IP-10抗體及其用途制造技術

本發明專利技術提供分離的單克隆抗體，特別是人抗體，它與IP-10高親和力地結合，抑制IP-10與其受體的結合，抑制IP-10誘導的鈣流，并且抑制IP-10誘導的細胞遷移。也提供了編碼本發明專利技術抗體的核酸分子，用于表達本發明專利技術抗體的表達載體、宿主細胞和方法。還提供了包含本發明專利技術抗體的免疫偶聯物、雙特異性分子和藥物組合物。本發明專利技術還提供應用本發明專利技術的抗體抑制IP-10活性的方法，包括用于治療各種炎癥和自身免疫病的方法。（*該技術在2024年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】
IP-10抗體及其用途本申請是申請日2004年12月10日、申請號200480036843. I、專利技術名稱為“IP-10抗體及其用途 ”的專利技術專利申請的分案申請。相關串請本申請要求2003年12月10日提交的美國臨時專利申請60/529，180號的優先權。上述申請的全部內容在此引用作為參考。_4]
技術介紹
干擾素Y誘導蛋白IO(IP-IO)(也稱為CXCL10)是一種IOkDa的趨化因子，最早是根據IP-10基因在干擾素Y (IFN-Y)處理的細胞中表達而鑒定的(Luster，A.D.等(1985)Nature 315 :672-676)。IP-10顯示與具有趨化活性的蛋白質如血小板因子4和β-血小板球蛋白以及與具有有絲分裂原活性的蛋白質如結締組織活化肽III具有同源性(Luster，A. D.等(1987) Proc. Natl. Acad. Sci. USA84 :2868-2871) 多種細胞，包括內皮細胞、單核細胞、成纖維細胞和角質形成細胞，響應IFN-Y分泌IP-10 (Luster，A. D.和Ravetch，J. V. (1987) J. Exp. Med. 166 :1084-1097)。也已經證明在人皮膚的遲發型超敏反應性(DTH)應答中，IP-10存在于真皮巨噬細胞和內皮細胞中(Kaplan, G.等(1987) J. Exp. Med. 166 1098-1108)。盡管最初是根據其被IFN-Y誘導而鑒定的，但是IP-10也可以被IFN-α誘導，例如在樹突細胞中(Padovan, Ε.等(2002) J. Leukoc. Biol. 71 :669-676)。IP-10 表達也可以在中樞神經系統的細胞如星形膠質細胞和小膠質細胞中由刺激物如IFN-Y、病毒和脂多糖誘導(Vanguri, R.和 Farber, J. M. (1994) J. Immunol. 152 :1411-1418 ；Ren, L. Q.等(1998)Brain Res. Mol. Brain Res. 59 :256-263)。IP-10 的免疫生物學在 Neville，L. F 等(1997) Cytokine Growth Factor Rev. 8 :207-219 中綜述。IP-10的受體已經確定為CXCR3，它是一種七跨膜的受體(Loetscher，M.等(1996)J Exp. Med. 184 =963-969)。CXCR3已經證明在活化的T淋巴細胞上表達，但是在靜息T淋巴細胞上不表達，在B淋巴細胞、單核細胞或粒細胞上也不表達(Loetscher，M.等，同上)。已經顯示，通過用TGF-β I刺激，NK細胞上的CXCR3表達增量調節(Inngjerdingen，Μ.等(2001)Blood97 :367-375)。也鑒定了 CXCR3 的另外兩種配體MIG(Loetseher，Μ·等，同上)和 ITAC (Cole, K. E.等(1998) J. Exp. Med. 187 :2009-2021)。已經證明，IP-10與CXCR3的結合介導活化T細胞中的鈣動員和趨化性(Loetscher，M.等，同上)。IP-10與活化NK細胞上的CXCR3結合也誘導趨化性和細胞內鈣動員(Maghazachi，Α·Α·等(1997)FASEB J. 11 :765-774)。在胸腺內，ΙΡ-10是TCRa β+CD8+T細胞、TCRy δ+T細胞和NK型細胞的化學引誘物(Romagnani，P.等(2001)Blood 97:601-607)。ΙΡ-10或其受體CXCR3已經在多種不同的炎性和自身免疫性疾病中得到鑒定，這些疾病包括多發性硬化癥(參見，例如，Sorensen, T. L.等(1999) J. Clin. Invest. 103 807-815)，類風濕性關節炎(參見，例如，Patel，D. D.等(2001)Clin. Immunol. 98 :39-45),潰瘍性結腸炎(參見，例如，Uguccioni, M.等(1999)Am. J. Pathol. 155 :331-336),肝炎(參見，例如，Narumi, S.等(1997) J. Immunol. 158 :5536-5544)，脊髓損傷(參見，例如，McTigue, D. Μ·等(1998) J. Neurosci. Res. 53 :368-376 ;Gonzalez 等 2003. Exp.Neurol. 184 :456-463),系統性紅斑狼瘡(參見，例如，Narumi, S.等(2000)Cytokine 12 1561-1565)，移植排斥(參見，例如，Zhang，Z.等(2002) J. Immunol. 168 :3205-3212)，舍格倫綜合征(參見，例如，0gawa，N.等(2002)Arthritis Rheum. 46 :2730-2741)。因此，抑制該活性的治療劑，特別是適合人用的治療劑，是所需要的。專利技術概沭本專利技術提供與IP-10結合并且表現出許多所需性質的分離的單克隆抗體，特別是人單克隆抗體。這些性質包括與人IP-10高親和力結合，以及與恒河猴IP-10的交叉反應性，但是缺乏與人MIG、人ITAC或小鼠IP- ο的實質交叉反應性。而且，該抗體抑制IP-10與其受體CXCR3的結合，抑制IP-10在受體表達細胞中誘導的鈣流(calcium flux)，并且抑 制IP-10誘導的細胞遷移(趨化性)。而且，本專利技術的抗體顯示在診斷為多發性硬化癥的病人的腦切片中與ip- ο結合。在本專利技術優選的實施方案中，人IP- ο包含具有如SEQ ID NO :121所示氨基酸序列[Genbank登錄號NP_001556]的多肽；CXCR3包含具有如SEQ ID NO :122所示氨基酸序列[Genbank登錄號NP_001495]的多肽；恒河猴IP-10包含具有如SEQ ID NO :123所示氨基酸序列[Genbank登錄號AAK95955]的多肽；小鼠IP-10包含具有如SEQ ID NO :124所示氨基酸序列[Genbank登錄號NP_067249]的多肽；人MIG包含具有如SEQ ID NO :125所示氨基酸序列[Genbank登錄號NP_002407]的多肽；和/或人ITAC包含具有如SEQ ID NO:126所示氨基酸序列[Genbank登錄號NP_005400]的多肽。在一個實施方案中，本專利技術提供一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其中該抗體與IP-10特異性結合，并且包含是選自下組的人Vh種系基因的產物或源自該基因的重鏈可變區人Vh 3-33基因、人Vh 3-30. 3基因、人Vh 5_51基因和AVh 4_61基因。在另一實施方案中，本專利技術提供一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其中該抗體與ip- ο特異性結合，并且包含是選自下組的人Vk種系基因的產物或源自該基因的輕鏈可變區人Vk A27基因、人Vk L15基因、人Vk L6基因和人Vk L18基因。在另一實施方案中，本專利技術提供一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其中該抗體與ip- ο特異性結合，并且包含(a)選自下組的人系基本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其包含：(a)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：5組成的重鏈可變區CDR1；(b)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：17組成的重鏈可變區CDR2；(c)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：28組成的重鏈可變區CDR3；(d)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：55組成的輕鏈可變區CDR1；(e)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：66組成的輕鏈可變區CDR2；和(f)由氨基酸序列SEQ？ID？NO：77組成的輕鏈可變區CDR3。

【技術特征摘要】
2003.12.10 US 60/529,1801.一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其包含 (a)由氨基酸序列SEQID NO 5組成的重鏈可變區⑶Rl ； (b)由氨基酸序列SEQID NO 17組成的重鏈可變區⑶R2 ； (c)由氨基酸序列SEQID NO 28組成的重鏈可變區⑶R3 ； (d)由氨基酸序列SEQID NO 55組成的輕鏈可變區⑶Rl ； (e)由氨基酸序列SEQID NO 66組成的輕鏈可變區⑶R2 ;和 (f)由氨基酸序列SEQID N0:77組成的輕鏈可變區⑶R3。2.一種分離的單克隆抗體或其抗原結合部分，其包含 (a)由SEQID NO :39的氨基酸序列組成的重鏈可變區；和 (b)由SEQID NO :88的氨基酸序列組成的輕鏈可變區。3.權利要求I或2的抗體或其抗原結合部分，其中所述抗體顯示至少一種如下性質 (a)抑制IP-IO與CXCR3的結合； (b)抑制IP-10誘導的鈣流； (c)抑制IP-10誘導的細胞遷移； (d)與恒河猴IP-10交叉反應； (e)不與小鼠IP-10交叉反應； (f)不與人MIG交叉反應； (g)不與人ITAC交叉反應。4.權利要求1-3任一項的抗體或其抗原結合部分，其中所述抗體為人抗體。5.前述權利要求中任一項的抗體或其抗...

【專利技術屬性】
技術研發人員：施里坎特·德施潘德，黃海純，莫漢·斯里尼瓦桑，約瑟芬·M·卡達雷爾利，王長玉，戴維·帕斯莫爾，范吉普拉姆·S·蘭甘，托馬斯·E·萊恩，漢斯·S·基爾斯特德，邁克爾·T·利厄，
申請(專利權)人：米德列斯公司，
類型：發明
國別省市：