本發明專利技術涉及一種用于intergrin?αvβ3受體陽性腫瘤診斷的RGD多肽放射性藥物及其制備方法。該藥物在結構上為半乳糖化的RGD環狀二聚體，通過雙功能螯合劑HYNIC進行放射性核素99mTc標記。其主要特征是：采用兩個半乳糖作為RGD的連接鏈，降低了藥物在腸道、肺等非靶器官中的攝取，從而提高了腫瘤顯像的圖像質量。所述的放射性藥物為99mTc-Galacto-RGD2，為無色透明液體針劑。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及用于腫瘤診斷的放射性藥物,特別涉及用于intergrin α νβ3受體陽性腫瘤診斷的一種RGD多肽放射性藥物及其制備方法。
技術介紹
據世界衛生組織(WHO)統計，全世界惡性腫瘤每年發病1100多萬人，病死800多萬人。惡性腫瘤發病率在我國也呈明顯上升趨勢，據國家衛生資料統計，近兩年來我國城市居民惡性腫瘤占死亡原因的第I位，每年新增患者約220萬人。近年來惡性腫瘤的治療手段在不斷發展，不僅傳統的化療和放療技術更加規范化和科學化，新的治療方法，如分子祀向治療、免疫治療和基因治療等，正在逐步應用于臨 床。與之相適應，要求惡性腫瘤診斷技術不僅要能夠進行準確的診斷，更迫切需要進一步反映惡性腫瘤的生物學行為和病理特點，為治療方案的科學化決策提供確切的依據。惡性腫瘤的轉移潛力直接關系到患者的預后，同時對于臨床醫師選擇治療方案具有至關重要的意義。但目前臨床上還缺乏準確判定惡性腫瘤轉移能力的檢測方法，而主要依靠經驗判斷。新生血管和淋巴管的形成在腫瘤發生、發展和轉移中發揮著重要的作用，腫瘤新生血管形成促進腫瘤生長和轉移，淋巴道形成與腫瘤轉移直接相關。整合素(integrin)是一組跨膜糖蛋白，由一個α亞單位和β亞單位通過非共價鍵組成的異二聚體，也是細胞外基質蛋白的受體，與細胞外基質蛋白(如纖維結合蛋白、玻璃結合蛋白、層粘蛋白和膠原等)的受體識別序列RGD (精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸)特異結合。整合素調控新生血管和淋巴道的形成。諸多研究表明，整合素調控金屬基質蛋白酶等蛋白水解酶，直接參與細胞外基質的降解，促使腫瘤轉移；整合素的豐富表達是促使腫瘤細胞和血管內皮細胞遷移和侵襲的重要分子，它直接介導腫瘤細胞與基質蛋白的粘附和結合；參與調控胞內細胞骨架構成，細胞增殖。ανβ3是目前研究最多的整合素分子，在骨肉瘤、成神經細胞瘤、肺癌、乳腺癌、前列腺癌、膀胱癌、膠質母細胞瘤及浸潤性黑色素瘤等多種實體腫瘤細胞表面和腫瘤新生血管均有豐富的表達，在成熟血管內皮細胞和絕大多數正常組織表達缺乏或幾乎不表達。ανβ3受體介導腫瘤細胞粘附和移行，在腫瘤新生血管生成和淋巴道轉移發揮重要作用。ανβ3的表達水平與惡性腫瘤的浸潤轉移能力等惡性表型有關，也可以作為評價某些惡性腫瘤預后的的指標。放射性核素標記的RGD序列配體已經被用于腫瘤的放射性核素顯像研究，用于檢測轉移潛力較高的integrin ανβ3表達陽性的腫瘤。已有的研究結果認為RGD多肽二聚體顯像劑與惡性腫瘤表面integrin α ν β 3的親和力更好,要優于RGD多肽四聚體。但目前已有的RGD多肽二聚體顯像劑在非靶器官，特別是腸道等器官的攝取較多，腹部本底較高，干擾了腹部腫瘤的成像效果，有必要專利技術新型的RGD多肽二聚體顯像劑，通過改變配體的結構，進一步降低顯像劑在腸等非靶器官的攝取，從而降低放射性本底，提高腫瘤顯像的圖像質量。
技術實現思路
為克服已有技術的缺點，本專利技術的目的在于提供一種非靶器官攝取更為理想的放射性核素標記RGD多肽腫瘤診斷藥物。為達到上述目的，本專利技術的主要技術方案如下將HYNIC-OSu與半乳糖化的R⑶肽二聚體Galacto-RGD2相連接，制備得到配體HYNIC-Galacto-RGD2。利用配體中HYNIC的螯合作用，實現"mTc標記,制成RGD多肽二聚體顯像藥物99mTc-Galacto_RGD2。在配體結構中引入兩個半乳糖連接鏈，減少了藥物在腸道中的攝取，從而降低了放射性本底，提高了腫瘤顯像的圖像質量。附圖說明圖I標記前體化合物HYNIC-Galacto_RGD2的合成路線示意圖； 圖2 99mTc標記的診斷藥物99mTc-Galact0-RGD2的合成路線示意圖； 圖3 99mTc-Galacto-RGD2 的放射性 HPLC 圖譜；圖4在過量E2抑制或未經E2抑制的條件下，99mTc-Galacto-RGD2在荷U87MG人膠質瘤裸鼠中注射后60 min的生物分布；圖5 99mTc-Galacto-RGD2在荷U87MG人膠質瘤裸鼠模型中的3D和橫斷面的SPECT-CT 圖像；圖6注射前的99mTc-Galacto-RGD2、注射后30 min和120 min的尿樣以及注射后120 min的糞便樣本的放射性HPLC圖譜。具體實施例方式一.半乳糖化RGD多肽放射性藥物的制備方法I.材料和設備化學試劑均購于美國Sigma/Aldrich公司，無需進一步純化。Galacto-RGD肽二聚體(Galacto-RGD2)由美國 Peptides International 公司(Louisville, KY)按照常規工藝制造。HYNIC-Osu根據文獻中方法合成。ESI(電噴射離子化)質譜數據由Finnigan LCQ傳統質譜儀上采集獲得。"mTc04_從原子高科股份有限公司購得。2. HPLC (高效液相色譜)方法HPLC方法I :使用LabAillance色譜系統，包括紫外_可見光檢測儀(波長為254nm)和Zorbax C18半制備柱(柱寬X柱長為9. 4 nmX250 mm，固定相的孔徑大小為100A，美國Agilent Technologies公司提供)。流速為2. 5 mL/min,流動相A相為含O. 1%TFA 的水；B 相為含 O. 1% TFA 的甲醇。流動相梯度0_5 min, 90%A->80%A ；5. 01-20 min,80%A->70%A。HPLC 方法 2 :使用 LabAillance 色譜系統,包括 β-ram IN/US 檢測儀(Tampa, FL)和Zorbax C18色譜柱(柱寬X柱長為4. 6 mmX250 _，固定相的孔徑大小為300 A，美國Agilent Technologies公司提供)。流速為I mL/min,流動相A相為25 mM NH4Oac ;B相為乙腈。流動相梯度為 0-5 min, 90% A ；5. 01-20 min, 90%A->60%A ；20. 01-25 min，60%A_>40%A。3.標記前體化合物HYNIC-Galacto-RGD2的制備方法將HYNIC-Osu (5. 4 mg, 12 μ mol)和 Galacto-RGD2 (6. 5 mg, 3 μπιο )溶于 DMF(2 mL)。 滴加過量的DIEA(5滴)至上述混合液，室溫攪拌至反應結束(約5天)。將2 mL水加至反應液中，用三氟乙酸(TFA)調節pH至:Γ4。產品經HPLC分離純化(HPLC方法1)，收集保留時間為14. 5 min的組分，冷凍干燥后得到3. 5 mg目標產物HYNIC-Galacto-RGD2(圖 I)。ESI-MS(C104H146N32O36S):實驗值為 2452. 3( + )，計算值為 2451. 03 (+)。4. 99mTc-Galacto-RGD2 的制備方法將I. (Tl. 5 mL含有1110 1850 MBq Na99mTcO4的生理鹽水加至含有20 μ gHYNIC-Galacto-RGD2,5 mg TPPTS、6. 5 mg tricine、40 mg 甘露醇、38. 5 mg 六水合琥珀酸二鈉和12. 7 mg琥珀酸的凍干瓶中本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種99mTc標記的RGD多肽放射性藥物，該藥物在結構上為半乳糖化的RGD環狀二聚體，通過雙功能螯合劑HYNIC進行放射性核素99mTc標記，其主要特征是：采用兩個半乳糖作為RGD的連接鏈，降低了藥物在腸道、肺等非靶器官中的攝取，從而提高了腫瘤顯像的圖像質量，所述的放射性藥物為99mTc？Galacto？RGD2，為無色透明液體針劑。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：不公告發明人，
申請(專利權)人：安徽筑夢生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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