一種從白亮獨活中提取獨活素的方法技術

本發明專利技術公開了一種從白亮獨活中提取獨活素的方法，方法步驟如下：a.取白亮獨活藥材粉碎，加甲醇超聲提取，提取液濃縮得到浸膏，再通過乙酸乙酯-水雙相分散萃取，取乙酸乙酯有機相濃縮，經高速逆流色譜和版制備液相色譜進行分離純化，得到高純度獨活素。本發明專利技術方法具有產品損失少、純度高、制備量大等優點。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于中藥化學領域，涉及。
技術介紹
獨活素是一種呋喃香豆素類化合物，為淺黃色細針晶，mp. 108_109°C，分子式為C16H14O5，分子量為286. 28，廣泛分布于蕓香科和傘形科多種植物中。近代研究表明，獨活素具有抗炎作用；大鼠給藥l_2mg/kg時，有刺激呼吸的作用；具有增加動脈壓和心肌收縮力的作用；另外，對大鼠離體腸有解痙活性。Appendino G等研究表明獨活素還具有細胞毒性，且進隊生長細胞有凋亡作用，獨活素通過下調細胞周期進程，使細胞停于有絲分裂G2/M期，致DNA片段化和凋亡。 目前從天然植物中提取獨活素的方法報道較少，有報道通過半合成制備得到獨活素，即由13-0-Glucosyl-heraclenol水解生成Heraclenol,再將其鄰二醇脫水形成環氧丙烷得到獨活素，或將異戊稀醇通過Sharpless不對稱環氧化反應，合成支鏈結構，再與Imperatorin水解后得到的母核相接，得到獨活素。所得獨活素其生物活性受到限制，收率低、純度低。
技術實現思路
為解決上述問題，本專利技術提供一種從天然植物白亮獨活中提取獨活素的方法，該方法制備量大、樣品損失少、產品純度高，易于規模化。本專利技術是通過以下技術方案實現的 ，其特征在于包括以下步驟 A.將白亮獨活藥材粉碎，用5-8倍體積量的甲醇作為提取溶媒進行超聲提取，提取2-6次，提取液合并，旋轉蒸發濃縮得到浸膏； B.將上述浸膏通過乙酸乙酯-水雙相分散，取乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯； C.將上述所得萃取濃縮物采用高速逆流色譜法進行分離純化，根據檢測器譜圖接收目標流分，并用制備液相色譜對流分進一步純化，得到獨活素。所述步驟A中超聲提取時間每次為20_40min。所述步驟C中高速逆流色譜溶劑系統為正己烷-乙酸乙酯-甲醇-7jC，體積比為(3-7) :(3-5):(4-8):(2-5)。所述步驟C中制備液相色譜分離條件為流動相為甲醇-水(90:10)，流速為10_20ml/mino本專利技術的有益效果在于采用乙酸乙酯-水雙相溶劑系統萃取，提高了白亮獨活中香豆素的保留率，采用高速逆流色譜和制備液相色譜結合進行分離純化，分離效果好，溶劑消耗少，可連續制備大量獨活素單體產品，具有較高的經濟價值。具體實施例方式 下面將結合具體實施方式進一步說明本專利技術，但本專利技術要求保護的范圍并不局限于下列實施方式。實施例I : 將白亮獨活藥材粉碎加5倍體積量的甲醇超聲提取3次，每次30min，合并提取液，旋轉蒸發濃縮得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水(1:1)雙相萃取，取上層乙酸乙酯有機相，減壓濃縮成浸膏。將體積比5:4:7:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振蕩搖勻，使兩相達到平衡，靜置分層后分離，下相為流動相，上相為固定相，分別對其超聲脫氣40min后冷卻備用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等體積的上相和下相溶劑中，過濾，得樣品溶液；將配制好的固定相以4ml/min的流速充滿高速逆流色譜儀的螺旋管中，開啟制備型高速逆流色譜儀，調整主機轉速為800rpm，以2ml/min的流速將流動相泵入柱內，待柱內溶劑體系建立動態平衡后，取樣品溶液由進樣閥進樣，然后根據紫外檢測譜圖收集獨活素流分，減壓濃縮后再應用高效液相色譜分離純化，流動相為甲醇-水(90:10)，流速15ml/min，根據檢測器譜圖收集目標成分，減壓濃縮得到純度98. 4%的獨活素。 實施例2: 將白亮獨活藥材粉碎加7倍體積量的甲醇超聲提取6次，每次20min，合并提取液，旋轉蒸發濃縮得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水(1:1)雙相萃取，取上層乙酸乙酯有機相，減壓濃縮成浸膏。將體積比7:5:4:5的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振蕩搖勻，使兩相達到平衡，靜置分層后分離，下相為流動相，上相為固定相，分別對其超聲脫氣40min后冷卻備用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等體積的上相和下相溶劑中，過濾，得樣品溶液；將配制好的固定相以5ml/min的流速充滿高速逆流色譜儀的螺旋管中，開啟制備型高速逆流色譜儀，調整主機轉速為800rpm，以2ml/min的流速將流動相泵入柱內，待柱內溶劑體系建立動態平衡后，取樣品溶液由進樣閥進樣，然后根據紫外檢測譜圖收集獨活素流分，減壓濃縮后再應用高效液相色譜分離純化，流動相為甲醇-水(90:10)，流速20ml/min，根據檢測器譜圖收集目標成分，減壓濃縮得到純度98. 8%的獨活素。實施例3: 將白亮獨活藥材粉碎加8倍體積量的甲醇超聲提取4次，每次35min，合并提取液，旋轉蒸發濃縮得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水(1:1)雙相萃取，取上層乙酸乙酯有機相，減壓濃縮成浸膏。將體積比3:5:5:2的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振蕩搖勻，使兩相達到平衡，靜置分層后分離，下相為流動相，上相為固定相，分別對其超聲脫氣40min后冷卻備用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等體積的上相和下相溶劑中，過濾，得樣品溶液；將配制好的固定相以5ml/min的流速充滿高速逆流色譜儀的螺旋管中，開啟制備型高速逆流色譜儀，調整主機轉速為800rpm，以2ml/min的流速將流動相泵入柱內，待柱內溶劑體系建立動態平衡后，取樣品溶液由進樣閥進樣，然后根據紫外檢測譜圖收集獨活素流分，減壓濃縮后再應用高效液相色譜分離純化，流動相為甲醇-水(90:10)，流速10ml/min，根據檢測器譜圖收集目標成分，減壓濃縮得到純度98. 6%的獨活素。實施例4: 將白亮獨活藥材粉碎加6倍體積量的甲醇超聲提取2次，每次40min，合并提取液，旋轉蒸發濃縮得到棕褐色浸膏，用乙酸乙酯和水(1:1)雙相萃取，取上層乙酸乙酯有機相，減壓濃縮成浸膏。將體積比5:3:8:3的正己烷-乙酸乙酯-甲醇-水混合，振蕩搖勻，使兩相達到平衡，靜置分層后分離，下相為流動相，上相為固定相，分別對其超聲脫氣40min后冷卻備用；取乙酸乙酯萃取浸膏溶解于等體積的上相和下相溶劑中，過濾，得樣品溶液；將配制好的固定相以4ml/min的流速充滿高速逆流色譜儀的螺旋管中，開啟制備型高速逆流色譜儀，調整主機轉速為800rpm，以2ml/min的流速將流動相泵入柱內，待柱內溶劑體系建立動態平衡后，取樣品溶液由進樣閥進樣，然后根據紫外檢測譜圖收集獨活素流分，減壓濃縮后 再應用高效液相色譜分離純化，流動相為甲醇-水(90:10)，流速12ml/min，根據檢測器譜圖收集目標成分，減壓濃縮得到純度99. 2%的獨活素。本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種從白亮獨活中提取獨活素的方法，其特征在于包括以下步驟：A.將白亮獨活藥材粉碎，用5？8倍體積量的甲醇作為提取溶媒進行超聲提取，提取2？6次，提取液合并，旋轉蒸發濃縮得到浸膏；B.將上述浸膏通過乙酸乙酯？水雙相分散，取乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯；C.將上述所得萃取濃縮物采用高速逆流色譜法進行分離純化，根據檢測器譜圖接收目標流分，并用制備液相色譜對流分進一步純化，得到獨活素。

【技術特征摘要】
1.一種從白亮獨活中提取獨活素的方法，其特征在于包括以下步驟 A.將白亮獨活藥材粉碎，用5-8倍體積量的甲醇作為提取溶媒進行超聲提取，提取2-6次，提取液合并，旋轉蒸發濃縮得到浸膏； B.將上述浸膏通過乙酸乙酯-水雙相分散，取乙酸乙酯層，減壓回收乙酸乙酯； C.將上述所得萃取濃縮物采用高速逆流色譜法進行分離純化，根據檢測器譜圖接收目標流分，并用制備液相色譜對流分進一步純化，得到獨活素。2.如權利要求I所述的一種從白亮獨活中...

【專利技術屬性】
技術研發人員：劉東鋒，
申請(專利權)人：南京澤朗醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：