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    環(huán)氧化合物與陽離子聚合物及它們的制備方法技術(shù)

    技術(shù)編號:8676892 閱讀:249 留言:0更新日期:2013-05-08 19:42
    本發(fā)明專利技術(shù)公開的環(huán)氧化合物與由其開環(huán)聚合得到的陽離子聚合物的結(jié)構(gòu)式或結(jié)構(gòu)通式如下:或本發(fā)明專利技術(shù)還公開了它們的制備方法。本發(fā)明專利技術(shù)提供的陽離子聚合物能夠在生理條件下與帶負電的DNA靜電結(jié)合形成適合于基因轉(zhuǎn)染的納米尺寸和電位的復(fù)合物顆粒,不僅可促進復(fù)合物通過內(nèi)吞進入細胞,且細胞毒性低,在有、無血清條件下其轉(zhuǎn)染效率均較高,使其具有臨床應(yīng)用的潛能,同時還表現(xiàn)出了一定的細胞選擇性,可為臨床的靶向治療提供可能性。其制備方法簡單、成熟,易于掌握控制。

    【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

    本專利技術(shù)屬于環(huán)氧化合物和陽離子聚合物及其制備
    ,具體涉及一種。
    技術(shù)介紹
    隨著生物化學(xué)與分子生物學(xué)的不斷發(fā)展,人們對核酸(DNA,RNA)功能認(rèn)識不斷加深,對引起各種疾病的分子機理也有了進一步的認(rèn)識。在已知的人類疾病中有數(shù)千種疾病是與基因相關(guān)的,其主要原因是基因缺陷和基因缺失。現(xiàn)人們經(jīng)過探索,通過將適當(dāng)?shù)耐庠椿蛞肴梭w細胞內(nèi)來彌補基因的缺陷或缺失,表達出相應(yīng)的蛋白質(zhì),以從根本上消除產(chǎn)生疾病癥狀的內(nèi)在因素,由此而產(chǎn)生了一種新的治療方法,稱之為基因治療。基因治療為多種常見的疑難疾病帶來了希望,如癌癥,糖尿病,囊性纖維化病,艾滋病和心血管疾病等。基因治療成功的關(guān)鍵是要能把用于治療的基因高效的導(dǎo)入細胞內(nèi),而將治療基因高效的導(dǎo)入細胞則需要安全有效的基因載體,因為沒有載體的裸基因進入血清或細胞內(nèi)會被血清的網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)所吞噬或被細胞的內(nèi)涵體中的核酸酶降解。因此,開發(fā)安全有效的基因載體是基因治療成功的如提條件。現(xiàn)已開發(fā)的基因載體包括病毒載體和非病毒載體,盡管病毒載體具有相對較高的轉(zhuǎn)染效率,但是存在免疫原性、致癌性、宿主基因插入整合等弊端,從而限制了臨床應(yīng)用。非病毒載體雖無免疫原性,便于大規(guī)模生產(chǎn),但轉(zhuǎn)染效率低于病毒載體,并且大多非病毒載體也具有較高的細胞毒性。因此,開發(fā)細胞毒性低,轉(zhuǎn)染效率高的非病毒基因載體是促進基因治療發(fā)展的基礎(chǔ)。`現(xiàn)在研究的非病毒載體主要包括陽離子脂質(zhì)體和陽離子聚合物,陽離子聚合物載體具有優(yōu)異的DNA結(jié)合及保護能力,便于進行靶向性及生物適用性改性,成為基因載體研究中的一個重要研究對象。文獻中報道了很多合成陽離子聚合物基因載體如聚賴氨酸、聚乙烯亞胺、聚酰胺基胺、聚氨基酯、聚脒、殼聚糖、帶有陽離子側(cè)基的聚烯烴等類型。其中聚乙烯亞胺(PEI)是廣泛研究的一類陽離子聚合物基因載體,其分子量為25kDa的樹枝狀聚乙烯亞胺(bPEI 25KDa)雖轉(zhuǎn)染效率較高,已經(jīng)作為評估陽離子聚合物基因載體轉(zhuǎn)染效率高低的參照標(biāo)準(zhǔn),但是因該基因載體的細胞毒性較大,且在有血清條件下的轉(zhuǎn)染效率還會降低到無血清條件下的1/2,從而限制了其在臨床上的應(yīng)用。
    技術(shù)實現(xiàn)思路
    本專利技術(shù)的首要目的是,提供一種可用于制備陽離子聚合物的環(huán)氧化合物。本專利技術(shù)次要目的是提供一種制備上述環(huán)氧化合物的方法。本專利技術(shù)的第三目的是針對現(xiàn)有技術(shù)存在的問題,提供一種陽離子聚合物,該陽離子聚合物作為基因載體,其細胞毒性低、在無血清和有血清條件下轉(zhuǎn)染效率均較高。本專利技術(shù)的第四目的是提供一種上述陽離子聚合物的制備方法。本專利技術(shù)提供的環(huán)氧化合物,其特征在于該化合物的結(jié)構(gòu)式如下:本文檔來自技高網(wǎng)
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    【技術(shù)保護點】
    一種環(huán)氧化合物,其特征在于該化合物的結(jié)構(gòu)式如下:。FDA0000267757691.jpg

    【技術(shù)特征摘要】
    1.一種環(huán)氧化合物,其特征在于該化合物的結(jié)構(gòu)式如下:2.一種權(quán)利要求1所述環(huán)氧化合物的制備方法,其特征在于該方法的工藝步驟和條件如下: (1)將N,N’- 二羥乙基乙二胺和有機堿加入溶劑中,并于冰水浴內(nèi)攪拌至其完全溶解,然后將完全溶解在溶劑中的二碳酸二叔丁酯以2 4s/滴的速度滴加,滴加完畢后,室溫反應(yīng)8 24h,減壓蒸餾,再依次用乙酸乙酯重結(jié)晶、柱分離即得中間化合物N,N’ -2Boc-N, N’ -2羥乙基乙二胺,其中N,N’ - 二羥乙基乙二胺、二碳酸二叔丁酯和有機堿的摩爾比為1:2.Γ2.5:2.Γ2.5 ; (2)在室溫下,將N,N’-2Boc-N,N’ - 二羥乙基乙二胺、環(huán)氧氯丙烷、氫氧化鈉、相轉(zhuǎn)移催化劑、溶劑和水一起進行攪拌混合,待固體物質(zhì)基本溶解后加熱至35 45°C反應(yīng)4lh,抽濾,濾液減壓蒸餾,并通過柱層析分離即可,其中N,N’ -2Boc-N,N’ - 二羥乙基乙二胺、環(huán)氧氯丙烷、氫氧化鈉、相轉(zhuǎn)移催化劑和水的摩爾比為1: 3^10: 3^10: 0.05^0.1: 0.廣0.2,溶劑的量則以在35 45°C能夠基本溶解反應(yīng)物N,N’ -2Boc-N, N’ - 二羥乙基乙二胺為限。3.按權(quán)利要求2所述環(huán)氧化合物的制備方法,其特征在于該方法中所用的有機堿為三乙胺或N,N’ - 二異丙基乙胺;相轉(zhuǎn)移催化劑為四丁基溴化銨、四丁基氯化銨或四丁基碘化銨中的任一種;溶劑為二氯甲烷或三氯甲烷。4.按權(quán)利要求2或3所述環(huán)氧化合物...

    【專利技術(shù)屬性】
    技術(shù)研發(fā)人員:余孝其張琴芳張驥
    申請(專利權(quán))人:四川大學(xué)
    類型:發(fā)明
    國別省市:

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