一種飼料添加劑，預混料及配合料制造技術

本發明專利技術公開了一種飼料添加劑，該飼料添加劑是由地衣芽孢桿菌（Bacillus?Licheniformis）CGMCC?No.7030凍干粉、丁酸鈉及載體按重量比0.25~1.25：0.5~1：1.75~2混合配制而成的組合物。本發明專利技術的突出優點為：地衣芽孢桿菌CGMCC?No.7030能夠通過發酵產生高活性的纖維素酶與蛋白酶，添加進動物飼料中可以增加飼料中蛋白質、纖維素和半纖維素等成分的分解，提高飼料營養成分利用率。地衣芽孢桿菌CGMCC?No.7030與丁酸鈉共同作用，可調節動物腸道結構與菌群，并為動物腸粘膜細胞提供能量。在基礎日糧中添加本發明專利技術的飼料添加劑，可減少抗生素用量，無毒副作用、無藥物殘留，促進飼料轉化率降低疾病發生率，有益于動物與人類健康。

【技術實現步驟摘要】
一種飼料添加劑，預混料及配合料
本專利技術屬于動物飼料領域，具體涉及一種地衣芽孢桿菌與丁酸鈉的組合物作為飼 料添加劑的應用。
技術介紹
丁酸作為哺乳動物大腸中的厭氧微生物發酵產生的一種短鏈脂肪酸(SCFA)，能為 結腸提供能量，增加小腸絨毛高度，同時丁酸也是腸粘膜細胞的主要能量來源。傳統的飼料 添加劑使用丁酸，具有游離性和揮發性的特點，飼料生產中將其制成相對穩定的鈉鹽-丁 酸鈉。丁酸鈉無腐蝕性，無臭味，無有害殘留性，能夠到達更遠的腸道，是熱門的抗生素替代 品之一。地衣芽孢桿菌在有氧及無氧環境中均能迅速生長繁殖，同時消耗腸道內的游離 氧，造成腸道內低氧環境，抑制腸道需氧致病菌的生長，并促進腸道有益菌群如雙歧桿菌、 擬桿菌、乳酸菌等的生長。針對當前養殖過程中面臨的對動物長期、大量使用抗生素，造成的動物免疫力下 降、藥物殘留，從而嚴重威脅動物機體及人類健康等問題，開創無毒副作用、無殘留、益生功 能顯著的飼料添加劑成為了必然趨勢。目前，還未見地衣芽孢桿菌與丁酸鈉的飼料添加劑 出現的相關報道，因此，本專利技術的添加劑組合物，具有重要意義。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種含有地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030與丁酸鈉的飼料添 加劑，使益生菌與丁酸鈉共同發揮作用，可有效改善動物健康狀況，提高飼料轉化率。本專利技術提供的飼料添加劑是由地衣芽孢桿菌(Bacillus Licheniformis) CGMCC No. 7030凍干粉、丁酸鈉及載體按重量比為O. 25 1. 25 :0. 5 1:1. 75 2混合配制而成的組合 物。其中，所述地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030每克凍干粉的活菌數為100億飛00億。其中，所述載體為玉米芯粉和/或稻殼粉。本專利技術的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)為申請人從鴨腸道中分離得 到。其營養細胞桿狀，其芽孢為橢圓或長筒形，產生中生的橢圓形芽孢，孢囊膨大。革蘭氏 染色為陽性。在牛肉膏蛋白胨培養基上形成白色，不透明，不規則菌落，邊緣毛發狀，無褶 皺。接觸酶陽性，能利用丙酸鹽。能產生多種活性酶，如蛋白酶、纖維素酶等，提高飼料利 用率，增強動物消化酶的活性，促進養殖動物的生長。本專利技術的地衣芽孢桿菌(Bacillus licheniformis)申請人已于2012年12月25日保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普 通微生物中心，簡稱CGMCCJia :北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研 究所，保藏編號為CGMCC No. 7030。本專利技術的飼料添加劑可添加到常規的畜禽預混料中，如礦物質維生素預混料，因 此，本專利技術還提供含有所述飼料添加劑的預混料。優選的，所述預混料中飼料添加劑的添加量為4 10%。本專利技術的飼料添加劑可添加到常規的畜禽基礎日糧中，因此，本專利技術還提供含有所述飼料添加劑的配合料。優選的，所述配合料中飼料添加劑的添加量為O. 5 1%。。本專利技術的突出優點為本專利技術的地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030，能夠通過發酵產生高活性的纖維素酶與蛋白酶，添加進動物飼料中可以增加飼料中蛋白質、纖維素和半纖維素等成分的分解，提高飼料營養成分利用率。地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030與丁酸鈉共同作用，可調節動物腸道結構與菌群，并為動物腸粘膜細胞提供能量。在基礎日糧中添加本專利技術的飼料添加劑，可減少抗生素用量， 無毒副作用、無藥物殘留，促進飼料轉化率降低疾病發生率，有益于動物與人類健康。具體實施方式以下實施例用于說明本專利技術，但不用來限制本專利技術的范圍。實施例1地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030發酵液酶活的測定將供試菌接種于牛肉膏蛋白胨固體培養基上，30°C培養24h后挑取菌種，懸于O.85%生理鹽水中，血球計數板計數調節濃度約5. O X IO7個/mL在裝有20mL產酶培養基的 IOOmL三角瓶內接入菌懸液2mL，自然補給氧30°C，170r/min條件下發酵培養24h，液體發酵液在5000r/min條件下離心分離15min,取上清液,即為粗酶液。纖維素酶產酶培養基配方為蛋白胨O. 9%，酵母膏1. 0%，CMC-NaO. 5%, pH8. O.蛋白酶產酶培養基配方為蛋白胨1. 0%,酵母膏O. 5%,葡萄糖1. 0%,可溶性淀粉O.5%, KH2P040. 2%, MgSO4 · 7H200. 05%, CaCl2 · 2H200. 02%, ρΗ7· 2。(I)纖維素酶活力測定纖維素酶活力測定按照國標ΝΥ/Τ912-2004繪制標準曲線，采用DNS法測定發酵液中的纖維素酶活性。以ImL含l%(w/v)CMC-Na的pH8. O磷酸緩沖液為底物，加入O. 2mL粗酶液，50°C保溫30min，然后加入2. 5mL DNS試劑，沸水浴5min，冷卻至室溫后定容至5. OmL, 利用分光光度計測定波長540nm處的吸光度；以煮沸滅活粗酶液加入上述底物反應液作為空白對照，以底物溶液作為陰性對照；將ImL酶液每分鐘產生Ig葡萄糖量定義為I個酶活力單位，U/mL。經測定，地衣芽孢桿菌CGMCC7030的發酵粗酶液的纖維素酶活為230. 5U/mL。(2)蛋白酶活力測定蛋白酶活力的測定采用國標SB/T10317-1999蛋白酶活力測定法中的福林法繪制標準曲線。樣品測定取15X IOOmm試管3支，編號1，2，3，每管內加入粗酶液ImL，置于40°C水浴中預熱2min，再各加入經同樣預熱的2%酪蛋白溶液(pH7. 2) ImL,精確保溫 lOmin，時間到后，立即再各加入0.4mol三氯乙酸2m L，以終止反應，繼續置于水浴中保溫 20min,使殘余蛋白質沉淀后離心或過濾，然后另取15X 150mm試管3支，編號1，2，3，每管內加入濾液ImL,再加O. 4mol碳酸鈉5mL,已稀釋的福林試劑ImL搖勻,40°C保溫發色20min 后在540nm下測定OD值。空白試驗也取試管3支，編號(I)，(2)，(3)，測定方法同上，唯在加2%酪蛋白之前先加O. 4mol三氯乙酸2mL，使酶失活，再加入2%酪蛋白。蛋白酶活力單位定義為lmL酶 液在40°C，pH7的條件下，每分鐘水解酪蛋白產生 I μ g酪氨酸的酶量為一個酶活力單位，以(U/ml)表示。福林試劑(Folin試劑)的配制方法于200mL磨口回流裝置內，加入鎢酸鈉 (Na2WO4 ·2Η20) IOOg,鑰酸鈉(Na2MO4 ·2Η20) 25g，蒸餾水 700mL，85%磷酸 50mL，濃鹽酸 lOOmL， 文火回流10h。取去冷凝器，加入硫酸鋰(Li2SO4) 50g，蒸餾水50m L,混勻，加人幾滴液體溴，再煮沸15min，以驅逐殘溴除去顏色，溶液應呈黃色而非綠色。若溶液仍有綠色，需要再加幾滴澳液，再煮沸除去之。冷卻后，定容至IOOOmL,用細菌濾器(2. 2μπι)過濾，置于棕色瓶中保存。此溶液使用時加2倍蒸餾水稀釋。即成已稀釋的福林試劑。經測定，每毫升地衣芽孢桿菌CGMCC7030發酵粗酶液的蛋白酶活力為1500U/mL。產酶試驗表明，本專利技術的地衣芽孢桿菌CGMCC No. 7030,能夠通過發酵產生高活性的纖維素酶與蛋白酶，添加進動物飼料中可以增加飼料中蛋白質、纖維素和半纖維素等成分的本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種飼料添加劑，其特征在于，該飼料添加劑是由地衣芽孢桿菌（Bacillus?Licheniformis）CGMCC?No.7030凍干粉、丁酸鈉及載體按重量比0.25~1.25：0.5~1：1.75~2混合配制而成的組合物。

【技術特征摘要】
1.一種飼料添加劑，其特征在于，該飼料添加劑是由地衣芽孢桿菌(BacillusLicheniformis)CGMCC No. 7030 凍干粉、丁酸鈉及載體按重量比 O. 25 1. 25 :0. 5 1:1. 75 2混合配制而成的組合物。2.根據權利要求1所述的飼料添加劑，其特征在于，地衣芽孢桿菌CGMCCNo. 7030每克...

【專利技術屬性】
技術研發人員：王凡，李曉清，劉婷，陳麗仙，王安如，
申請(專利權)人：北京大北農科技集團股份有限公司，漳州大北農農牧科技有限公司，哈爾濱大北農牧業科技有限公司，
類型：發明
國別省市：