柚皮素在制備治療肺炎藥物中的應用制造技術

本發明專利技術涉及柚皮素在制備治療肺炎藥物中的應用，通過兔紅細胞溶血試驗、肺上皮細胞(A549)損傷的保護試驗以及小鼠金葡菌肺炎模型證實其治療金葡菌感染作用。對比使用抗生素治療，使用柚皮素具有無耐藥性，治愈率高的特點。

【技術實現步驟摘要】
柚皮素在制備治療肺炎藥物中的應用
本專利技術涉及柚皮素在制備治療肺炎藥物中的應用，屬于醫藥領域。一、
技術介紹
柚皮素(naringenin，Nar，4，5，7一三羥黃烷酮)是從蕓香科植物柚中提取出的一種單體，屬于黃酮類化合物，它廣泛存在于檸檬、葡萄汁、橘子等中，具有較強的清除自由基、抗氧化、抗炎、抗動脈粥樣硬化、抗纖維化、細胞保護作用，以及抗菌、消炎、抗腫瘤等多種藥理作用，但目前尚未作為藥物應用于臨床。細菌性肺炎是由肺炎鏈球菌(即肺炎球菌)、金黃色葡萄球菌、甲型溶血性鏈球菌、肺炎克雷白桿菌、流感嗜血桿菌、銅綠假單胞菌、埃希大腸桿菌、綠膿桿菌等感染所引起的疾病。近年來，金黃色葡萄球菌耐藥性日益嚴重，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌(MRSA)，對大部分抗生素都有耐藥性。臨床上由金黃色葡萄球菌感染的肺炎發病率和死亡率依然很高，傳統抗生素在治療耐藥性金黃色葡萄球菌引起的肺炎效果也在逐漸降低。因此，臨床上金黃色葡萄球菌感染可能會面臨無藥可治的局面，尋找到切實有效的新型抗菌藥物已成為迫切的需要。本專利技術研究從金黃色葡萄球菌的主要毒力因子α溶血素入手，證實了柚皮素通過抑制α溶血素分泌從而治療細菌性肺炎，尤其是耐藥性金黃色葡萄球菌引起的肺炎具有較好的治療效果。二、
技術實現思路
柚皮素的分子結構如下：本專利技術通過兔紅細胞溶血試驗、人肺上皮細胞(A549)損傷的保護試驗以及小鼠金葡菌肺炎模型證實其治療金葡菌感染作用。三、具體實施方式1.溶血試驗金黃色葡萄球菌培養再與不同濃度的柚皮素共同培養到對數生長后期，收獲菌液離心取上清。將不同藥物濃度培養上清分別與稀釋的兔脫纖維紅細胞混合，于37℃共孵育10-20分鐘。離心測量上清的吸光值。加入不同濃度的柚皮素后溶血百分比如下表1：表1.ATCC29213、ATCC10832、8325-4和BAA-1717在不處理和加入不同濃度的柚皮素的培養物的上清溶血作用a藥物未處理組的金黃色葡萄球菌培養物上清對兔紅細胞的溶血作用設定為100％溶血：none表示為觀察到溶血作用；各藥物處理組與未處理組進行t檢驗分析差異性(*表示差異顯著P＜0.05；**表示差異極顯著)。2.人肺上皮細胞(A549)損傷的保護試驗金葡菌NCTC8325-4于TSB培養基中培養至取5ml的細菌培養物，離心并重懸于10ml的F12K培養基中。A549細胞用含10％胎牛血清F12K培養，以1.5×101個細胞/孔鋪于96孔板中，37℃、5％CO2培養24小時。細胞貼壁后，加入100μl金葡菌懸液，并加入不同濃度的柚皮素，置于細胞培養箱中于37℃、5％CO2共培養8h。加入live(greed)/dead(red)試劑，后于激光共聚焦顯微鏡(LSCM)下觀察A549細胞的狀態，活細胞顯綠色，死細胞顯紅色。結果表明，柚皮素能夠保護金葡菌α-溶血素介導的人肺上皮細胞(A549)損傷，該作用呈現劑量依賴性。3.小鼠金葡菌肺炎的實驗治療學研究3.1小鼠金葡菌肺炎模型C57BL/6J小鼠(雄性，18-22g)經乙醚麻醉后，滴鼻30μl金葡菌懸液(金葡菌8325-4)，小鼠平躺直至蘇醒，建立小鼠金葡菌肺炎的模型。致死試驗給予4×108CFUs的金葡菌，而組織病理學考察給與2×108CFUs的金葡菌。3.2保護率試驗小鼠接種金葡菌后2h分別皮下注射100、50和25mg/kg(100μl)的柚皮素，每6h給藥一次。不給藥對照組給予100μl的生理鹽水，每組30只小鼠。按給藥方案給藥后，分別記錄小鼠感染金葡菌24h、48h、72h后的死亡率。結果表明，經柚皮素處理后，顯著降低小鼠金葡菌肺炎的死亡率(P＜0.05)。如表2.表2.柚皮素對小鼠金葡菌肺炎死亡率的影響本文檔來自技高網...

【技術保護點】
柚皮素在制備治療肺炎藥物中的應用。

【技術特征摘要】
1.柚皮素在制備治療由金黃葡萄球菌引起的肺炎藥物中的應用。2.根據...

【專利技術屬性】
技術研發人員：鄧旭明，張雨，邱家章，魯崇建，
申請(專利權)人：吉林大學，
類型：發明
國別省市：