本發明專利技術涉及一種雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物及制備方法及其用途,屬于藥用真菌領域。白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子，將該種子在無菌條件下接種到有大麥培養基的種子瓶中，進行種子瓶發酵培養、發酵瓶發酵生產培養以及提取。本發明專利技術具有治療腎小球腎炎的代謝物，同時通過白耙齒菌的生長和代謝，改變大麥原有的性能。
【技術實現步驟摘要】
雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物及制備方法及其用途
本專利技術屬于藥用真菌領域，尤其是指一種白耙齒菌菌質提取物及制備方法及其用途。
技術介紹
白祀齒菌ZrjDejr Iacteus Fr.屬擔子菌綱多孔菌目齒菌科祀齒菌屬的一種真菌，別名白囊孔。該菌種保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號是CGMCC No. 1016。其子實體生于闊葉樹的枯立木和枯倒木上。形態特征擔子果(子實體)平伏，擴展，白色，軟革質；有時倒生，呈復瓦狀疊生，扇形，有狹小的基部；蓋面乳白色， 有短絨毛，絹絲樣光澤，有環紋，邊緣薄，下彎，波狀至淺裂。菌肉白色。刺呈耙齒狀，短，不整齊，白色至黃白色，孢子橢圓形，平滑，無色，囊狀體棒形或紡錘形，有時披有結晶，主要分布于長白山林區和黑龍江、河北、山西、甘肅、江西、福建、云南和西藏等省區。白耙齒菌的藥用在歷史上僅限于民間采集野生子實體，其子實體生于闊葉樹的枯立木和枯倒木上。比較難采集到，因此子實體比較稀缺，無法大量收集。慢性腎小球腎炎是由多種原發性腎小球病理損害導致的，以蛋白尿、血尿、水腫、 高血壓為常見的臨床表現的一類疾病。是腎科常見病與多發病。其中絕大多數患者具有不同程度的腎功能損害，且呈進行性加重，漸進性的轉為腎功能衰竭。因而，及時有效地治療慢性腎小球腎炎是科研工作者的重要課題。80年代-90年代，長春中醫學院宋啟印教授首次研究開發應用白耙齒菌液體發酵的方法生產白耙齒菌多糖治療慢性腎小球腎炎，即目前市場上的中成藥“益腎康”膠囊。益腎康膠囊，主要成份是耙齒菌多糖的粗提物。內容物為褐色至深褐色的粉末；味微酸澀。具有清利濕熱之功效。用于慢性腎小球腎炎屬下焦濕熱證者。但患者服用偶見胃脘不適，口干，納差，惡心。目前藥用真菌的生產一般有液體發酵和固體發酵兩種形式。國內外較多應用液體發酵生產是借鑒抗生素的生產工藝，應用發酵罐優點是有較高的機械化與自動化，生產規模大。但因藥用真菌自身一般不產生抗生素，或產生的抗生素抑菌作用較弱，不能對細菌等其他微生物產生很好的拮抗作用，因此在發酵過程中易污染雜菌而倒灌，造成重大損失。其生產設備投資巨大，耗能也較多，生產成本較高。藥用真菌的固體發酵最早見于2000年前中藥“六神曲”和“半夏曲”的生產，是利用自然界的霉菌進行發酵，其作用是產生消食和胃的功能。其工藝一直沿用至今，但“六神曲”和“半夏曲”的發酵不是純種發酵，工藝不好控制。近幾年來隨著生物技術的發展，采用純種接種，建立科學可控的質量監控體系，其發酵過程的穩定性得到了很好地解決。南京中醫藥大學莊毅教授于上世紀80年代研究以藥用真菌“槐耳robiniophila Murr. 為發酵菌種，在以農副產品為營養基質上進行固體發酵，其藥用菌質稱”槐耳菌質”。開發出具有抗腫瘤功效的新藥“槐耳沖劑”，同時提出藥用真菌新型雙向性固體發酵工程理論。藥用真菌新型雙向性固體發酵工程(以下簡稱“雙向發酵”)其原理為選定特定的發酵菌種，用3特定的中藥材作為藥性基質，再用農副產品作為營養基質(合稱全性基質)，雙方共構成一個發酵組合，在特定條件下進行雙向發酵，發酵產品成為藥性菌質，它是生物技術的一個新起點。它可以改變原藥的性能、增強藥效及擴大適應癥。發酵后的產物比進行發酵的兩種物質單獨使用的藥效大，即“1+1 > 2”。卞寒iiHordeum vulgare)為禾本科一年生草本植物的種子,既是食品又是藥品， 《本草綱目》記載“大麥味甘、性平、有去食療脹、消積進食、平胃止渴、消暑除熱、益氣調中、 寬胸大氣、補虛劣、壯血脈、益顏色、實五臟、化谷食之功”。現代研究證明，大麥茶含有人體所需的17種微量元素，19種以上氨基酸，富含多種維生素及不飽和脂肪酸、蛋白質和膳食纖維。用以治食積不化，脘悶腹脹，泄瀉等脾胃虛弱之癥。
技術實現思路
本專利技術提供一種雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物及制備方法及其用途，以解決白耙齒菌液體培養提取物使患者產生胃脘不適、口干、納差、惡心等副作用的問題。本專利技術采取的技術方案是雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物的制備方法是(1)白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子，將該種子在無菌條件下接種到有大麥培養基的種子瓶中；(2)種子瓶發酵培養在溫度22°C-26°C，空氣濕度65%-70%環境下發酵7-9天；(3)發酵瓶發酵生產培養在溫度22°C-26°C，空氣濕度65%-70%環境下發酵18-21 天，得到白耙齒菌的菌質；(4)該菌質以80°C 90°C熱水提取2 3次，第一次3小時，第二次2小時，第三次I小時，合并濾液，濃縮成60°C時測相對密度I. 05^1. 10的清膏，50°C 55°C減壓干燥，粉碎成細粉。本專利技術所述的大麥培養基是將重量比為95%-97%的大麥粒浸泡，使含水量達到 50-55%，加入重量比1%-2%的石膏粉，重量比2%-3%的蔗糖。通過雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物的制備方法得到的白耙齒菌菌質提取物在制備治療慢性腎小球腎炎屬下焦濕熱證者的藥物中應用。本專利技術利用大麥作為藥性基質兼營養基質(稱全性基質)，接種具有治療腎小球腎炎作用的白耙齒菌，雙方共構成一個發酵組合，在特定條件下進行雙向發酵，發酵產品成為藥性菌質。大麥可以提供白耙齒菌生長的營養成分，使白耙齒菌菌絲生長繁殖，得到具有治療腎小球腎炎的代謝物，同時通過白耙齒菌的生長和代謝，改變大麥原有的性能、增強健脾消食的功能，緩和白耙齒菌代謝物所致胃脘不適，口干，納差，惡心等副作用。具體實施方式本專利技術所述白祀齒菌ZrjDeJT Iacteus Fr,該菌種保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，保藏編號是=CGMCC No. 1016。白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子的方法如下(I)一級斜面菌種培養基:葡萄糖 2-3%,馬鈴薯 20-25%,瓊脂 2. 2%，MgSO4 O. 2%, KH2PO4O. 3%, VB1 O. 05% ； 斜面菌種培養溫度25-27°C，120小時菌絲長滿斜面，放置冷藏柜2-4°C存備用；4(2) 二級搖瓶菌種培養基:葡萄糖 2%，酵母浸膏 O. 5%, KH2PO4 O. 2%, NaH2SO4 O. 15%,蛋白胨 O. 2%, VB1 O. 01%, ρΗ6· 5 ；取菌絲粗壯茂密的斜面菌種，在無菌條件下按I :4接種量接種，于26土1°C搖床培養 4飛天；結果菌液澄明，黃色，有濃水果香味，菌球呈放射狀；鏡檢美蘭單染色菌絲著色深，粗壯，分枝多，鎖狀聯合明顯可見；此時期正是菌絲發育的旺盛期(對數生長期)，又無雜菌污染，可轉為固體培養。實施例I本專利技術膠囊劑的制備(O白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子，將該種子在無菌條件下接種到有大麥培養基的種子瓶中；所述的大麥培養基是將重量比為95%的大麥粒浸泡，使含水量達到50%，加入重量比1%的石膏粉，重量比2%的蔗糖；(2)種子瓶發酵培養在溫度26°C，空氣濕度70%環境下發酵7天；(3)發酵瓶發酵生產培養在溫度26°C，空氣濕度70%環境下發酵18天，得到白耙齒菌的菌質；(4)該菌質以90°C熱水提取3次，第一次3小時，第二次2小時，第三次I小時，合并濾液，濃縮成60°C時測相對密度I. 10的清膏，55°C減壓干燥，粉碎本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物，其特征在于它是由下列方法得到的：（1）白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子，將該種子在無菌條件下接種到有大麥培養基的種子瓶中；（2）種子瓶發酵培養：在溫度22℃？26℃，空氣濕度65%？70%？環境下發酵7？9天；（3）發酵瓶發酵生產培養：在溫度22℃？26℃，空氣濕度65%？70%？環境下發酵18？21天，得到白耙齒菌的菌質；（4）該菌質以80℃~90℃熱水提取2~3次，第一次3小時，第二次2小時，第三次1小時，合并濾液，濃縮成60℃時測相對密度1.05~1.10的清膏，50℃~55℃減壓干燥，粉碎成細粉。
【技術特征摘要】
1.一種雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物，其特征在于它是由下列方法得到的(1)白耙齒菌以母種進行液體培養得到對數生長期的種子，將該種子在無菌條件下接種到有大麥培養基的種子瓶中；(2)種子瓶發酵培養在溫度22°C-26°C，空氣濕度65%-70%環境下發酵7-9天；(3)發酵瓶發酵生產培養在溫度22°C-26°C，空氣濕度65%-70%環境下發酵18-21 天，得到白耙齒菌的菌質；(4)該菌質以80°C 90°C熱水提取2 3次，第一次3小時，第二次2小時，第三次I小時，合并濾液，濃縮成60°C時測相對密度I. 05^1. 10的清膏，50°C 55°C減壓干燥，粉碎成細粉。2.根據權利要求I所述的雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物，其特征在于所述的大麥培養基是將重量比為95%-97%的大麥粒浸泡，使含水量達到50-55%，加入重量比 1%_2%的石骨粉，重量比2%_3%的鹿糖。3.如權利要求I所述的雙向性固體發酵白耙齒菌菌質提取物的的制...
【專利技術屬性】
技術研發人員：郭尚印，
申請(專利權)人：長春益腎康生物制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：
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