本發明專利技術公開了一種奇曼堿A的制備方法，其制備方法是：（1）取長葉圖臘樹葉粗粉，70-95%的乙醇溶液連續逆流超聲提取，得到提取液；（2）將提取液濃縮，再經氧化鋁柱層析；（3）制備型液相色譜分離；（4）氯仿-丙酮重結晶，得到高純度的奇曼堿A結晶產品。本發明專利技術方法簡單、得率高，可得到高純度產品，具有較高的經濟價值和學術價值。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于天然植物提取領域，具體涉及ー種奇曼堿A的制備方法。
技術介紹
奇曼堿A (Chimanine A)，分子式C13H15NO,分子量201. 27。奇曼堿A是從蕓香科(Rutaceae)長葉圖臘樹longiflora Krause樹皮、根、莖、皮和葉中提取分離的一種喹啉生物堿類化合物。實驗研究表明，奇曼堿A具有抗寄生蟲作用。體外抗5株利什曼原蟲的IC9tl為100 μ g/ml，抗5株克氏錐蟲的IC9tl為lOOyg/ml。體內對感染利什曼蟲L. amazonensis PH8的小鼠也有效。 目前，國內尚未見奇曼堿A的提取純化方法方面的報道。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供ー種奇曼堿A的制備方法，該方法操作簡單、得率高、安全環保，可快速大量分離高純度奇曼堿A。為實現上述目的，本專利技術采用的技術方案如下 (1)提取取長葉圖臘樹葉粉碎成粗粉，用5-10倍量70-95%的こ醇溶液，25-55°C下進行連續逆流超聲提取20-100min，得到こ醇提取液； (2)氧化鋁柱層析上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮； (3)制備型液相色譜分離上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監測，收集奇曼堿A組分，將洗脫液旋轉蒸發濃縮，得奇曼堿A粗晶；(4)重結晶將奇曼堿A粗晶用氯仿-丙酮重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體。步驟(I)所述超聲頻率為50-80KHZ。步驟(2)所述氧化鋁為80-120目，氯仿-丙酮體積比為1:1，用量為柱體積的4_7倍。步驟(3)所述制備型液相色譜的流動相為こ腈-O. 15%こニ胺水溶液，體積比為32 :68，紫外檢測波長為228nm。步驟(4)所述氯仿-丙酮的體積比為2-3:1。本專利技術的優點在于1)操作簡單、耗時短，易于產業化放大；2)提取、柱層析、制備液相分離等步驟中的溶劑用量少，并可回收再利用；3)具有較高的經濟效益和學術價值，本專利技術所得產品純度高，可為奇曼堿A的進ー步開發提供藥理原料和實踐支持。具體實施例方式 下面結合具體實施例對本專利技術進ー步說明 實施例I: 取長葉圖臘樹葉Ikg,粉碎成粗粉,從連續逆流超聲提取設備頭部進料ロ進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入ロ加入10倍95%こ醇溶液，55°C下進行連續逆流超聲提取20min，超聲頻率為80KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，向浸膏中加氧化鋁(120目)拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以こ腈-O. 15%こニ胺水溶液為流動相，體積比為32 :68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為15cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為25ml,控制流速為50ml/min,紫外在線檢測,檢測波長為228nm,收集目標成分,減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮(2. 5:1)重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經HPLC檢測，純度96. 5%。實施例2: 取長葉圖臘樹葉Ikg,粉碎成粗粉,從連續逆流超聲提取設備頭部進料ロ進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入ロ加入10倍80%こ醇溶液，45°C下進行連續逆流超聲提取lOOmin，超聲頻率為60KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，加氧化鋁(80目)拌勻、干燥后裝柱，用4倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經O. 45 μ m微濾膜過 濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以こ腈-O. 15%こニ胺水溶液為流動相，體積比為32 :68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為10cm、直徑為1cm，六通閥進樣，進樣體積為5ml,控制流速為10ml/min,紫外在線檢測,檢測波長為228nm,收集目標成分,減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮(3:1)重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經HPLC檢測，純度97. 8%。實施例3: 取長葉圖臘樹葉IOkg,粉碎成粗粉,從連續逆流超聲提取設備頭部進料ロ進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入ロ加入6倍70%こ醇溶液，35°C下進行連續逆流超聲提取50min,超聲頻率為50KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，加氧化鋁(100目)拌勻、干燥后裝柱，用6倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以こ腈-O. 15%こニ胺水溶液為流動相，體積比為32 :68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為25cm、直徑為4cm，六通閥進樣，進樣體積為20ml，控制流速為20ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為228nm，收集目標成分，減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮(2:1)重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經HPLC檢測，純度98. 5%。實施例4: 取長葉圖臘樹葉IOkg,粉碎成粗粉,從連續逆流超聲提取設備頭部進料ロ進料，從連續逆流超聲提取設備尾部溶劑加入ロ加入5倍80%こ醇溶液，25°C下進行連續逆流超聲提取SOmin,超聲頻率為60KHz，得到提取液，提取液減壓回收試劑得浸膏，加氧化鋁(100目)拌勻、干燥后裝柱，用7倍柱體積的氯仿-丙酮(I: I)混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮得濃縮液。將濃縮液加入甲醇至剛好溶解，溶解后的溶液經O. 45 μ m微濾膜過濾，得到樣品溶液取濾液進樣，以こ腈-O. 15%こニ胺水溶液為流動相，體積比為32 :68，色譜柱以C8鍵合相為填料，粒徑為10 μ m，柱長為50cm、直徑為5cm，六通閥進樣，進樣體積為50ml，控制流速為150ml/min，紫外在線檢測，檢測波長為228nm，收集目標成分，減壓回收試劑得奇曼堿A粗晶，用氯仿-丙酮(2:1)重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體，經 HPLC檢測，純度97. 2%。本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種奇曼堿A的制備方法，其特征在于它包括以下步驟：（1）提取：取長葉圖臘樹葉粉碎成粗粉，用5？10倍量70？95%的乙醇溶液，25？55℃下進行連續逆流超聲提取20？100min，得到乙醇提取液；（2）氧化鋁柱層析：上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿？丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮；（3）制備型液相色譜分離：上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監測，收集奇曼堿A組分，將洗脫液旋轉蒸發濃縮，得奇曼堿A粗晶；（4）重結晶：將奇曼堿A粗晶用氯仿？丙酮重結晶，冷凍干燥得到高純度奇曼堿A晶體。
【技術特征摘要】
1.一種奇曼堿A的制備方法，其特征在于它包括以下步驟 (1)提取取長葉圖臘樹葉粉碎成粗粉，用5-10倍量70-95%的乙醇溶液，25-55°C下進行連續逆流超聲提取20-100min，得到乙醇提取液； (2)氧化鋁柱層析上述提取液濃縮至浸膏，加氧化鋁拌勻、干燥后裝柱，用氯仿-丙酮混合溶液洗脫，薄層檢測，收集奇曼堿A流分，濃縮； (3)制備型液相色譜分離上述濃縮液采用制備型液相色譜分離，紫外檢測器在線監測，收集奇曼堿A組分，將洗脫液旋轉蒸發濃縮，得奇曼堿A粗晶； (4)重結晶將奇曼堿A粗晶用氯仿-丙酮重結晶，冷凍干燥得...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉東鋒，
申請(專利權)人：南京澤朗醫藥科技有限公司，
類型：發明
國別省市：
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