利用梧桐落葉促進小球藻快速生長的方法，屬于生物質資源化與生物能源領域。為了減少大量梧桐落葉生物質資源的低附加值使用甚至浪費的問題，本發明專利技術公開了一種利用梧桐落葉促進小球藻快速生長的方法，包括如下步驟：采集梧桐落葉，清理后粉碎至40目～100目；稱取落葉粉末于玻璃缸中，后用蒸餾水常溫浸提、蒸餾水煮沸提取、硫酸酸化pH值2-3處理2d或硫酸酸化pH值4-5處理(1h或2d)；后經過濾去除顆粒，即得到梧桐落葉的提取物。各提取物均顯著促進小球藻生長，以水煮沸提取液促藻效果最好。本發明專利技術既高效利用了梧桐落葉資源又解決了新型生物質能源藻小球藻的快速生長問題，為今后工業化快速大量培養小球藻提供了可能。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于生物質資源化與生物能源領域，特別涉及。
技術介紹
梧桐是世界范圍常見的行道樹及庭院綠化樹種。作為落葉喬木，梧桐每年都產生大量落葉，不及時清理易造成環境污染、影響環境美觀。目前，梧桐落葉處理處置的方法常見的有焚燒、填埋、堆肥、制飼料和板材等。焚燒近年來已逐漸被禁止；填埋既浪費資源又耗費人力物力；堆肥效率較低且可能存在安全隱患(常福生.利用高效復合菌劑處理城市落 葉技術.天津科技，2003，(4) 53);制飼料因含單寧類物質易造成動物拒食(張曉慶，郝正里，李發弟.植物單寧對反芻動物養分利用的影響，2006，27 (13) 44-46);而制板材則因為落葉材質疏松，板材密實度低，應用效果不佳。小球藻是一類重要的高產油高蛋白微藻，其產油率高，富含蛋白質、脂質、多糖、食用纖維及微量元素，可直接處理工業廢氣達到減排效應，具有競爭生長優勢，可高附加值利用，生長不占用耕地等，被認為具有極高的應用價值(張薇，吳虹，宗敏華.蛋白核小球藻發酵產油脂的研究.微生物學通報，2008，35 ￠) :855-860)。近年來，利用生物源活性物質調控微藻生長得到較快發展。已有利用植物代謝物質純品或人工合成的調節劑來促進微藻的生長，如赤霉素等(孟春曉，高政權.外源赤霉素對雨生紅球藻中蝦青素積累的影響.水產科學，2007. 26(5) :249-255)。
技術實現思路
本專利技術的目的是開發，以期實現對梧桐落葉生物量的高附加值利用和高價值小球藻的快速大量培養。本專利技術基于大量實驗研究，發現梧桐落葉提取物可顯著促進小球藻快速生長。為了獲取梧桐落葉促藻提取物，本專利技術開發了。該方法其特征在于包括以下步驟I)采集Ikg梧桐落葉，清理后經粉碎機粉碎至40目-100目；2)粉碎后的梧桐落葉粉末應貯存于密封棕色干燥玻璃容器中；3)稱取一定量梧桐落葉粉末置于500mL玻璃缸中；4)梧桐落葉粉末的水浸提方法落葉粉末與蒸餾水(質量體積比，g/mL)控制在I: 5,輔助磁力攪拌器攪拌,常溫浸泡36 54h ;5)梧桐落葉粉末的水煮沸方法落葉粉末與蒸餾水(質量體積比，g/mL)控制在I 5,400C _60°C溫水浸泡O. 5-lh后，再經電爐煎煮4_6h ；6)梧桐落葉粉末的硫酸酸化方法落葉粉末與蒸餾水(質量體積比，g/mL)控制在I 5，加入適量硫酸使混合物pH值為2-3或4-5 ；pH值2_3時置于常溫25°C處理2d ；pH值4-5時置于常溫25°C處理2d或高溫100°C處理Ih ;處理后混合物用氨水中和至pH值為7. O。6)經上述各種方法提取后，減壓抽濾濾除顆粒物后，再經O. 22 μ m濾膜過濾去除雜菌即得到梧桐落葉提取物。7)在無菌條件下，控制小球藻藻液中梧桐落葉提取物濃度為lg/L_20g/L，每天定時搖動3-5次，培養5-7d。其中促進效果最佳的制備方法為蒸餾水煮沸，促進效果最弱的方法為硫酸PH2-3酸化處理2d。 8)小球藻培養條件為溫度25°C，光照lOOOlux，光暗時間比為14h 10h，培養基為無菌SE培養基。在步驟I)中的梧桐落葉清理的方式通過旋振篩，篩除梧桐落葉上吸附的塵土及顆粒；后經自來水快速沖淋，去離子水洗滌后60°C烘干處理2d，即得到梧桐干燥落葉。在步驟5)中所述硫酸酸液摩爾濃度控制在15-18M之間。在步驟5)中所述氨水摩爾濃度控制在12-15M之間。在步驟5)中所述硫酸酸化處理方法也是梧桐落葉纖維素和半纖維素利用的一種前處理方法，處理產物亦具有較明顯的促藻效果，工藝上結合可達到梧桐落葉高效利用的目的。本專利技術所述具有過程簡單，來源廣泛，費用低，制備效果好等優點，可在梧桐落葉高效利用和小球藻快速大量培養方面應用。附圖說明圖I是梧桐落葉提取物對小球藻生長的促進率結果。具體實施例方式下面以實施例進一步說明本專利。實施例I采集Ikg梧桐落葉，清理后粉碎至50目并貯存于密封棕色干燥玻璃容器中。稱取50g梧桐落葉粉末于500mL玻璃缸中，用250mL蒸懼水,在磁力攪拌器攪拌下,常溫浸泡48h。后經減壓抽濾濾除顆粒物，再經O. 22 μ m濾膜過濾去除雜菌，即得到梧桐落葉提取物。與空白對照相比，投加濃度為lg/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到10. 22倍；投加濃度為5g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到8. 00倍；投加濃度為10g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到11. 11倍；投加濃度為20g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到9. 44倍。實施例2采集Ikg梧桐落葉，清理后粉碎至50目并貯存于密封棕色干燥玻璃容器中。稱取50g梧桐落葉粉末置于500mL玻璃缸中，用250mL 40°C蒸餾水浸泡0. 5h后，再經電爐煎煮4h。后經減壓抽濾濾除顆粒物后，再經0. 22 μ m濾膜過濾去除雜菌，即得到梧桐落葉提取物。與空白對照相比，投加濃度為lg/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到13. 22倍；投加濃度為5g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到3. 78倍；投加濃度為10g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到6. 78倍；投加濃度為20g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到17. 67倍。實施例3采集Ikg梧桐落葉，清理后粉碎至50目并貯存于密封棕色干燥玻璃容器中。稱取50g梧桐落葉粉末置于500mL玻璃缸中，加入250mL蒸餾水。后加入硫酸調pH值至2_3，置于常溫25°C處理2d,后用氨水中和至pH值為7. O ;經減壓抽濾濾除顆粒物后,再經O. 22 μ m濾膜過濾去除雜菌，即得到梧桐落葉提取物。與空白對照相比，投加濃度為lg/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到21% ;投加濃度為5g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到2. 76倍；投加濃度為10g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到I. 77倍；投加濃度為20g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到5. 86倍。實施例4采集Ikg梧桐落葉，清理后粉碎至50目并貯存于密封棕色干燥玻璃容器中。稱取50g梧桐落葉粉末置于500mL玻璃缸中，加入250mL蒸餾水。后加入硫酸調pH值至4_5，置于 高溫100°C處理lh，后用氨水中和至pH值為7. O ;經減壓抽濾濾除顆粒物后，再經O. 22μ m濾膜過濾去除雜菌，即得到梧桐落葉提取物。與空白對照相比，投加濃度為lg/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到I. 56倍；投加濃度為5g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到13. 58倍；投加濃度為10g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到14. 63倍；投加濃度為20g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到8. 13倍實施例5采集Ikg梧桐落葉，清理后粉碎至50目并貯存于密封棕色干燥玻璃容器中。稱取50g梧桐落葉粉末置于500mL玻璃缸中，加入250mL蒸餾水。后加入硫酸調pH值至4_5，置于常溫25°C處理2d,后用氨水中和至pH值為7. O ;經減壓抽濾濾除顆粒物后,再經O. 22 μ m濾膜過濾去除雜菌，即得到梧桐落葉提取物。與空白對照相比，投加濃度為lg/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到2. 25倍；投加濃度為5g/L時，第7天對小球藻的生長促進率可達到14. 00倍；投加濃度為本文檔來自技高網...
【技術保護點】
利用梧桐落葉促進小球藻快速生長的方法，其特征在于按如下步驟進行：1)采集梧桐落葉，清理后粉碎至40～100目；2)梧桐落葉粉末后置于玻璃缸內，分別采用蒸餾水浸提、蒸餾水煮沸、硫酸酸化pH值2？3處理2d、硫酸酸化pH值4？5處理1h、硫酸酸化pH值4？5處理2d；后經減壓抽濾濾除顆粒物后，再經0.22μm濾膜過濾去除雜菌即得到梧桐落葉提取物。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：洪喻，上官小亞，秦墨梅，
申請(專利權)人：北京林業大學，
類型：發明
國別省市：
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