一種開放式植物組織培養方法技術

本發明專利技術公開了一種開放式植物組織培養方法，其在培養基中添加揮發性植物精油抑菌劑，免去高壓消毒程序，在室內開放環境接種；將培養材料置于滿足植物組織培養的溫度、光照條件的環境條件下進行培養。本發明專利技術的揮發性抑菌劑在對培養基本身消毒的同時，也能對瓶內空間進行消毒，使培養物處在較為無菌的環境生長，降低培養物污染概率；本發明專利技術采用的抑菌劑在培養基添加量小(總使用量為2μl-2ml/L培養基)，對培養基滲透壓沒有影響；本發明專利技術成分對人體無毒；添加量少，無不適刺激味。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種農林領域的植物組織培養育苗技術。
技術介紹
植物組織培養是本世紀初開始，以植物生理學為基礎發展起來的一項現代農業技術。經過近一個世紀的發展。利用植物組織培養技術進行無性繁殖的方法已取得了很大的進展。與傳統的植物繁育方法相比，這方法具有快速高效，不受季節限制，有時還結合“脫毒”技術取得防止帶毒退化、增強生活力及較好地保持種性的效果，在當前倡導高效現代化農業發展模式的形勢下，通過植物組織培養技術生產高質量的種苗具有十分廣闊的市場前景。雖然它的理論研究已相當精深，但由于技術環節還存在不少問題，組培成本太高，無法滿足市場對高質量組培苗低價位的需求，因此，如何降低組培成本是決定組培效益的關鍵所在，也是組培技術得以健康發展的首要條件。傳統組培過程中的污染是組培技術的主要難點之一，主要表現為培養基的污染，培養基高壓滅菌具有資金投入大、能耗高，培養基成分遭受破壞等缺點，近年引起興趣的植物開放式組織培養，是在抗菌劑的作用下，培養基不需高壓滅菌，利用塑料杯代替組培瓶，簡化組培環節，降低組培成本。將培養基改造成既可保證植物組織正常生長，又具有抗菌功能的培養基，關鍵是要找到一種或幾種能夠添加到培養基的高效廣譜性抗菌劑。植物組織培養制作培養基，將熱熔的瓊脂營養液分裝進培養瓶，培養基體積一般占培養瓶容積的五分之一左右，留有較大的瓶內空間，從已經公開的資料來看，現有的開放式組織培養中，培養基加入抑菌劑只對固體培養基部分抑菌，對瓶內空間的微生物無能為力，這就可能導致植物材料接種到培養基表面后，瓶內微生物沉降附著在培養物表面并繁殖，培養物遭受污染幾率較高。從已經公開的資料來看，培養基所添加抑菌劑的量較大，可能將提高培養基滲透壓，對培養物生長產生不利的影響。
技術實現思路
本專利技術的主要目的在于提供一種開放式組織培養方法，本專利技術采用揮發性抑菌劑加入培養基，在對培養基本身消毒的同時，由于抑菌劑自身具有揮發能力，能揮發到瓶內空間進行消毒，使培養物處在較為無菌的環境生長，降低培養物污染概率。本專利技術提供的技術方案如下，其在培養基中添加揮發性植物精油抑菌劑，免去高壓消毒程序，在室內開放環境條件下接種；將培養材料置于滿足植物組織培養的溫度、光照條件的環境條件下進行培養。所述的植物精油抑菌劑的使用量為2 μ l-2ml/L培養基。所述的植物精油抑菌劑包括以下成分的至少一種(I)肉桂油。包括桂皮油和桂葉油，分別蒸鍛自肉桂(Cinnamomum cassia)的干燥枝、葉，主要成分桂皮醛，反式茴香腦、可巴烯等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(2)桉葉油(尤加利油)。從藍桉、桉葉樹等桉樹屬(Eucalyptus)植物的葉、枝中提取。主要組成1，8_桉葉素、莰烯、水芹烯、松油醇、乙酸香葉醇等。其在培養基添加量是 2u1-2ml/Lo(3)茶樹油。自白千層屬(Melaleuca)植物的新鮮枝葉提取。主要組成對孟烯-1-醇，1，8_桉葉油素、松油烯、異松油烯等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(4)百里香油。由百里香(Thymus vulgaris 及 Τ· zygis var gracilis)進入花期的地上部分提取。主要成分百里香酚、香芹酚。其在培養基添加量是2yl-2ml/L。(5) 丁香油。提取自丁香(Eugenia caryophyllata)干燥花蕾,主要成分丁香酹。 其在培養基添加量是2 μ l-2ml/L。(6)薰衣草油。由薰衣草(Lavandula officinalis 或 L. angustifolia)的花序提取。主要成分為乙酸芳樟酯、芳樟醇、薰衣草醇、乙酸薰衣草酯、對-1-孟烯-4-醇等。其在培養基添加量是2 μ1-2ml/L。(7)檸檬油。由檸檬屬(Lemon)的新鮮果皮經壓榨而得。主要 成分是苧稀(對孟-1，8-二烯)和檸檬醛。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(8)山蒼子油由山蒼子(Litsea cubeba)果實提取。主要成分是括檸檬醛、甲基庚烯酮、香茅醛、香茅醇、菔烯等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(9)香茅油(香草油)。香茅(Cymbopogon nardus)全草提取。主要成分香茅醒、 香茅醇。其在培養基添加量是2 μ l-2ml/L。(10)牛至油。自牛至(Origanum vulgare)全草提取,主要成分香療酹、歐百里香酚、麝香草酚等。其在培養基添加量是2yl-2ml/L。(11)廣藿香油。自廣藿香(Pogostemon cablin或P. patchouli pelletiver var. snavis或P. heyneanus)葉子、枝桿及根部提取,主要成分為廣藿香烯、廣藿香醇、廣藿香酮。其在培養基添加量是2 μ l-2ml/L。(12)紫蘇油。提取自紫蘇(Perilla frutescens)莖葉,主要成分為朽1檬烯、紫蘇烯，α -亞麻酸等。其在培養基添加量是2 μ l-2ml/L。(13)迷迭香油。提取自迷迭香(Rosmarinus officinalis)莖葉，主要成分為 ct-薇稀、茨稀、β _薇稀、1，8_按葉素、棒腦、龍腦。其在培養基添加量是2 μ l_2ml/L。(14)大蒜油。從大蒜(Allium sativum)鱗莖提取,主要成分丙基二硫化丙烯、 二硫化二丙烯、三硫化二丙烯等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(15)沒藥油。地丁樹或哈地丁樹(Commiphora)的樹脂油，主要成分為桂醛、沒藥酸、肉桂醛、小茴香醛，丁香酚。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(16) 土荊芥油。自土荊芥(Chenopodium ambrosioides)果實和葉提取,主要成分驅蛔素、對聚傘花素、土荊芥酮。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(17) 丁香羅勒油。提取自丁香羅勒(Ocimum gratissimum)的全草,主要成分丁香酚、芳樟醇、松油醇羅勒烯。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(18)薄荷油。提取自薄荷(Mentha arvensis)莖葉。主要成分左旋薄荷醇、左旋薄荷酮、異薄荷酮、胡薄荷酮、乙酸癸酯等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(19)花椒油。從花椒屬(Zanthoxylum)果實提取,主要成分為朽1檬烯、枯醇、香葉醇等。其在培養基添加量是2 μ l_2ml/L。(20)佛手柑油。從佛手柑(Citrus medica var sarcodactylis)果皮提取，中國的佛手柑主要含有橙花醇、檸檬腦、檸檬醛等。其在培養基添加量是2μ l-2ml/L。(21)連翅油。提取自連翅(Forsythia suspens)的果實,主要成分α-菔烯、β-菔烯、松油醇-4-醇、水芹烯。其在培養基添加量是2 μ l-2ml/L。(22)蒼術油。從南蒼術(Atractylodes Iancea)或北蒼術(A. chinensis)等的干燥根莖提取。主要成分蒼術醇、蒼術酮、蒼術烯等。其在培養基添加量是2yl-2ml/L。(23)巖蘭草油(香根油)。提取自巖蘭草(Andropogon muricatus)根,主要成分安息香酸、巖蘭草醇、巖蘭草酮、巖蘭草烯等。其在培養基添加量是2 μ l-2ml/Lo(24)藿香油。提取自藿香本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種開放式植物組織培養方法，其特征在于：在培養基中添加揮發性植物精油抑菌劑，免去高壓消毒程序，在室內開放環境接種；將培養材料置于滿足植物組織培養的溫度、光照條件的環境條件下進行培養。

【技術特征摘要】
1.一種開放式植物組織培養方法，其特征在于在培養基中添加揮發性植物精油抑菌齊U，免去高壓消毒程序，在室內開放環境接種；將培養材料置于滿足植物組織培養的溫度、光照條件的環境條件下進行培養。2.如權利要求1所述的一種開放式植物組織培養方法，其特征在于所述的植物精油抑菌劑的使用量為2 μ l-2ml/L培養基。3.如權利要求1所述的一種開放式植物組織培養方法，其特征在于所述的植物精油抑菌劑包括以下成分的至少一種 (1)肉桂油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (2)桉葉油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (3)茶樹油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (4)百里香油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (5)丁香油，其在培養基添加量是2μ l-2ml/L ； (6)薰衣草油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (7)檸檬油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (8)山蒼子油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ; (9)香茅油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (10)牛至油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (11)廣藿香油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (12)紫蘇油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (13)迷迭香油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (14)大蒜油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (15)沒藥油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (16)土荊芥油，其在培養基添加量是2μ l-2ml/L ； (17)丁香羅勒油，其在培養基添加量是2μ l-2ml/L ； (18)薄荷油，其在培養基添加量是2μl-2ml/L ； (19)花椒油，其在培養基添加量...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉福平，
申請(專利權)人：福建省亞熱帶植物研究所，
類型：發明
國別省市：