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    從對葉大戟中制備山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法技術(shù)

    技術(shù)編號:8732783 閱讀:276 留言:0更新日期:2013-05-26 10:55
    從對葉大戟中制備山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法采用常用的提取方法和柱層析分離技術(shù)對對葉大戟的化學(xué)成份進(jìn)行了研究,得到了一種化合物,并經(jīng)1HNMR、13CNMR、ESI-MS等波譜技術(shù)確定該化學(xué)成分為山奈酚-3-O-β-D-葡萄糖醛酸苷。本發(fā)明專利技術(shù)原料利用率高,制備過程安全,成本低,周期短,操作簡單,設(shè)備要求低,制的產(chǎn)品純度高等優(yōu)點(diǎn)。

    【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)涉及天然產(chǎn)物分離領(lǐng)域,具體涉及采用常用的提取方法和柱層析分離技術(shù)從對葉大戟中山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的提取與分離,利用IH NMRU3C NMR,ES1-MS等波譜技術(shù)確定了所分離化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。
    技術(shù)介紹
    對葉大戟(Euphorbia sororia A.)為大戟科大戟屬植物,以全草入藥和果實(shí)入藥,是一年生草本,維吾爾名為“蘇孜阿甫”。主要分布于中亞和我國新疆和田等地區(qū)。功能主治為利水消腫、降壓清腦、瀉下雜蟲,用于大便秘結(jié)、尿頻、高血壓頭痛、肝硬化、水腫以及疥瘡腫痛。據(jù)文獻(xiàn)報道,對葉大戟中含有萜類、黃酮類、生物堿類、脂肪油、留醇類、酯類等多種生物活性的成分。本專利技術(shù)中,我們采用常用的提取方法和柱層析分離技術(shù)對“對葉大戟”化學(xué)成分進(jìn)行了提取與分離,利用1H nmr、13c nmr,ES1-MS等波譜技術(shù)確定了所分離化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。該成分為山奈酚-3-0- β -D-葡萄糖醛酸苷。對葉大戟中黃酮類化合物的生理活性作用主要體現(xiàn)在具有生物抗氧化性、抗衰老、治療心腦血管疾病、降血脂、降血壓、降低血糖作用、抗腫瘤作用等。新疆具有豐富的藥用植物資源,為了有效、合理地利用藥用植物資源,對天然藥物有效成分的提取分離及分析研究十分必要。
    技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
    本專利技術(shù)的目的是提供一種從對葉大戟中山奈酚-3-0-β -D-葡萄糖醛酸苷的提取與分離方法。本專利技術(shù)的目的是通過下述方案實(shí)現(xiàn):一種從對葉大戟中山奈酚-3-0-β -D-葡萄糖醛酸苷的提取與分離方法,其特征在于包含以下步驟: 1、提取與分離 Mj將10 kg對葉大戟地上部分粉碎后經(jīng)95 %乙醇超聲波提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,回收乙醇得95 %乙醇浸膏物。其殘渣用70 %乙醇超聲波再次提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,提取溶液濃縮回收得水提浸膏物,將95 %乙醇浸膏物與水提浸膏合并,力口水混懸后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取,對萃取物進(jìn)行減壓濃縮,得到四個部分的浸膏物。 [21用大孔樹脂分離:將正丁醇萃取部分加入至大孔樹脂中吸附,先用少量水洗,然后依次用20 %、50 %、80 %乙醇進(jìn)行洗脫,分別收集下柱洗脫液,濃縮,薄層色譜檢測,合并相同部分,在流動相為50 %的流分中得到了粗提取物。[31用硅膠吸附樹脂分離:將上述粗提取物以適量硅膠拌樣,上硅膠柱,進(jìn)行硅膠色譜層析分離,分別用氯仿一甲醇(20:1,10:1, 6:1, 2:1,)為流動相進(jìn)行梯度洗脫,薄層色譜檢測,合并相同部分,在流動相氯仿一甲醇為2:1的流分中得到了粗提取物。I4I用葡萄糖凝膠(S^hadex HL-20)純化:將上述粗提取物上凝膠柱,進(jìn)行凝膠色譜層析分離,用氯仿一甲醇2:1為流動體系進(jìn)行梯度洗脫,薄層色譜檢測,合并相同部分,流分中得到了純度很高的黃酮類成分,即山奈酚-3-0-β -D-葡萄糖醛酸苷。附圖說明圖1為山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的1H- NMR譜圖。圖2為山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的13C-NMR譜圖。圖3為山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的MS譜圖。具體實(shí)施例方式實(shí)施方式I 將10 kg對葉大戟地上部分粉碎后經(jīng)95 %乙醇超聲波提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,回收乙醇得95 %乙醇浸膏物。其殘渣用70 %乙醇超聲波再次提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,提取溶液濃縮回收得水提浸膏物,將95 %乙醇浸膏物與水提浸膏合并,加水混懸后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取。采用大孔吸附樹脂柱層析、硅膠柱層析、葡萄糖凝膠柱層析等分離方法對正丁醇萃取部分進(jìn)行分離,得到山奈酚-3-0- β -D-葡萄糖醛酸苷,測定其含量為98.5%。實(shí)施方式2: 將10 kg對葉大戟地上部分粉碎后經(jīng)95 %乙醇超聲波提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,回收乙醇得95 %乙醇浸膏物。其殘渣用70 %乙醇超聲波再次提取三次(每次2h),過濾,合并濾液,提取溶液濃縮回收得水提浸膏物。提取物用乙酸乙酯萃取,將其水層用5 %NaHCO3處理后用正丁醇萃取,將其水層過濾后加HCl至pH 6 7,抽濾,,,,,得到的黃色固體重新溶解于10倍量熱水中,采用大孔吸附樹脂柱層析進(jìn)一步純化,依次用水、30%乙醇和50%乙醇洗脫。50%乙醇洗脫下來的部分為濃縮后得到純度為97%以上的產(chǎn)物一山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷,測定其含量為96%。實(shí)施方式3: 將粉碎的I kg對葉大戟地上部分投入8倍量沸水中,煮沸30分鐘后,經(jīng)棉花過濾得到濾液。用6倍量水同法提取2次,過濾。濾液用乙酸乙酯萃取三次后,向水層中加濃鹽酸調(diào)pH 2。冷卻后抽濾,用水洗2次。該粗產(chǎn)物懸浮于8倍量水中,用10 % NaHCO3溶液pH6 7,加入樣品量2%活性炭,45 °C保溫30分鐘。過濾,濾液再用濃鹽酸調(diào)pH 2。冷卻后過濾,少量95%乙醇洗滌, 抽干,干燥得到純度為60%以上的產(chǎn)物。產(chǎn)物重新溶解于10倍量熱水中,采用大孔吸附樹脂柱層析進(jìn)一步純化,依次用水、30%乙醇和50%乙醇洗脫。50%洗脫下來的部分為濃縮后得到純度為98 %以上的產(chǎn)物一山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷。2、結(jié)構(gòu)鑒定 綜合分析上述化合物的1H nmr、13c nmr, ES1-MS等波譜數(shù)據(jù),鑒定該化合物為山奈酚-3-0- β -D-葡萄糖醛酸苷。上述技術(shù)方案可以看出,由于本專利技術(shù)實(shí)施例采用常用的提取方法和柱層析分離技術(shù)對“對葉大戟”的化學(xué)成分進(jìn)行了提取與分離,利用1H nmr、13c nmr, ES1-MS等波譜技術(shù)確定了所分離化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)。因此得到單體化合物:山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷。所描述的實(shí)施例僅僅是本專利技術(shù)一部分實(shí)施例,而不是全部的實(shí)施例。基于本專利技術(shù)中的實(shí)施例,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員在沒有作出創(chuàng)造性勞動前提下所獲得的所有其它實(shí)施例,都屬于本專利技術(shù)保護(hù)的范圍。山奈酚-3-0-β -D葡萄糖醛酸苷的化學(xué)結(jié)構(gòu)式為:本文檔來自技高網(wǎng)...

    【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
    一種從對葉大戟中制備山奈酚?3?O?β?D?葡萄糖醛酸苷的方法,其提取步驟如下:a.將10?kg對葉大戟地上部分粉碎后經(jīng)95?%?乙醇超聲波提取三次,過濾,合并濾液,回收乙醇得95?%?乙醇浸膏物,其殘渣用70?%?乙醇超聲波再次提取三次,過濾,合并濾液,提取溶液濃縮回收得水提浸膏物,將95?%?乙醇浸膏物與水提浸膏合并;b.加水混懸后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取;c.將正丁醇萃取物經(jīng)填充吸附材料的吸附柱,用乙醇洗脫,分別收集下柱夜并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋干;d.洗脫前,用體積分?jǐn)?shù)為95?%?乙醇將層析柱浸泡24小時,然后用蒸餾水淋洗吸附柱至流出液為無乙醇味;e.將上述濃縮物上葡萄糖凝膠吸附,用甲醇洗脫,濃縮;f.將上述濃縮物經(jīng)重結(jié)晶得黃酮單體。

    【技術(shù)特征摘要】
    1.一種從對葉大戟中制備山奈酚-3-0-β-D-葡萄糖醛酸苷的方法,其提取步驟如下: a.將10kg對葉大戟地上部分粉碎后經(jīng)95 %乙醇超聲波提取三次,過濾,合并濾液,回收乙醇得95 %乙醇浸膏物,其殘渣用70 %乙醇超聲波再次提取三次,過濾,合并濾液,提取溶液濃縮回收得水提浸膏物,將95 %乙醇浸膏物與水提浸膏合并; b.加水混懸后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取; c.將正丁醇萃取物經(jīng)填充吸附材料的吸附柱,用乙醇洗脫,分別收集下柱夜并用旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋干; d.洗脫前,用體積分?jǐn)?shù)為95%乙醇將層析柱浸泡24小時,然后用蒸餾水淋洗吸附柱至流出液為無乙醇味; e.將上述濃縮物上葡萄糖凝膠吸附,用甲醇洗脫,濃縮; f.將上述濃縮物經(jīng)重結(jié)晶得黃酮單體。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種從...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:阿布拉江·克依木阿瓦罕·蘇來曼外塔尼古麗·卡米力
    申請(專利權(quán))人:新疆大學(xué)
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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