可用于將宏基因組文庫轉移至多種細菌物種中的基于RK2的廣宿主范圍克隆載體制造技術

本發明專利技術涉及用于在廣泛的細菌宿主范圍中克隆ＤＮＡ的克隆載體，該載體為自主復制人工染色體，其包含：（ｉ）ＲＫ２復制起點ｏｒｉＶ；（ｉｉ）ＲＫ２接合轉移起點ｏｒｉＴ；（ｉｉｉ）來自ＲＫ２的ｐａｒ　ＤＥ；（ｉｖ）克隆區；（ｖ）另一個復制起點，其允許該載體以不超過１或２的拷貝數進行復制；其中該載體的大小不超過１５ｋｂ，不含ＲＫ２的ｔｒｆＡ，并且能夠克隆至少１２ｋｂ的插入片段，其中該載體中的ＲＫ２　ＤＮＡ含量為不超過１０％的ＲＫ２。本發明專利技術還涉及含有所述克隆載體的宿主細胞和載體系統。提供了克隆ＤＮＡ和制備文庫的方法以及所述載體和ＲＫ２復制子在宏基因組克隆中的用途。

【技術實現步驟摘要】
【國外來華專利技術】

【技術保護點】
用于在廣宿主范圍的細菌中克隆ＤＮＡ的克隆載體，所述載體為自主復制人工染色體，其包含：　（ｉ）ＲＫ２復制起點ｏｒｉＶ；　（ｉｉ）ＲＫ２接合轉移起點ｏｒｉＴ；　（ｉｉｉ）來自ＲＫ２的ｐａｒ　ＤＥ；　（ｉｖ）克隆區域；　 　（ｖ）另一個復制起點，該復制起點使得所述載體以不超過１或２的拷貝數進行復制；　其中所述載體的大小不超過１５ｋｂ，不含有ＲＫ２的ｔｒｆＡ，并且能夠克隆至少１２ｋｂ的插入片段，其中所述載體中的ＲＫ２ＤＮＡ含量為不超過１０％的ＲＫ２。

【技術特征摘要】
【國外來華專利技術】...

【專利技術屬性】
技術研發人員：特里內奧奎克，克里斯廷弗勒格斯塔達格內斯，特龍埃爾林埃林森，蘭韋赫斯克雷德，斯韋恩瓦拉，
申請(專利權)人：森溫特股份有限公司，
類型：發明
國別省市：NO[挪威]