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    細菌菌株以及包含所述細菌菌株的生物殺線蟲劑和植物生長刺激物制造技術

    技術編號:8686601 閱讀:288 留言:0更新日期:2013-05-09 05:54
    本發明專利技術涉及用于植物病原線蟲生物防治的新型殺線蟲產品,包含蘇云金芽孢桿菌(Bacillus?thuringiensis)菌株N11、莫海威芽孢桿菌(Bacillus?mojavensis)菌株SR11和巴西固氮螺菌(Azospirillum?brasilense)菌株ALo1三種新分離物,其分別以保藏號CECT-7665、CECT-7666和CECT-5856保藏在西班牙典型培養物保藏中心(CECT),其具有抗此類型病原體的高拮抗能力,以及具有通過不同機理刺激植物生長的性質。本發明專利技術還涉及所述產品的液體和固體制劑,其在室溫下具有良好的穩定性,且可有效對植物致病線蟲進行生物防治和刺激植物的生長。

    【技術實現步驟摘要】
    【國外來華專利技術】
    本專利技術的目的是在苗床、溫床、溫室和廣義種植業中具有強殺線蟲活性并進一步具有生根和植物生長刺激和生物施肥能力的液體或固體生物學制備物。所述制備物的微生物組分的新分離物,蘇云金芽孢桿菌(Bacillus thuringiensis)菌株Nn、枯草芽孢桿菌(Bacillus subtilis)菌株 SR11 和巴西固氮螺菌(Azospirillum brasilense)菌株 ALo1,以及生產制劑的方法也是本專利技術的目的。
    技術介紹
    多年以前,人們已認識到開發和擴展用于綜合生產和生態農業的方法在作為農業中濫用化學產品的替代物以降低后者有害作用方面的需要和重要性。使用微生物生物制備物進行病蟲害的生物防治和經濟作物的施肥使其成為此背景下最具發展前景的替代方法之一。此外,由于可由可再生資源產生,這些生物制備物對可持續農業模式具有重要作用(Altieri, 1997)。植物的寄生線蟲破壞大多數植物的根或氣生部份,若不對這些生物體進行一些防治,幾乎不可能保持經濟上可行的農業。許多寄生線蟲在根部完成它們的生命周期,并以根部為食(通常與植物相關)。一些是內寄生蟲,即它們生活在根、塊莖、嫩枝、種子等的內部并以其為食。其它是外寄生蟲,它們從植物壁取食。少數物種對宿主高度專一,例如大豆中的大豆胞囊線蟲(Heterodera glycinis)和馬鈴薯中的馬鈴薯金線蟲(Globoderarostochiensis),但大多數物種具有很廣的宿主(Guerena, 2006)。從根外取食的內寄生蟲是重要的經濟害蟲,包括瘤形成線蟲(根結線蟲屬(Meloidogyne))、包囊形成線蟲(胞囊線蟲屬(Heterodera))和枯斑形成線蟲(短體線蟲屬(Pratylenchus))。然而,從根外取食的大多數經濟重要的外寄生蟲尤其包括擬毛刺線蟲屬(Paratrichodorus)、毛刺線蟲屬(Trichodorus)、劍線蟲屬(Xiphinema)、長針線蟲屬(Longidorus)、擬長針線蟲屬(Paralongidorus)、小環線蟲屬(Criconemella)、矮化線蟲屬(Tylenchorhynchus)、默林線蟲屬(Merlinius)、短體線蟲屬(Pratylenchus)、螺旋線蟲屬(Helicotylenchus)、盤旋線蟲屬(Rotylenchus)和盾線蟲屬(Scutellonema)的物種(Guerena, 2006)。植物致病線蟲的防治通常以預防為主。為此,解決此問題的最好方法是將彼此互補的不同策略組合。基于間接使用農用化學品、物理和栽培方法、利用生物防治以及保持多種作物和栽培種的生物多樣性,Bridge (1996)提出了四種處理植物致病線蟲的策略,這增加了對線蟲的抗性和耐性。此作者表明,盡管全部研究與此主旨相關,但是對于可持續農業系統中線蟲的防治,實際中仍有許多問題尚待解決。植物致病線蟲與極其不同的微生物共存在根圍中,由于起到一些生物防治作用,它們中的許多是后者的拮抗物(Sikora 1992)。線蟲的生物防治涵蓋了生活在土壤中的極其不同的生物,包括病毒、立克次氏體、細菌、食線蟲真菌、原生動物和緩步類,以及捕食者例如渦蟲、線蟲、線蚓科、螨蟲、跳蟲和其它昆蟲(Kerry,1995)。除上述之外,真菌和細菌顯示出最強的作為生物防治劑的潛力(BCA) (Spiegel等,2005)。根據Mahdy,M.,2002,真菌包括例如節叢抱屬(Arthrobotrys)、擬青霉屬(Paecilomyces)和輪枝抱屬(Verticillium)(或輪枝菌(Lecanicillium))(尤其是 JP11246323 ;DE202005020816 ;CN1663394);細菌特別包括例如 Pasteuria penetran (EP0217378 ;EP1967068)、芽抱桿菌屬(Bacillus)的一些菌株(EP1922931 ;EP1967068 ;US6004774 ;US5651965 ;US5378460 ;US5350577 ;Sela 等,I8 ;Giannakou 等,2004 ;Guo 等,2OO8)和微變冢村氏菌(Tsukamurellapaurometabolum),且它們可用作有效的生物殺蟲劑(EP2154121 ;Mena,2002)。大量的細菌已被用作不同作物中的生物防治劑,且其對線蟲的防治具有很強潛力。長久以來,基于蘇云金芽孢桿菌(Bt)的殺蟲劑的使用局限于防治由小范圍鱗翅目昆蟲產生的害蟲。然而,近些年,有證據表明這些殺蟲劑對更大范圍的害蟲十分有效。例如,蘇云金芽孢桿菌以色列亞種(B.thuringiensis subsp.1sraelensis)、蘇云金芽孢桿菌莫氏亞種(B.thuringiensis subsp.morrisoni)等,目前它們已分別被用于防治雙翅目昆蟲和鞘翅目昆蟲。最近有報道稱,盡管特異且已知其變種,但是Cry蛋白對更廣譜的昆蟲有毒。目前已知不同的Bt菌株能夠產生大于550種不同毒素,其中一些具有殺線蟲活性(Crickmore 等,2009)。廣泛用于線蟲生物防治的策略是使用定殖根圍的生物體,特別是細菌。這些微生物可以在根圍中生長,因此它們形成保護根免受病原體侵擾的屏障,因此它們作為生物防治生物體通常很有效(Weller, 1988)。根圍菌具有定殖植物根的能力(Schroth和Hancock, 1982),因此它們對植物生長也具有有益作用。Sikora (1992) 指出,甜菜、馬鈴薯和番茄根圍細菌分離物中的7%至10%對形成包囊和瘤的線蟲具有拮抗活性。Sikora和Hoffmann-Hergarten (1993)指出,植物促長根圍菌(PGPR, plant growth-promoting rhizobacteria)對建立在寄生線蟲和它們宿主植物之間的這種密切關系具有重要作用,其在寄生蟲穿透入根的早期調節線蟲的行為,這對作物產量及其重要。在1988年,Sikora發現枯草芽孢桿菌分離物能有效防治棉花和甜菜中的南方根結線蟲(Meloidogyne incognita)、花生中的花生根結線蟲(M.arenaria)和棉花中的腎形腎狀線蟲(Rotylenchulus reniformis)。在1994年,Smith報道芽孢桿菌菌株23a降低番爺中爪睡根結線蟲(M.javanica)的密度。突光假單胞菌(Pseudomonas fluorescens)菌株Pfl降低番爺根中南方根結線蟲瘤和卵的數量(Santhi和Sivakumar, 1995)。臘狀芽孢桿菌(Bacillus cereus)菌株S18也降低馬鈴薯中南方根結線蟲的密度(Keuken, 1996)。此外,Giannakou等,2004和Terefe等,2009表明基于堅硬芽抱桿菌(Bacillus firmus)的產品Bionem在實驗室、盆和田間條件下對根結線蟲(Meloidogyne spp.)防治具有高活性。在引起植物疾病的生物體中,另一類重要的群體是植物致病真菌,其特別包括葡萄孢屬(Botrytis)、腐霉屬(Pythium)、絲核菌(Rhizoctonia)、交鏈孢屬(Altern本文檔來自技高網...

    【技術保護點】

    【技術特征摘要】
    【國外來華專利技術】2010.03.31 ES P2010004251.云金芽孢桿菌(Bacillusthuringiensis)的菌株N11的純培養物,其特征在于具有高殺線蟲活性以及膠原酶活性,不產生β -外毒素且具有溶解磷酸鹽的能力,保藏于西班牙典型培養物保藏中心(CECT),保藏號為CECT-7665。2.海威芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)的菌株SR11的純培養物,其特征在于其溶解土壤磷酸鹽和刺激植物生長的能力,能夠產生吲哚-3-乙酸且能夠在1-氨基環丙烷-1-羧酸(ACC)作為單一氮源下生長,所述菌株保藏在CECT,保藏號為CECT-7666。3.西固氮螺菌(Azospirillumbrasilense)的菌株ALo1的純培養物,其特征在于以70%-90%的轉化百分比轉化添加于培養基中的色氨酸產生吲哚-3-乙酸,產生鐵載體和其它植物生長調節物質,以及大氣固氮,具有在1-氨基環丙烷-1-羧酸(ACC)作為單一氮源下生長的能力,所述菌株保藏在西班牙典型培養物保藏中心(CECT),保藏號為CECT-5856。4.物殺線蟲劑和植物生長刺激物的生物學制備物,其特征在于包含蘇云金芽孢桿菌菌株N11 (CECT-7665)、莫海威芽孢桿菌菌株SR1 i (CECT-7666)和巴西固氮螺菌菌株ALo1 (CECT-5 856)。5.權利要求4的生物殺線蟲劑和植物生長刺激物的生物學制備物,其特征在于所述微生物細胞通過一或多種浸沒發酵方法獲得,其中達到大于109CFU/mL的細胞濃度。6.權利要求4或5的生物殺線蟲劑和植物生長刺激物的生物學制備物,其特征...

    【專利技術屬性】
    技術研發人員:A·I·費爾南德斯馬丁內斯M·J·維拉維爾德費爾南德斯J·A·卡薩諾瓦羅加J·A·尼古拉斯馬丁內斯J·馬洛洛佩茲羅曼C·巴萊斯塔赫曼
    申請(專利權)人:普羅貝爾特公司
    類型:
    國別省市:

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