一種抑制炎癥免疫反應的小肽及其應用制造技術

本發明專利技術涉及一種抑制炎癥免疫反應的小肽及其應用。本發明專利技術還涉及所述小分子多肽的制法和應用以及含所述多肽的藥物組合物。本發明專利技術多肽具有多種優點，例如分子量小，可透過各種眼組織屏障；水溶性好，能在中性淚液、房水和玻璃體中保持較高的濃度；合成簡單、制備成本低等。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及 生物醫藥領域，更具體地，涉及一種抑制炎癥免疫反應的小分子多肽，所述小肽是源于血栓調節蛋白的多肽。本專利技術還涉及所述多肽的制法和應用以及含所述多肽的藥物組合物。
技術介紹
炎癥(inflammation)是具有血管系統的活體組織對損傷因子所發生的防御反應。炎癥反應使血液中產生大量的促炎性細胞因子(proinflammatory cytokines),如IL-l,TNF-a ,IFN-y ,IL-6等，刺激內皮細胞、中性粒細胞、單核細胞等活化，合成和分泌蛋白及細胞因子，參與炎癥反應的各個階段，如血管擴張，血管通透性增高，炎癥細胞粘附、遷移及趨化，新生血管形成等過程。在此過程中，白細胞也通過釋放蛋白水解酶、大量炎癥介質和氧自由基等促進炎癥反應，使病情加重，造成組織損傷。眼部炎癥，如感染、過敏反應、自身免疫病等病理過程中一突出特征就是大量白細胞快速地向病變部位聚集，導致促炎性細胞因子和抗炎性細胞因子之間穩態失衡，使組織遭到破壞。這也是許多全身性疾病炎癥反應的重要病理特征，包括全身感染性疾病、風濕性疾病、腫瘤生長等。葡萄膜炎是一類眼部最常見的眼病，由于其主要影響青壯年，治療棘手，易于反復發作，治療不及時或處理不當易導致盲目，因此受到全球眼科學界的重視。隨著對葡萄膜炎認識的不斷加深，現在它被認為是發生于葡萄膜、視網膜、視網膜血管、玻璃體的炎性疾病，甚至包括視乳頭的炎性疾病，已被等同于眼內炎性疾病。目前葡萄膜炎治療主要是依靠局部和/或全身使用糖皮質激素和免疫抑制劑。這些藥物通常可發揮較好的療效，但由于此類疾病的復發性和頑固性，長期反復使用此類藥物可能引起眼壓升高、白內障、眼內炎、骨質疏松、肝腎功能損傷、糖尿病等嚴重并發癥，并可影響機體對病原體的正常免疫功能。故臨床上亟需一些特異性針對病理機制的，對正常免疫系統和全身器官無明顯毒副作用的有效的治療方法。近年來，一些新生物制劑顯示了治療的有效性，主要為阻斷重要炎癥因子TNF-α的拮抗劑。抗TNF-α抗體-英利昔單抗(Infliximab)以及可溶性TNF受體-依那西普(Etanerc印t)，均可有效抑制眼部炎癥和血管炎癥，部分提高患者的視功能，目前被用于治療Beh9et’s病等引起的葡萄膜炎。血栓調節蛋白(Thrombomodulin, TM)具有明確的抗炎特性TM可抑制脂多糖(lipopolysaccharide，LPS)刺激的小鼠巨噬細胞I κ B磷酸化和NF-κ B活化，緩解LPS誘導的炎癥損傷，發揮抗炎作用；ΤΜ的C型凝集素樣結構域可通過抑制NF- κ B和MAPK信號途徑，減少粘附分子表達而干擾中性粒細胞粘附，達到保護血管和組織的作用。雖然抗TNF α等這類藥物與傳統藥物相比，毒性更小，作用靶點更明確，但是目前還存在很多局限性。首先，由于細胞因子的多樣性，在自身免疫性疾病中的效應也盡相同，因此對細胞因子的干預治療比較復雜。如小膠質細胞產生的TNF-α具有調節細胞周期和代謝的作用，對神經系統發育有重要的作用；它還可上調抗凋亡蛋白Bcl-2和Bcl-x表達，保護神經元；因此抗TNF-α抗體可能具有加重脫髓鞘疾病、雙側前部視神經病變、肺結核等嚴重副作用。其次，眼球是人體的一個特殊的免疫豁免器官，當反復的眼部炎癥破壞血眼屏障，上述外源性的大分子蛋白藥物多次進入眼球，可能會誘發抗原抗體反應，觸發或加重眼部炎癥損傷。其次，重組的生物大分子半衰期較短，全身使用到達眼部的量有限；而局部治療可因血眼屏障的影響而受限。最后，這些生物治療藥物合成復雜、對生物技術下游工藝和生產要求高，因此價格昂貴，對廣泛應用形成一定的障礙。因此，本領域迫切需要開發一種適于眼球組織的有效安全的小分子炎癥免疫反應抑制劑。
技術實現思路
本專利技術的目的是提供一種適于眼球組織的安全有效的可抑制炎癥免疫反應的小分子多肽以及其片段、類似物和衍生物。 本專利技術的另一目的是提供含所述多肽的制法和應用。在本專利技術的第一方面，提供了一種式I表示的多肽，或其藥學上可接受的鹽[XaaO]-[Xaal]-[Xaa2]-[Xaa3]-[Xaa4]-[Xaa5]-[Xaa6]-[Xaa7]-[Xaa8]-[Xaa9]-[XaalO]-[XaalI]-[Xaal2]-[Xaal3]-[Xaal4]-[Xaal5]-[Xaal6]-[Xaal7]-[Xaal8]-[Xaal9](I)式中，XaaO是無，或1_3個氨基酸構成肽段；Xaal是選自下組的氨基酸Trp、Phe或Tyr ；Xaa2是選自下組的氨基酸Glu或Asp ;Xaa3是選自下組的氨基酸Glu或Asp ；Xaa4 是選自下組的氨基酸Gln、Asn、Arg、Ala、Lys 或 Pro ；Xaa5是選自下組的氨基酸Gln或Asn ；Xaa6是選自下組的氨基酸Cys、Tyr或Ser ；Xaa7是選自下組的氨基酸Glu、Lys、Ala或Asp ；Xaa8 是選自下組的氨基酸Val、lie、Met、Phe、Ala 或 Leu ；Xaa9是選自下組的氨基酸Lys、Gin、Asn、Glu或Arg ；XaalO是選自下組的氨基酸Ala、Leu、lie或Val ；Xaall是選自下組的氨基酸Asp或Glu ；Xaa12是選自下組的氨基酸Gly、Pro或Ala ；Xaa13 是選自下組的氨基酸Phe、Val、lie、Tyr> Ala 或 Leu ；Xaa 14 是選自下組的氨基酸Leu、Val、Met、Ala、Phe 或 lie ；Xaal5是選自下組的氨基酸Cys或Ser ;Xaal6是選自下組的氨基酸Glu或Asp ;Xaa17 是選自下組的氨基酸Phe、Val、lie、Ala、Tyr 或 Leu ；Xaa18 是選自下組的氨基酸His、Asn、Gin、Lys 或 Arg ；Xaa19是無，或1_3個氨基酸構成肽段；并且所述的多肽具有抑制炎癥免疫反應的活性，且所述多肽的長度為18-24個氨基酸。在另一優選例中，所述多肽長度為18-21個氨基酸。在另一優選例中，XaaO和Xaal9為無。在另一優選例中，XaaO是1_3個氨基酸構成的肽段。在另一優選例中，XaaO選自下組1、PI、EPI、EPV、EPQ、EPS和EPA ;更佳地，XaaO選自下組I、PI、EPI。在另一優選例中，Xaal9是1_3個氨基酸構成的肽段。在另一優選例中，Xaal9選自下組F、FP、FPA。 在另一優選例中，所述多肽選自下組(a)具有SEQ ID NO 1所示氨基酸序列的多肽；(b)將SEQ ID NO : I所示氨基酸序列經過1_6個(較佳地1_3個)氨基酸殘基的取代、缺失或添加而形成的，且具有抑制炎癥免疫反應功能的由(a)衍生的多肽。在另一優選例中，所述的多肽還包括(C)將SEQ ID NO 1所示氨基酸序列根據人以外物種的血栓調節蛋白(TM)中的氨基酸序列進行相應修改而形成的，且具有抑制炎癥免疫反應功能的由(a)衍生的多肽。在另一優選例中，所述的衍生多肽保留了 > 70%的SEQ ID NO : I的所示多肽的抑制炎癥免疫反應的活性。在另一優選例中，所述的衍生多肽與SEQ ID NO : I的相同性彡80 %，較佳地^ 90% ;更佳地彡95%。本專利技術還提供了抑制炎癥免疫反應的、式本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種下式I表示的多肽，或其藥學上可接受的鹽[Xaa0]？[Xaa1]？[Xaa2]？[Xaa3]？[Xaa4]？[Xaa5]？[Xaa6]？[Xaa7]？[Xaa8]？[Xaa9]？[Xaa10]？[Xaa11]？[Xaa12]？[Xaa13]？[Xaa14]？[Xaa15]？[Xaa16]？[Xaa17]？[Xaa18]？[Xaa19]？？？？(I)式中，Xaa0是無，或1？3個氨基酸構成肽段；Xaa1是選自下組的氨基酸：Trp、Phe或Tyr；Xaa2是選自下組的氨基酸：Glu或Asp；Xaa3是選自下組的氨基酸：Glu或Asp；Xaa4是選自下組的氨基酸：Gln、Asn、Arg、Ala、Lys或Pro；Xaa5是選自下組的氨基酸：Gln或Asn；Xaa6是選自下組的氨基酸：Cys、Tyr或Ser；Xaa7是選自下組的氨基酸：Glu、Lys、Ala或Asp；Xaa8是選自下組的氨基酸：Val、Ile、Met、Phe、Ala或Leu；Xaa9是選自下組的氨基酸：Lys、Gln、Asn、Glu或Arg；Xaa10是選自下組的氨基酸：Ala、Leu、Ile或Val；Xaa11是選自下組的氨基酸：Asp或Glu；Xaa12是選自下組的氨基酸：Gly、Pro或Ala；Xaa13是選自下組的氨基酸：Phe、Val、Ile、Tyr、Ala或Leu；Xaa14是選自下組的氨基酸：Leu、Val、Met、Ala、Phe或Ile；Xaa15是選自下組的氨基酸：Cys或Ser；Xaa16是選自下組的氨基酸：Glu或Asp；Xaa17是選自下組的氨基酸：Phe、Val、Ile、Ala、Tyr或Leu；Xaa18是選自下組的氨基酸：His、Asn、Gln、Lys或Arg；Xaa19是無，或1？3個氨基酸構成肽段；并且所述的多肽具有抑制炎癥免疫反應的活性，且所述多肽的長度為18？24個氨基酸。...

【技術特征摘要】
1.一種下式I表示的多肽，或其藥學上可接受的鹽[XaaO]-[Xaal]-[Xaa2]-[Xaa3]-[Xaa4]-[Xaa5]-[Xaa6]-[Xaa7]-[Xaa8]-[Xaa9]-[XaalO]-[XaalI]-[Xaal2]-[Xaal3]-[Xaal4]-[Xaal5]-[Xaal6]-[Xaal7]-[Xaal8]-[Xaal9] (I) 式中， XaaO是無，或1-3個氨基酸構成肽段； Xaal是選自下組的氨基酸Trp、Phe或Tyr ； Xaa2是選自下組的氨基酸Glu或Asp ； Xaa3是選自下組的氨基酸Glu或Asp ； Xaa4是選自下組的氨基酸Gln、Asn、Arg、Ala、Lys或Pro ； Xaa5是選自下組的氨基酸Gln或Asn ； Xaa6是選自下組的氨基酸Cys、Tyr或Ser ； Xaa7是選自下組的氨基酸Glu、Lys、Ala或Asp ； Xaa8是選自下組的氨基酸Val、lie、Met、Phe、Ala或Leu ； Xaa9是選自下組的氨基酸Lys、Gin、Asn、Glu或Arg ； XaalO是選自下組的氨基酸Ala、Leu、Ile或Val ； Xaall是選自下組的氨基酸Asp或Glu ； Xaa12是選自下組的氨基酸Gly、Pro或Ala ； Xaa13是選自下組的氨基酸Phe、Val、lie、Tyr> Ala或Leu ； Xaa14是選自下組的氨基酸Leu、Val、Met、Ala、Phe或lie ; Xaa15是選自下組的氨基酸Cys或Ser ； Xaa16是選自下組的氨基酸Glu或Asp ...

【專利技術屬性】
技術研發人員：許迅，金慧昳，
申請(專利權)人：上海市第一人民醫院，
類型：發明
國別省市：