本實用新型專利技術(shù)公開了一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,包括箱體,其中,所述箱體上設有活動門、鹵素燈開關(guān)、紫外燈管開關(guān)和總電源開關(guān),所述箱體內(nèi)頂部設有鹵素燈,箱體兩側(cè)內(nèi)壁上分別設置有至少一個紫外燈管。本實用新型專利技術(shù)克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足,操作方便、光照均勻并可進行紫外殺菌。(*該技術(shù)在2022年保護過期,可自由使用*)
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本技術(shù)涉及ー種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置。
技術(shù)介紹
實時PCR技術(shù)被應用多年,用于檢測食品、飼料或環(huán)境中的病原微生物。然而,目前的PCR檢測方法容易出現(xiàn)假陽性的結(jié)果,這造成了巨大的浪費和不必要的召回事件的發(fā)生。出現(xiàn)這種結(jié)果的原因是PCR技術(shù)跟其它的DNA法一祥,均不能將活的跟死的細菌分開,導致了 PCR技術(shù)提供了錯誤的結(jié)果。為了克服以上PCR技術(shù)的弱點,避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn),將單疊氮溴化こ錠染料結(jié)合PCR技術(shù)對試樣進行處理。單疊氮溴化こ錠進入死的細菌體內(nèi)后與DNA分子進行結(jié)合, 單疊氮溴化こ錠染料使得細菌在染色后不能被溶解,相反的是,染料不能穿透活細胞,這使得檢測人員可以利用這種改進的PCR技術(shù)很容易的區(qū)分活的及死的細菌,從而避免假陽性結(jié)果的出現(xiàn)。
技術(shù)實現(xiàn)思路
由鑒于此,本技術(shù)的目的是提供一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足,操作方便、光照均勻并可進行紫外殺菌。為了實現(xiàn)上述目的,本技術(shù)采用以下技術(shù)方案一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,包括箱體,其中,所述箱體上設有活動門、鹵素燈開關(guān)、紫外燈管開關(guān)和總電源開關(guān),所述箱體內(nèi)頂部設有鹵素燈,箱體兩側(cè)內(nèi)壁上分別設置有至少ー個紫外燈管。進ー步,所述的紫外燈管為兩個。進ー步,所述箱體上還設有可視窗ロ。進ー步,所述鹵素燈為500瓦。本技術(shù)的有益效果為本技術(shù)可用于永久性修飾細菌死細胞的DNA分子,阻斷DNA分子的聚合酶鏈式反應,從而有效區(qū)分樣品中細菌的死活狀態(tài),降低PCR檢測樣品中致病菌的假陽性率。本技術(shù)可提供約200001UX的強光,進而使PMA與菌懸液混合均勻后在本裝置內(nèi)進行光照交聯(lián),PMA所帯的光敏性疊氮基團轉(zhuǎn)化為高活性的氮賓自由基,并與結(jié)合位點附近的任意碳氫化合物反應形成穩(wěn)定的共價氮碳基,致使死細胞DNA分子的永久修飾,最后阻斷死細胞DNA分子的聚合酶鏈式反應(PCR)擴增。本技術(shù)的其他優(yōu)點、目標和特征在某種程度上將在隨后的說明書中進行闡述,并且在某種程度上,基于對下文的考察研究對本領(lǐng)域技術(shù)人員而言將是顯而易見的,或者可以從本技術(shù)的實踐中得到教導。本技術(shù)的目標和其他優(yōu)點可以通過下面的說明書或者附圖中所特別指出的結(jié)構(gòu)來實現(xiàn)和獲得。附圖說明圖I為本技術(shù)的結(jié)構(gòu)示意圖。具體實施方式如圖I所示,本技術(shù)的箱體I上設有可視窗ロ 3、活動門5、鹵素燈開關(guān)6、紫外燈管開關(guān)7和總電源開關(guān)8,活動門5與箱體I鉸接,箱體I頂部的內(nèi)壁上設有500W的鹵素燈4,箱體I兩側(cè)的內(nèi)壁上分別安裝有兩個紫外燈管2,兩個平行的紫外燈管2分別左右對稱設置于箱體I的內(nèi)側(cè)面。鹵素燈4提供強光,紫外燈管2用于殺菌,為了提高殺菌效果,在箱體I兩側(cè)的內(nèi)壁上分別安裝兩個紫外燈管2。通過可視窗ロ 3觀察內(nèi)部的光照交聯(lián)效果O本技術(shù)可用于永久性修飾細菌死細胞的DNA分子,阻斷DNA分子的聚合酶鏈式反應,從而有效區(qū)分樣品中細菌的死活狀態(tài),降低PCR檢測樣品中致病菌的假陽性率。本技術(shù)可提供約200001UX的強光,進而使PMA與菌懸液混合均勻后在本裝置內(nèi)進行光照·交聯(lián),PMA所帯的光敏性疊氮基團轉(zhuǎn)化為高活性的氮賓自由基,并與結(jié)合位點附近的任意碳氫化合物反應形成穩(wěn)定的共價氮碳基,致使死細胞DNA分子的永久修飾,最后阻斷死細胞DNA分子的聚合酶鏈式反應(PCR)擴增。使用本技術(shù)快速檢測飼料中沙門氏菌活細胞,采用如下步驟I)將飼料樣品用BPW肉湯增菌,吸取500ul菌懸液于I. 5mL離心管中,加入4ulO.5mg/mL的疊氮溴化已啶溶液,將離心管置于冰盒上,在共價交聯(lián)裝置內(nèi)曝光3min ;2)提取細菌DNA;3)PCR擴增沙門氏菌invA基因取試劑盒中預混酶及引物混合物,50ul體系吸取40ul,加入提取的細菌DNAlO ul進行PCR擴增,擴增條件為94°C預變性5min,94°C變性30sec,56°C退火 30 sec,72°C延伸 45sec,33 個循環(huán),最后 72°C終延伸 10 min ;4)電泳分析將PCR產(chǎn)物于1%瓊脂糖凝膠上進行電泳,電泳結(jié)束后,凝膠成像系統(tǒng)進行成像分析。最后說明的是,以上實施例僅用以說明本技術(shù)的技術(shù)方案而非限制,本領(lǐng)域普通技術(shù)人員對本技術(shù)的技術(shù)方案所做的其他修改或者等同替換,只要不脫離本技術(shù)技術(shù)方案的精神和范圍,均應涵蓋在本技術(shù)的權(quán)利要求范圍中。權(quán)利要求1.一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,包括箱體,其特征在于所述箱體上設有活動門、鹵素燈開關(guān)、紫外燈管開關(guān)和總電源開關(guān),所述箱體內(nèi)頂部設有鹵素燈,箱體兩側(cè)內(nèi)壁上分別設置有至少一個紫外燈管。2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,其特征在于所述的紫外燈管為兩個。3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,其特征在于所述箱體上還設有可視窗口。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,其特征在于所述鹵素燈為500瓦。專利摘要本技術(shù)公開了一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,包括箱體,其中,所述箱體上設有活動門、鹵素燈開關(guān)、紫外燈管開關(guān)和總電源開關(guān),所述箱體內(nèi)頂部設有鹵素燈,箱體兩側(cè)內(nèi)壁上分別設置有至少一個紫外燈管。本技術(shù)克服了現(xiàn)有技術(shù)的不足,操作方便、光照均勻并可進行紫外殺菌。文檔編號C12M1/00GK202626164SQ20122022810公開日2012年12月26日 申請日期2012年5月21日 優(yōu)先權(quán)日2012年5月21日專利技術(shù)者班付國, 高延玲, 張發(fā)旺, 周紅霞, 劉宏偉, 趙全成, 梁軍, 張影, 曲登峰, 王世山, 朱松波, 高小玲, 雷東風, 彭峰, 陳陽, 黃京燕, 馬俊, 焦玉萍, 李金磊, 董鵬, 常守海, 姚德新 申請人:河南省獸藥監(jiān)察所本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護點】
一種用于PMA/EMA與細菌死細胞DNA分子共價交聯(lián)裝置,包括箱體,其特征在于:所述箱體上設有活動門、鹵素燈開關(guān)、紫外燈管開關(guān)和總電源開關(guān),所述箱體內(nèi)頂部設有鹵素燈,箱體兩側(cè)內(nèi)壁上分別設置有至少一個紫外燈管。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員:班付國,高延玲,張發(fā)旺,周紅霞,劉宏偉,趙全成,梁軍,張影,曲登峰,王世山,朱松波,高小玲,雷東風,彭峰,陳陽,黃京燕,馬俊,焦玉萍,李金磊,董鵬,常守海,姚德新,
申請(專利權(quán))人:河南省獸藥監(jiān)察所,
類型:實用新型
國別省市:
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