本發明專利技術提供了一種高含油量小環藻突變株Cyclotella?menghiniana，其特征在于，它保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期為2012年9月5日，保藏編號為CGMCC?No.6448。本發明專利技術還提供了一種高含油量小環藻突變株的篩選及培養方法。本發明專利技術篩選、檢測過程中簡單，耗時少，易于發現富含油脂的硅藻突變體，可用于篩選各種海水和淡水微藻的富油藻種以及通過各種誘變技術（紫外誘變、化學誘變、激光誘變等）誘變獲得的富油微藻突變體。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及微藻生物能源領域，具體地說，涉及一種利用超聲波誘變產生的高含油量微藻，以及利用超聲波誘變篩選該微藻的方法及其培養方法。
技術介紹
由于地球上的化石能源儲量正日益減少，石油資源很有可能會在短時間內便迅速枯竭。化石能源的蘊藏量并不是無窮無盡的，易于開采和利用的化石能源儲量已經所剩無幾，剩余儲量因為開發難度越來越大，從而失去繼續開采的價值。在世界能源消費以石油為主導的情況下，如果能源消費結構仍不變化，那么就會發生新一代的能源危機。煤炭資源雖比石油資源儲存量要大，但也不是取之不盡用之不竭的。目前除了煤炭之外，能夠大規模利用開發的能源還是很少。雖然太陽能的資源是取之不竭源源不斷的，但因其開發利用所耗成本高昂，所以在短時間內仍不可能迅速發展得到廣泛應用。因此人類必須及時找到一種可以代替非再生礦物能源的新能源，從而將注意力轉移到新的能源結構上，盡早探索、研究開發利用新能源資源，這樣才能讓人類的生活在安定和諧的情況下持續發展下去，而生物柴油正好可以將此問題解決。像生物柴油這種可再生的碳中性能源，有利于環境和經濟的可持續發展。目前的研究也表明了微藻是能夠完全替代化石柴油的唯一生物柴油。生物柴油和化石燃料本質上都來源于光合作用產物。綠色植物進行光合作用，將水、二氧化碳和其他無機物依靠光能合成各種有機物并釋放出氧氣，動物和微生物才能生長繁殖。各種生物的油脂都是從植物合成的有機物轉化來的。任何形式的來自動物、植物和微生物的脂肪酸都能用作生物柴油的原料。因此，油脂含量高的藻種才是制備生物柴油的最重要原料。利用微藻加工制備生物柴油的關鍵，一是提高原始藻種的油脂含量，二是通過優化培養盡可能提高微藻細胞的油脂含量。在單細胞微藻的培養過程中，培養基成分、溫度、光照強度、pH、培養方式、通氣量、鹽度等均會影響微藻的生長以及其脂肪酸的含量與組成。溫度、光強能影響微藻的光合作用和呼吸作用，從而對其生長及體內生化成分產生影響。
技術實現思路
本專利技術的主要目的在于提供一種高含油量微藻突變株，同時提供一種高含油量微藻的篩選方法及培養方法，從而提供一種能夠高效獲取生物柴油的方法。為實現上述目的，本專利技術采取以下技術方案—種高含油量小環藻突變株(建議的分類命名為Cyclotella menghiniana),其特征在于，它保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期為2012年9月5日，保藏編號為 CGMCC No. 6448。一種高含油量小環藻突變株的篩選及培養方法，其特征在于，步驟如下a.取對數生長期的小環藻藻液，稀釋至IO4個細胞/mL，在音頻70KHz條件下，處理30(T450s進行誘變；b.將誘變后的藻液涂于Dl固體培養基上，培養15天后挑取成活的藻落，分別接種于新鮮的Dl固體培養基，在24°C、光暗培養時間比14 :10、光照培養時光照強度25001ex的條件下繼續培養15天；C.將各藻落進行編號，并依次取少量藻體分別加入100 μ L的Dl液體培養液中；d.向步驟c得到的各藻液中分別加入O. I mg/mL尼羅紅染料O. I μ L,靜置IOmin后，利用熒光顯微鏡觀察各藻液中的油脂含量；e.取油脂含量高的藻株培養在Dl液體培養基中大量繁殖，在細胞濃度達到5X IO6個/mL時，置換新鮮的Dl液體培養基，培養5天，然后用油脂富集培養基繼續培養60小時，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉氮元素和/或硅元素得到的培 養基。如上所述的方法，優選地，步驟a中所述的誘變時間為350s。如上所述的方法，優選地，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaNO3和Co (NO3)2 · 6H20得到的培養基。如上所述的方法，優選地，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaSiO3 · 9H20得到的培養基。如上所述的方法，優選地，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaNO3' Co (NO3)2 · 6H20 和 NaSiO3 · 9H20 得到的培養基。所述的Dl液體培養基的配方為權利要求1.一種高含油量小環藻突變株，其特征在于，它保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝陽區北辰西路I號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期為2012年9月5日，保藏編號為CGMCC No. 6448。2.一種高含油量小環藻突變株的篩選及培養方法，其特征在于，步驟如下 a.取對數生長期的小環藻藻液，稀釋至IO4個細胞/mL，在音頻70KHz條件下，處理30(T450s進行誘變； b.將誘變后的藻液涂于Dl固體培養基上，培養15天后挑取成活的藻落，分別接種于新鮮的Dl固體培養基，在24°C、光暗培養時間比14 :10、光照培養時光照強度25001ex的條件下繼續培養15天； c.將各藻落進行編號,并依次取少量藻體分別加入100μ L的Dl液體培養液中； d.向步驟c得到的各藻液中分別加入O.I mg/mL尼羅紅染料O. I μ L,靜置IOmin后，利用熒光顯微鏡觀察各藻液中的油脂含量； e.取油脂含量高的藻株培養在Dl液體培養基中大量繁殖，在細胞濃度達到5X IO6個/mL時，置換新鮮的Dl液體培養基，培養5天，然后用油脂富集培養基繼續培養60小時，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉氮元素和/或硅元素得到的培養基。3.如權利要求2所述的方法，其特征在于，步驟a中所述的誘變時間為350s。4.如權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaNO3和Co (NO3)2 · 6H20得到的培養基。5.如權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaSiO3 · 9H20得到的培養基。6.如權利要求2或3所述的方法，其特征在于，所述的油脂富集培養基為Dl液體培養基的配方中去掉NaNO3、Co (NO3)2 · 6H20和NaSiO3 · 9H20得到的培養基。全文摘要本專利技術提供了一種高含油量小環藻突變株Cyclotella menghiniana，其特征在于，它保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期為2012年9月5日，保藏編號為CGMCC No.6448。本專利技術還提供了一種高含油量小環藻突變株的篩選及培養方法。本專利技術篩選、檢測過程中簡單，耗時少，易于發現富含油脂的硅藻突變體，可用于篩選各種海水和淡水微藻的富油藻種以及通過各種誘變技術(紫外誘變、化學誘變、激光誘變等)誘變獲得的富油微藻突變體。文檔編號C12N13/00GK102943048SQ20121050590公開日2013年2月27日 申請日期2012年11月30日 優先權日2012年11月30日專利技術者黃迎春, 趙進東, 趙馳 申請人:北京聯合大學生物化學工程學院本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種高含油量小環藻突變株，其特征在于，它保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心CGMCC，保藏地址在北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所，保藏日期為2012年9月5日，保藏編號為CGMCC?No.6448。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：黃迎春，趙進東，趙馳，
申請(專利權)人：北京聯合大學生物化學工程學院，
類型：發明
國別省市：
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