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    發(fā)酵法生產(chǎn)α-酮戊二酸的殘?zhí)强刂品椒夹g(shù)

    技術(shù)編號(hào):8903543 閱讀:305 留言:0更新日期:2013-07-11 00:39
    一種發(fā)酵法生產(chǎn)α-酮戊二酸的殘?zhí)强刂品椒āT摲椒ㄒ怨劝彼岚魻顥U菌(Corynebacterium?glutamicum)GKG-047(保藏編號(hào)為CGMCC?NO.5481)為生產(chǎn)菌株,利用發(fā)酵控制策略,流加質(zhì)量濃度為90%~70%的口服葡萄糖溶液,使其在發(fā)酵液中大量積累α-酮戊二酸。長(zhǎng)菌階段,菌體利用過(guò)量的葡萄糖合成自身生長(zhǎng)所需物質(zhì);產(chǎn)酸階段,控制發(fā)酵液中的殘?zhí)菨舛龋蛊滟|(zhì)量濃度維持在3%~2%,同時(shí)限制發(fā)酵培養(yǎng)基氮源的供應(yīng),發(fā)酵時(shí)間35~40h,α-酮戊二酸產(chǎn)量為42.5g/L。本發(fā)明專利技術(shù)與國(guó)內(nèi)其它發(fā)酵生產(chǎn)α-酮戊二酸的方法(需要發(fā)酵6天)相比,具有發(fā)酵周期短的特點(diǎn)。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)屬于生物工程領(lǐng)域,涉及發(fā)酵過(guò)程控制,特別是一種發(fā)酵工程中殘?zhí)堑目刂撇呗裕瑧?yīng)用于α-酮戊二酸的發(fā)酵法生產(chǎn)。
    技術(shù)介紹
    α -酮戊二酸(a -ketoglutarate, a -KG),也稱2_氧代戊二酸或α -羰基戊二酸,是分子式為C5H6O5、相對(duì)分子質(zhì)量為146.1的白色或微黃色的結(jié)晶,其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下:權(quán)利要求1.一種,其特征在于:以谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum)GKG-047為生產(chǎn)菌株,發(fā)酵生產(chǎn)α-酮戍二酸,發(fā)酵時(shí)間35 40h,初始發(fā)酵發(fā)酵時(shí),發(fā)酵液中底糖濃度為7% 9%,發(fā)酵過(guò)程中,控制發(fā)酵液中殘?zhí)菨舛染S持在3% 2%,發(fā)酵后期,即發(fā)酵30至發(fā)酵結(jié)束,發(fā)酵液中殘?zhí)菓?yīng)該嚴(yán)格高于1%。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法,其特征在于該方法的具體操作如下,以谷氨酸棒狀桿菌為出發(fā)菌株,接種至活化斜面,32°C培養(yǎng)12 14h后,用接種環(huán)刮取斜面菌種接種至種子培養(yǎng)基,32°C,200rpm培養(yǎng)7 8h ;按10%的接種量轉(zhuǎn)接至含底糖為7% 9%的發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐中,34°C,開(kāi)始發(fā)酵;以后每?jī)蓚€(gè)小時(shí)取樣,檢測(cè)發(fā)酵液的殘?zhí)菨舛龋ㄟ^(guò)流加90% 70%的口服葡萄糖溶液,使得發(fā)酵液中殘?zhí)菨舛染S持在3% 2%,發(fā)酵后期,即發(fā)酵30至發(fā)酵結(jié)束,發(fā)酵液中殘?zhí)菓?yīng)該嚴(yán)格高于1%。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述方法,其特征是: ⑴斜面培養(yǎng)基成分以g/L計(jì)為:蛋白胨10,酵母粉5,NaC12.5,瓊脂30,pH7.0 7.2 ; ⑵種子培養(yǎng)基成分:口服葡萄糖25g/L,玉米漿45mL/L,豆?jié)?0mL/L,K2HPO4.3Η202.2g/L,MgSO4.7H200.9g/L,NH3N036g/L,尿素 3g/L ; ⑶液體發(fā)酵培養(yǎng)基成分:口服葡萄糖80g/L, Na2HPO4.12Η203.85g/L,VB10.4mg/L,MgSO4.7H202g/L, MnS045mg/L, FeS045mg/L, ZnS045mg/L, KCll.333g/L,玉米漿 3mL/L,糖蜜1.lg/L,ii濃 lOmL/Lo4.根據(jù)權(quán)利要求1 至3中任一項(xiàng)所述的方法,其特征在于:所述的谷氨酸棒狀桿菌,替換為芽孢桿菌類(lèi)細(xì)菌,腸桿菌科細(xì)菌、或酵母類(lèi)真菌。全文摘要一種。該方法以谷氨酸棒狀桿菌(Corynebacterium glutamicum)GKG-047(保藏編號(hào)為CGMCC NO.5481)為生產(chǎn)菌株,利用發(fā)酵控制策略,流加質(zhì)量濃度為90%~70%的口服葡萄糖溶液,使其在發(fā)酵液中大量積累α-酮戊二酸。長(zhǎng)菌階段,菌體利用過(guò)量的葡萄糖合成自身生長(zhǎng)所需物質(zhì);產(chǎn)酸階段,控制發(fā)酵液中的殘?zhí)菨舛龋蛊滟|(zhì)量濃度維持在3%~2%,同時(shí)限制發(fā)酵培養(yǎng)基氮源的供應(yīng),發(fā)酵時(shí)間35~40h,α-酮戊二酸產(chǎn)量為42.5g/L。本專利技術(shù)與國(guó)內(nèi)其它發(fā)酵生產(chǎn)α-酮戊二酸的方法(需要發(fā)酵6天)相比,具有發(fā)酵周期短的特點(diǎn)。文檔編號(hào)C12R1/15GK103194496SQ201310120209公開(kāi)日2013年7月10日 申請(qǐng)日期2013年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月9日專利技術(shù)者陳寧, 吳瑞方, 馮甲, 徐慶陽(yáng), 謝希賢, 劉淑云 申請(qǐng)人:天津科技大學(xué)本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
    一種發(fā)酵法生產(chǎn)α?酮戊二酸的殘?zhí)强刂品椒ǎ涮卣髟谟冢阂怨劝彼岚魻顥U菌(Corynebacterium?glutamicum)GKG?047為生產(chǎn)菌株,發(fā)酵生產(chǎn)α?酮戊二酸,發(fā)酵時(shí)間35~40h,初始發(fā)酵發(fā)酵時(shí),發(fā)酵液中底糖濃度為7%~9%,發(fā)酵過(guò)程中,控制發(fā)酵液中殘?zhí)菨舛染S持在3%~2%,發(fā)酵后期,即發(fā)酵30至發(fā)酵結(jié)束,發(fā)酵液中殘?zhí)菓?yīng)該嚴(yán)格高于1%。

    【技術(shù)特征摘要】

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:陳寧吳瑞方馮甲徐慶陽(yáng)謝希賢劉淑云
    申請(qǐng)(專利權(quán))人:天津科技大學(xué)
    類(lèi)型:發(fā)明
    國(guó)別省市:

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