【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及炎性骨疾病治療，尤其涉及杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用。
技術介紹
1、隨著世界各地人口老齡化速度的加快，發生骨質疏松癥(osteoporosis，op)的頻率正在增加，特征是骨礦物質密度降低、骨脆性增加和骨折易感性上升。正常生理條件下，骨質疏松的形成與成骨細胞減少和破骨細胞生成增加有關。破骨細胞通過分泌酸和膠原溶解酶來協調骨吸收，而在具有骨質疏松表型的各種疾病中，過量的破骨細胞則會導致局限性骨缺陷，即骨的丟失。全身性骨丟失通常與慢性炎癥有關，慢性炎癥表現在類風濕性關節炎，腸炎和系統性紅斑狼瘡等各種疾病中。其中炎癥性腸病(inflammatorybowel?disease，ibd)與骨骼疾病密切相關，但其具體作用機制尚未得到充分研究。
2、炎癥性腸病包括潰瘍性結腸炎和克羅恩病。其中潰瘍性結腸炎(ulcerativecolitis，uc)以粘液膿性血便和腹痛為典型臨床癥狀。目前許多研究發現covid-19病毒的抗原粒子會長期存在于人的腸道中，造成腹痛、腹瀉等新冠后遺癥，而這些病毒也會激活腸道炎癥。大量炎性細胞浸潤腸道黏膜層會導致腸粘膜屏障的損傷，腸道菌群紊亂，免疫功能紊亂，進而引起嚴重的炎癥反應。同時，腸道的長期炎癥狀態也會增加患骨質疏松的風險，并且在許多臨床研究中，腸道微生物群已被證明對骨的數量、質量和整體強度具有深遠的影響。
3、臨床上，目前潰瘍性結腸炎的治療藥物主要有5-氨基水楊酸類、糖皮質激素等。這些藥物雖然能暫時控制癥狀，但長期療效并不理想，且副作用較多。而
4、中藥通過調節機體狀態，提高免疫力，阻斷病情發展，可以減少發病或者預防疾病。許多研究表明，中藥可通過發揮抗炎、抗氧化作用、調節機體免疫反應進而抑制炎癥性腸病以及骨質疏松的發生發展。杜鵑花屬是維管植物中最大的屬之一，主要功效為治療炎癥、疼痛、普通感冒和胃腸疾病。其主要活性成分杜鵑素(杜鵑素rrerol，杜鵑素)，是一種2，3-二氫類黃酮化合物，現代藥理學研究表明杜鵑素具有抗炎，抗氧化和抗癌作用。然而，尚不清楚杜鵑素在潰瘍性結腸炎期間是否會影響破骨細胞生成以及骨量變化。
5、鑒于此，本專利技術提供一種杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用，用以解決上述問題。
技術實現思路
1、本專利技術的目的在于提供杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用，解決
技術介紹
中提到的技術問題。
2、為了實現上述目的，本專利技術采用的技術方案如下：
3、杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用。
4、為了探究杜鵑素在uc小鼠體內是否預防骨丟失，本專利技術將小鼠分為對照組，uc組和加藥組。首先杜鵑素處理后改善了uc小鼠結腸長度且對器官無明顯毒性作用。其次ct和染色結果表明杜鵑素改善了腸炎導致的骨丟失。同時我們進行了血清學檢測及組化染色實驗，結果發現uc小鼠經過杜鵑素處理后骨吸收指標、破骨細胞數量和特異性蛋白表達均下降。為了檢測小鼠腸道菌群的變化，我們用小鼠糞便進行16srna測序。結果表明杜鵑素處理后改善了腸道菌群的種類和豐度并且增加了有益菌的數量并改善了腸炎導致的腸道菌群紊亂。同時我們檢測了小鼠血清水平中的短鏈脂肪酸和炎癥指標，結果表明杜鵑素處理后降低了炎癥因子水平，升高了短鏈脂肪酸含量。免疫組化染色表明杜鵑素修復了腸道完整性。接著我們提取了uc小鼠和加藥組小鼠體內bmms細胞誘導破骨細胞，接著進行rna測序。結果顯示差異基因參與了炎癥反應和破骨細胞分化的調控。此外在杜鵑素治療后pi3k-akt，mapk等多條通路被顯著抑制，破骨細胞相關基因和炎癥相關基因都得以下降，表明杜鵑素可能參與抑制炎癥引起的破骨細胞的生成。
5、為了體外驗證，通過lps模擬體內腸炎環境，杜鵑素對rankl和lps誘導的破骨細胞生成，f-actin環的形成和骨吸收具有抑制作用；并通過wb和pcr實驗檢測涉及破骨細胞分化的pi3k-akt和mapk信號通路闡明了基本分子機制。
6、經過大量實驗，結果表明：杜鵑素通過改善炎癥因子表達以及恢復腸道菌群組成改善了腸炎導致的骨丟失并抑制了破骨細胞活性。體外實驗顯示杜鵑素可以有效抑制rankl和lps誘導的破骨細胞形成，減少骨吸收和f-actin環的形成和破骨細胞標記性基因的表達；進一步發現了杜鵑素是通過介導pi3k-akt和mapk信號通路來抑制破骨細胞的生成。
7、因此，杜鵑素是預防炎癥性腸病引起骨質疏松性疾病非常有前途的藥物。
8、本專利技術發現：在uc小鼠體內方面，杜鵑素顯著增加了股骨骨小梁的體積分數和骨小梁數量，減少了血清中ctx-1和tracp5b的含量并增加了pinp的含量。由此可見，杜鵑素顯著抑制破骨細胞數量和活性從而保護骨丟失。并且杜鵑素改善了小鼠體內的炎癥環境，使得腸道有益菌群的種類和數量增加，修復了腸道屏障。
9、此外在對破骨細胞的生物學行為上，杜鵑素抑制rankl和lps誘導的破骨細胞生成，并且顯示出對bmms的細胞活性無毒性作用。在功能上，杜鵑素可抑制破骨細胞相關基因的表達，同時具有減弱破骨細胞肌動蛋白環形成和吸收骨質的能力。在抑制破骨細胞生成的機制上，d杜鵑素乙抑制了細胞內轉錄因子n杜鵑素tc1的表達。同時，杜鵑素通過抑制rankl和lps介導的破骨細胞形成和骨吸收相關蛋白表達，從而抑制破骨細胞。并且杜鵑素抑制了pi3k-akt信號通路中的pi3k和akt蛋白磷酸化；減少了mapk信號通路中的jnk、erk和p38蛋白的磷酸化水平。此外，杜鵑素可通過抑制il6，il10，il17和tnf-α的表達以減少炎癥。
10、綜上所述，杜鵑素通過抑制rankl和lps介導pi3k-akt和mapk信號通路減少細胞內轉錄因子n杜鵑素tc1的表達進而抑制破骨細胞生成和骨吸收功能。杜鵑素可以通過抑制炎癥因子表達從而有效保護uc小鼠骨量丟失。
11、杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用實驗方法，具體過程為：細胞培養，細胞活力測定實驗，破骨細胞分化實驗和trap染色，骨吸收功能實驗，f-actin環形成的測定，rna提取和定量pcr測定，蛋白質印跡分析，模型構建和數據統計分析。
12、本專利技術由于采用了上述技術方案，具有以下有益效果：
13、本專利技術杜鵑素可以改善腸炎導致的骨丟失，恢復腸道菌群組成，修復腸道屏障，杜鵑素可以有效抑制rankl和lps誘導的炎性破骨細胞形成，減少骨吸收和f-actin環的形成和破骨細胞標記性基因的表達，杜鵑素通過抑制pi3k-akt和mapk信號通路來抑制炎性破骨細胞的生成。
本文檔來自技高網...【技術保護點】
1.杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用。
2.杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用實驗方法，其特征在于：具體過程為：細胞培養，細胞活力測定實驗，破骨細胞分化實驗和TRAP染色，骨吸收功能實驗，F-actin環形成的測定，RNA提取和定量PCR測定，蛋白質印跡分析，模型構建和數據統計分析。
【技術特征摘要】
1.杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用。
2.杜鵑素在制備預防炎癥性腸病引起的骨質疏松性疾病藥物的應用實驗方法，其特征在于：具體過程為：細...
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉倩，蘇元港，殷寧潞，趙勁民，
申請(專利權)人：廣西醫科大學，
類型：發明
國別省市：
還沒有人留言評論。發表了對其他瀏覽者有用的留言會獲得科技券。