪、水分和灰分含量進(jìn)行測定分析。 實(shí)施例1花生柏粉碎過100目篩，篩下物加入11.5倍于其質(zhì)量的沸程為30-60°C的石油醚，在52°C恒溫水浴振蕩器中，以275r/min回旋式振蕩脫脂12h，通風(fēng)櫥中揮發(fā)石油醚得到脫脂花生柏粉，以花生柏粉與蒸餾水的質(zhì)量與體積比為1:7.5 (g/ml)加入蒸餾水，在微波功率1000?、加熱溫度45°C條件下，微波加熱2.0min混合均勻，得到花生柏粉懸浮液，調(diào)節(jié)懸浮液PH值至5.2，加入每克花生柏粉21.5FBG (FBG為復(fù)合植物水解酶Viscozyme L的酶活單位)的Viscozyme L,在微波功率1000w、加熱溫度46.5°C條件下,微波輔助酶解7.5min,得到Viscozyme L酶解液。調(diào)節(jié)酶解液pH值至6.5,加入以風(fēng)味蛋白酶Flavourzyme:中性蛋白酶Neutral Protease:復(fù)合蛋白酶Protamex=2.02:1.75:1.23比例混合的復(fù)合蛋白酶，加入量為每克花生柏粉3755U (U為復(fù)合蛋白酶的酶活單位)，在微波功率800w、加熱溫度42.5°C條件下,微波輔助酶解6.8min, 100°C滅酶5min, 7500r/min離心20min,取沉淀在-55°C、真空度0.1MPa條件下，冷凍干燥24h得到發(fā)酵專用花生蛋白。發(fā)酵專用花生蛋白的蛋白質(zhì)含量為87.53%，脂肪含量為0.71%，水分含量為6.33%，灰分為3.21%，溶解性為78.49%，采用啤酒酵母固態(tài)發(fā)酵法，取料液比為1:0.5的發(fā)酵專用花生蛋白加入營養(yǎng)鹽溶液(含有KH2P04、MgS047H20、(NH4)2S04、尿素、葡萄糖)，加入培養(yǎng)27h處于對數(shù)生長期的啤酒酵母菌液3ml，在25 °C條件下，靜置發(fā)酵36h，制備出肽轉(zhuǎn)化率為56.35%的高營養(yǎng)飼料蛋白，該飼料蛋白可添加于家禽、水產(chǎn)魚、蝦、鮑魚、海參等飼料中。 實(shí)施例2花生柏粉碎過100目篩，篩下物加入12.2倍于其質(zhì)量的沸程為30-60°C的石油醚，在52°C恒溫水浴振蕩器中，以275r/min回旋式振蕩脫脂12h，通風(fēng)櫥中揮發(fā)石油醚得到脫脂花生柏粉，以花生柏粉與蒸餾水的本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種利用熱榨花生粕制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，包括以下步驟：（1）花生粕粉碎過100目篩，篩下物加入石油醚脫脂，得到花生粕粉，加入蒸餾水，微波加熱混合均勻，調(diào)節(jié)pH值，加入復(fù)合植物水解酶Viscozyme?L，微波輔助酶解，得到Viscozyme?L酶解液；（2）調(diào)節(jié)酶解液pH值，加入復(fù)合蛋白酶，微波輔助酶解，滅酶，離心，沉淀冷凍干燥得到發(fā)酵專用花生蛋白。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種利用熱榨花生柏制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，包括以下步驟: (1)花生柏粉碎過100目篩，篩下物加入石油醚脫脂，得到花生柏粉，加入蒸餾水，微波加熱混合均勻，調(diào)節(jié)pH值,加入復(fù)合植物水解酶Viscozyme L,微波輔助酶解，得到Viscozyme L 酶解液； (2)調(diào)節(jié)酶解液pH值，加入復(fù)合蛋白酶，微波輔助酶解，滅酶，離心，沉淀冷凍干燥得到發(fā)酵專用花生蛋白。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的利用熱榨花生柏制備發(fā)酵專用花生蛋白的方法，其特征在于:步驟(1)所述的花生柏粉碎篩下物與石油醚的質(zhì)量與體積比為1:10.3-12.8 (g/ml),石油醚的沸程為30-60°C，脫脂條件為52°C恒溫水浴振蕩器中，275r/min回旋式振蕩脫脂12h，脫脂后的花生柏粉與蒸餾水的質(zhì)量與體積比為1:6.5-8.5 (g/ml)，微波功率lOOOw、加熱溫度45°C、加熱時(shí)間2.0min條件下混合均勻...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：齊宏濤，
申請(專利權(quán))人：青島博之源生物技術(shù)有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：山東;37
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