一種可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及一種可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備方法。在反應(yīng)過程中，以聚乳酸作為抗癌藥物紫杉醇的載體，以牛血清白蛋白作為表面活性劑，采用納米沉淀法制備納米載藥微球。由于受網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的調(diào)理作用，藥物被聚合物包載后往往改變了藥物在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。納米微粒可以制成緩釋制劑，改變藥物在體內(nèi)的半衰期，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間；在保證藥效的前提下，減少用藥量，減輕或消除毒副作用。同時(shí)，以BSA為外水相制備聚乳酸微粒，牛血清白蛋白可吸附于微球表面，從而易于被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識(shí)別并被肝攝取，從而使載藥微球在肝臟聚集，并使藥物在肝臟緩慢釋放，延長(zhǎng)了藥物的作用時(shí)間。

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備方法；特別是。
技術(shù)介紹
載藥納米微粒是將藥物、生物活性物質(zhì)等包裹于納米微粒內(nèi)部，或吸附、連接于微粒表面，或混合、溶解于材料基質(zhì)中形成的微粒，其大小是納米數(shù)量級(jí)的(多在50nm 500nm之間)。聚合物載藥納米微粒由于具有小尺寸效應(yīng)、量子尺寸效應(yīng)、表面效應(yīng)以及宏觀量子隧道效應(yīng)等特性，而利于被病變組織及細(xì)胞吸收，從而使其可能成為優(yōu)良的藥物載體。由于受網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的調(diào)理作用，藥物被聚合物包載后往往改變了藥物在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。納米微粒可以制成緩釋制劑，改變藥物在體內(nèi)的半衰期，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間；在保證藥效的前提下，減少用藥量，減輕或消除毒副作用。紫杉醇(Taxol，或者 Paclitaxel)是一種從太平洋紫杉屬短葉紫杉莖皮中提取而得的抗癌新藥。紫杉醇屬有絲分裂抑制劑或紡錘體毒素(Spindle poison)，和目前常用的化療藥作用機(jī)理不同，它是誘導(dǎo)和促進(jìn)微管的裝配。紫杉醇通過促進(jìn)微管蛋白聚合，抑制解聚，保持微管蛋白穩(wěn)定，抑制細(xì)胞有絲分裂。紫杉醇獨(dú)特的抗腫瘤作用日益受到世界各國(guó)研究人員的重視。目前，用于臨床的紫杉醇制劑常以靜脈注射給藥，臨床上使用的紫杉醇注射液是由聚氧乙烯蓖麻油 (cremophor EL)-無水乙醇(體積比=50 50)配制的溶液，用前先稀釋后靜脈滴注，稀釋后的制劑容易降解，容易析出紫杉醇晶體，存在嚴(yán)重的安全隱患。另外，嚴(yán)重過敏反應(yīng)使患者呼吸困難、血壓降低、惡心、支氣管痙攣、彌漫性蕁麻疹和血管性水腫，可致患者死亡。20世紀(jì)70年代，有學(xué)者提出了間質(zhì)化療的概念(interstitial chemotherapy) 它是將抗癌藥物負(fù)載于可降解或不可降解的賦形劑制備成藥物緩釋系統(tǒng)，經(jīng)由不同方式注入(或植入)腫瘤組織、瘤周組織的間質(zhì)中或腫瘤切除后的瘤床，即能維持治療部位的有效濃度，又能顯著減少全身毒副作用，已成為目前腫瘤化學(xué)治療的一個(gè)研究的熱點(diǎn)。近年來， 通過修飾或?qū)⒆仙即及诓煌d體材料中制成不含聚氧乙烯蓖麻油的并能顯著提高紫杉醇溶解度，進(jìn)而提高藥物利用度同時(shí)降低藥物毒性的載藥納米粒的研究已成為當(dāng)前的熱點(diǎn)。聚乳酸做為被FDA批準(zhǔn)的生物相容性和可生物降解聚合物材料，被認(rèn)為是紫杉醇類藥物新劑型的優(yōu)良輔料，以聚乳酸(DL-PLA)包載紫杉醇已經(jīng)有較多的文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)。將緩釋型制劑直接注射到實(shí)體腫瘤內(nèi)，可以使腫瘤組織長(zhǎng)時(shí)間與高濃度的抗腫瘤藥接觸，既可實(shí)現(xiàn)腫瘤靶向治療，從而達(dá)到局部持久高濃度化療的目的，又提高了療效，從而增加了治療的安全性。由于微球體積極小，可以混懸液或粉劑的形式定位注射到作用部位，無需借助開放性手術(shù)植入，對(duì)周圍組織亦無損傷，并可根據(jù)需要重復(fù)給藥，因此比大型植入物更具優(yōu)勢(shì)。本專利技術(shù)選擇聚乳酸做為載體，采用納米沉淀法制備聚乳酸載紫杉醇的納米微球。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于克服上述現(xiàn)有紫杉醇注射劑的缺點(diǎn)，提出一種工藝簡(jiǎn)單、性能優(yōu)良的可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備方法。為實(shí)現(xiàn)上述實(shí)驗(yàn)?zāi)康模緦＠夹g(shù)通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)，具體步驟如下1)將8 9mg聚乳酸及1 2mg紫杉醇放置在小瓶中，用丙酮溶解，攪拌均勻待用；將1 2mg牛血清白蛋白加入到不斷攪拌下的IOml水中；2)取IOml去離子水放于25ml的燒杯中，放入較大的磁攪拌子，開動(dòng)攪拌并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使磁子轉(zhuǎn)動(dòng)平穩(wěn)不碰壁，并且液面呈非常好的紡錘形；3)用Iml的一次性注射器吸出步驟1的Iml丙酮溶液，一次注射到裝有牛血清白蛋白的水溶液的燒杯中，注射時(shí)要緩慢均勻，注射針頭應(yīng)該在液面以下；4)攪拌3小時(shí)后，直到丙酮全部揮發(fā)完全后，得到帶有乳光的懸濁液，冷凍干燥得到白色聚乳酸載藥納米粒粉末。在本專利技術(shù)中，以聚乳酸作為抗癌藥物紫杉醇的載體，以牛血清白蛋白作為表面活性劑，采用納米沉淀法制備納米載藥微球。由于受網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的調(diào)理作用，藥物被聚合物包載后往往改變了藥物在體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)行為。納米微粒可以制成緩釋制劑，改變藥物在體內(nèi)的半衰期，延長(zhǎng)藥物的作用時(shí)間；在保證藥效的前提下，減少用藥量，減輕或消除毒副作用。同時(shí)，以牛血清白蛋白(BSA)為外水相制備聚乳酸微粒，牛血清白蛋白可吸附于微球表面，從而易于被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)識(shí)別并被肝攝取。在本專利技術(shù)中，采用納米沉淀法制備的載藥微球在注射入后，微球可以局部持久釋放藥物，提高了療效。附圖說明圖1實(shí)施例1法制備的載藥微球的SEM圖；圖2實(shí)施例2法制備的載藥微球的SEM圖；圖3實(shí)施例3法制備的載藥微球的SEM圖；圖4實(shí)施例4法制備的載藥微球的SEM圖；圖5載藥微球的粒徑分布；圖6載藥微球的Zeta電位；圖7載藥納米微球的藥物累計(jì)釋放曲線；圖8載藥微球在大鼠體內(nèi)的熒光圖片；圖9納米載藥微球在大鼠體內(nèi)的代謝情況；圖 10 體內(nèi)滯留 2h(DAPIX200)；圖 11 體內(nèi)滯留 ld(DAPI X 200)；圖 12 體內(nèi)滯留 4d(DAPIX200)；圖 13 體內(nèi)滯留 6d(DAPIX200)；圖14 空白對(duì)照組(DAPI X 200)。具體實(shí)施例方式實(shí)施例1(1)、可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備1)準(zhǔn)確稱量8. Omg聚乳酸及2. Omg紫杉醇放置在小瓶中，用1.0ml丙酮溶解，攪拌均勻待用。將ImgBSA加入到不斷攪拌下的IOml水中；2)取10. Oml去離子水放于25ml的燒杯中，放入較大的磁攪拌子，開動(dòng)攪拌并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使磁子轉(zhuǎn)動(dòng)平穩(wěn)不碰壁，并且液面呈非常好的紡錘形；3)用Iml的一次性注射器吸出丙酮溶液，一次注射到燒杯中，注射時(shí)要緩慢均勻， 注射針頭應(yīng)該在液面以下；4)攪拌3小時(shí)后，直到丙酮全部揮發(fā)完全后，得到帶有乳光的懸濁液，冷凍干燥得到白色PLA載藥納米粒粉末。5)實(shí)施例1制得得納米載藥微球，凍干后觀察微球的掃描電鏡圖片，如圖1所示， 理論載藥率為20%，水相中BSA濃度為10%制備的納米微球呈不規(guī)則的圓球形，微球團(tuán)聚現(xiàn)象嚴(yán)重，微球的粒徑為IOOnm左右。實(shí)施例2 1)準(zhǔn)確稱量9. Omg聚乳酸1. Omg紫杉醇放置在小瓶中，用1. Oml丙酮溶解，攪拌均勻待用。將Img BSA加入到不斷攪拌下的IOml水中；2)取10. Oml去離子水放于25ml的燒杯中，放入較大的磁攪拌子，開動(dòng)攪拌并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使磁子轉(zhuǎn)動(dòng)平穩(wěn)不碰壁，并且液面呈非常好的紡錘形；3)用Iml的一次性注射器吸出丙酮溶液，一次注射到燒杯中，注射時(shí)要緩慢均勻， 注射針頭應(yīng)該在液面以下；4)攪拌3小時(shí)后，直到丙酮全部揮發(fā)完全后，得到帶有乳光的懸濁液，冷凍干燥得到白色PLA載藥納米粒粉末。5)實(shí)施例2制得得納米載藥微球，凍干后觀察微球的掃描電鏡圖片，如圖2所示， 理論載藥率為10%，水相中BSA濃度為10%制備的納米微球呈規(guī)則的圓球形，微球團(tuán)聚現(xiàn)象比較嚴(yán)重，微球的粒徑分布不均勻大概為50 200nm。實(shí)施例31)準(zhǔn)確稱量8. Omg聚乳酸及2. Omg紫杉醇放置在小瓶中，用1.0ml丙酮溶解，攪拌均勻待用。將2mg BSA加入到不斷攪拌下的IOml水中；2)取10. Oml去離子水放于25ml的燒杯中，放入較大的磁攪拌子，開動(dòng)攪拌并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使磁子轉(zhuǎn)動(dòng)平穩(wěn)不碰壁，并且液面呈非常好的紡錘形；3)用Iml的一次性注射器吸出丙酮溶液，一次注射到燒杯中，注射時(shí)要緩慢均勻， 注射針頭應(yīng)該在液面以下；4)攪拌3小時(shí)本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
１．一種可瘤腔內(nèi)定位注射載藥微球的制備方法，其特征在于：１）將８～９ｍｇ聚乳酸及１～２ｍｇ紫杉醇放置在小瓶中，用丙酮溶解，攪拌均勻待用；將１～２ｍｇ牛血清白蛋白加入到不斷攪拌下的１０ｍｌ水中；２）取１０ｍｌ去離子水放于２５ｍｌ的燒杯中，放入較大的磁攪拌子，開動(dòng)攪拌并調(diào)節(jié)轉(zhuǎn)速，使磁子轉(zhuǎn)動(dòng)平穩(wěn)不碰壁，并且液面呈非常好的紡錘形；３）用１ｍｌ的一次性注射器吸出步驟１的１ｍｌ丙酮溶液，一次注射到裝有牛血清白蛋白的水溶液的燒杯中，注射時(shí)要緩慢均勻，注射針頭應(yīng)該在液面以下；４）攪拌３小時(shí)后，直到丙酮全部揮發(fā)完全后，得到帶有乳光的懸濁液，冷凍干燥得到白色聚乳酸載藥微球。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：原續(xù)波，秦姚姚，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：天津大學(xué)，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：12