免疫7P截短肽及其應(yīng)用制造技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及丙型肝炎病毒免疫原性肽７Ｐ的截短肽及其用于預(yù)防或治療肝損傷的應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)還涉及含有該肽的藥物組合物、制備方法以及藥物應(yīng)用。

Immune 7P truncated peptide and its application

The present invention relates to truncated peptides of hepatitis C virus immunogenic peptide 7P and their use in the prevention or treatment of liver injury. The invention also relates to a pharmaceutical composition containing the peptide, a preparation method and a drug application.

【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及丙型肝炎病毒免疫原性肽7P的截短肽及用其預(yù)防或治療肝損 傷的方法。本專利技術(shù)還涉及含有該肽的藥物組合物、制備方法以及藥物應(yīng)用。
技術(shù)介紹
序列為GQTYTSG的肽(本文中簡稱為7P)是一種最初根據(jù)丙型肝炎病毒 而設(shè)計(jì)的免疫原性肽，本專利技術(shù)人在中國專禾UCN1194986C和CN1216075C中披 露了用作丙型肝炎病毒免疫原性肽的7P及其衍生物。另外，在PCT申請 WO/2007/137456中，本專利技術(shù)人也發(fā)現(xiàn)了7P及其衍生物還能用于預(yù)防和治療肝 損傷的應(yīng)用，尤其能預(yù)防或治療免疫性肝損傷和肝毒性化學(xué)物質(zhì)引起的肝損 傷。然而，其中沒有提示對肝損傷起預(yù)防和治療作用的關(guān)鍵部分。經(jīng)過本專利技術(shù)人研究，發(fā)現(xiàn)包含TYT的部分是在肝損傷起預(yù)防和治療作用 中起著比較關(guān)鍵的作用，因此開發(fā)出一系列7P截短肽，它們不但具有預(yù)防和 治療肝損傷的作用，而且由于分子減小，降低了生產(chǎn)成本。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的在于提供的具有預(yù)防和/或治療肝損傷功能的肽及其藥物用 途，并且提供含有所述肽的藥物組合物和制備所述肽的方法。具體而言，在第一方面，本專利技術(shù)提供了寡肽或或其藥學(xué)上可接受的鹽或 酯，所述寡肽選自下述的寡肽(1)和(2)以及所述寡肽(1)或(2)的修飾肽，(1) 由如下氨基酸序列表示的寡肽GQTYTS (簡稱為P1)、 QTYTSG (簡稱為P2)、 GQTYT (簡稱為P3)、 QTYTS (簡稱為P4)、 QTYT (簡稱為P5)、 TYTS (簡稱為P6)、或TYT (簡 稱為P7);(2) 在(l)中寡肽的氨基酸序列中缺少、取代和/或插入一個或幾個氨基酸 的而得的寡肽，其具有預(yù)防和/或治療肝損傷的作用；其中，所述修飾肽具有和上述寡肽(l)和(2)同樣的預(yù)防和/或治療肝損傷的作用。本文中稱的肝損傷指的是肝臟組織或細(xì)胞出現(xiàn)的損傷或病變。在本專利技術(shù) 的具體實(shí)施方式中，肝損傷優(yōu)選是急性免疫性肝損傷、半乳糖胺和福氏完全佐劑誘導(dǎo)的慢性免疫性肝損傷、和血清誘導(dǎo)的慢性免疫性肝損傷。肝損傷可通過病理現(xiàn)象來評估，也可通過血清中谷丙轉(zhuǎn)氨酶或谷草轉(zhuǎn)氨酶水平的升高來 反映。肝損傷優(yōu)選是急性肝損傷。在本專利技術(shù)的具體實(shí)施方式中，所述肝損傷 是D-氨基半乳糖胺誘導(dǎo)的急性肝損傷。藥學(xué)上可接受的鹽或酯在本文中指適于與人或動物的組織接觸而且無 過多的毒性、刺激或變態(tài)反應(yīng)等的鹽或酯。本專利技術(shù)第一方面所述的寡肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯優(yōu)選在7P肽的基 礎(chǔ)上截短，如在7P肽的C端去掉1個或2個氨基酸殘基后得到的寡肽，或在 7P肽的N端去掉1個或2個氨基酸殘基后得到的寡肽。更優(yōu)選本專利技術(shù)第一方 面所述的寡肽的氨基酸序列包括TYT。更加優(yōu)選本專利技術(shù)第一方面所述的寡肽 是向心截短7P肽后得到的寡肽，即在7P肽的C端和N端同時去掉1個或2 個氨基酸殘基后得到的寡肽。在本專利技術(shù)的具體實(shí)施方式中，所述寡肽的氨基 酸序列選自GQTYTS、 QTYTSG、 GQTYT、 QTYTS、 QTYT、 TYTS、或TYT。在本專利技術(shù)第一方面的范圍內(nèi)，所述寡肽還包括在上述氨基酸序列中缺少、 取代和/或插入一個或幾個氨基酸的而得的寡肽，而且該寡肽具有預(yù)防和/或治 療肝損傷的作用。通過本說明書的實(shí)施例上詳細(xì)而具體敘述的試驗(yàn)方法、或 者由對上述試驗(yàn)方法做適當(dāng)改變或修飾的方法，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員能夠 確定出這些肽。在上述缺少、取代和/或插入一個或幾個氨基酸的而得的寡肽中，取代和/或插入的氨基酸優(yōu)選是L-氨基酸；取代和/或插入的氨基酸的優(yōu)選是1 5個，更優(yōu)選1 3個，最優(yōu)選1 2個。在本專利技術(shù)第一方面的范圍內(nèi)，所述寡肽還包括上述寡肽的修飾肽。其中， 修飾包括化學(xué)修飾和生物學(xué)修飾，如烷基化、酯化、鹵化或氨基化等官能團(tuán) 引入，或者由氧化、還原、加成或者去除官能團(tuán)，引入糖化合物(單糖、二糖、 低聚糖或多糖)或者類脂化合物，磷酸化或生物素化，與蛋白質(zhì)或其他高分子 化合物(如，聚乙二醇)綴合化等。在第二方^，本專利技術(shù)提供了藥物組合物，包括本專利技術(shù)第一方面所述的寡 肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯和藥學(xué)上可接受的載體。優(yōu)選該藥物組合物用 于預(yù)防和/或治療肝損傷。本文所稱的藥學(xué)上可接受的載體指無毒固態(tài)、半 固態(tài)或液態(tài)填充劑、稀釋劑、佐劑、包裹材料或其他制劑輔料。所用載體可 與相應(yīng)的給藥形式相適應(yīng)，可使用本領(lǐng)域技術(shù)人員所知曉的載體配成注射劑、 凍干粉、噴霧劑、口服溶液、口服混懸液、片劑、膠囊、腸溶片、丸劑、粉 劑、顆粒劑、持續(xù)釋放或延遲釋釋放等劑型。在第三方面，本專利技術(shù)提供了本專利技術(shù)第一方面所述的寡肽或其藥學(xué)上可接 受的鹽或酯的藥物應(yīng)用。對于制藥方面，本專利技術(shù)提供了本專利技術(shù)第一方面所述 的寡肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯在制備用于預(yù)防和/或治療肝損傷的藥物中 的應(yīng)用；對于治療方面，本專利技術(shù)提供了預(yù)防和/或治療肝損傷的方法，其包括 向受試者給藥有效量的本專利技術(shù)第一方面所述的寡肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或 酷。本文所稱的受試者指哺乳動物，尤其是人。根據(jù)的本領(lǐng)域普通技術(shù)人員 所公知的實(shí)驗(yàn)動物與人的等效劑量換算關(guān)系(通常可參見FDA、 SFDA等藥品管理機(jī)構(gòu)的指導(dǎo)意見，也可參見黃繼漢等.藥理試驗(yàn)中動物間和動物與人體間的等效劑量換算.中國臨床藥理學(xué)與治療學(xué)，2004 Sep ;9(9) :1069 - 1072)可從實(shí)驗(yàn)動物的劑量推導(dǎo)出人的有效劑量。如未特別指出，本文中的有效量 指人的有效劑量。具體而言，根據(jù)本專利技術(shù)的具體實(shí)施方式，換算出的人的有 效量，對于注射給藥，其有效量為10 20^ig/Kg體重。在第四方面，本專利技術(shù)提供了合成本專利技術(shù)第一方面所述的寡肽的方法。本 專利技術(shù)的寡肽可以用在肽合成中常用的固相法或液相法等化學(xué)方法合成，可根 據(jù)需要可以通過官能團(tuán)的保護(hù)以及去保護(hù)有效地進(jìn)行合成。在肽合成中使用 的氨基等保護(hù)基團(tuán)以及縮合反應(yīng)的縮合劑等都有現(xiàn)有技術(shù)可供選擇，并有市 售的合成裝置和試劑，如在固相法中可以利用各種市售的肽合成裝置。另外， 通過生物學(xué)方法也可以制備上述寡肽或其前體。例如，制備編碼含有上述寡 肽的肽的DNA序列，導(dǎo)入重組載體，轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主，通過培養(yǎng)表達(dá)宿主來分 離和提純出所希望的寡肽或其前體。為了便于理解，以下將通過具體的附圖和實(shí)施例對本專利技術(shù)進(jìn)行詳細(xì)地描 述。需要特別指出的是，具體實(shí)例和附圖僅是為了說明，并不構(gòu)成對本專利技術(shù) 范圍的限制。顯然本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員可以根據(jù)本文說明，在本專利技術(shù)的范 圍內(nèi)對本專利技術(shù)做出各種各樣的修正和改變，這些修正和改變也納入本專利技術(shù)的 范圍內(nèi)。另外，本專利技術(shù)引用了公開文獻(xiàn)，這些文獻(xiàn)也是為了更清楚地描述本 專利技術(shù)，它們的全文內(nèi)容均納入本專利技術(shù)進(jìn)行參考，就好像它們的全文已經(jīng)在本 專利技術(shù)說明書中重復(fù)敘述過一樣。附圖說明圖1.不同7P截短肽對大鼠半乳糖胺肝損傷血清谷丙轉(zhuǎn)氨酶活性的影響，其 中**表示所示組相對于模型組能夠非常顯著降低轉(zhuǎn)氨酶水平，*表示所示組相 對于模型組能夠顯著降低轉(zhuǎn)氨酶水平。圖2.不同7P截短肽對大鼠半乳糖胺肝損傷血清谷草轉(zhuǎn)氨酶活性的影響， 其中**表示所示組相對于模型組能夠非常顯著降低轉(zhuǎn)氨酶水平，*表示所示組 相對于模型組能夠顯著降低轉(zhuǎn)氨酶水平。圖3.不同7P截短肽對大鼠半乳糖胺肝損傷病理學(xué)評分的影響，其中**表 示所示組相對于模型組能夠非常顯著降低病理學(xué)評分，*表示所示組相對于模 型組能夠顯著降低病理學(xué)評分。具體實(shí)施例本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
寡肽或或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，所述寡肽選自下述的寡肽（１）和（２）以及所述寡肽（１）或（２）的修飾肽，　（１）由如下氨基酸序列表示的寡肽：　ＧＱＴＹＴＳ（簡稱為Ｐ１）、ＱＴＹＴＳＧ（簡稱為Ｐ２）、ＧＱＴＹＴ（簡稱為Ｐ３）、ＱＴ ＹＴＳ（簡稱為Ｐ４）、ＱＴＹＴ（簡稱為Ｐ５）、ＴＹＴＳ（簡稱為Ｐ６）、或ＴＹＴ（簡稱為Ｐ７）；　（２）在（１）中寡肽的氨基酸序列中缺少、取代和／或插入一個或幾個氨基酸的而得的寡肽，其具有預(yù)防和／或治療肝損傷的作用；　其中，所述修 飾肽具有和上述寡肽（１）和（２）同樣的預(yù)防和／或治療肝損傷的作用。

【技術(shù)特征摘要】
1.寡肽或或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，所述寡肽選自下述的寡肽(1)和(2)以及所述寡肽(1)或(2)的修飾肽，(1)由如下氨基酸序列表示的寡肽GQTYTS(簡稱為P1)、QTYTSG(簡稱為P2)、GQTYT(簡稱為P3)、QTYTS(簡稱為P4)、QTYT(簡稱為P5)、TYTS(簡稱為P6)、或TYT(簡稱為P7)；(2)在(1)中寡肽的氨基酸序列中缺少、取代和/或插入一個或幾個氨基酸的而得的寡肽，其具有預(yù)防和/或治療肝損傷的作用；其中，所述修飾肽具有和上述寡肽(1)和(2)同樣的預(yù)防和/或治療肝損傷的作用。2. 權(quán)利要求1所述的寡肽或其藥學(xué)上可接受的鹽或酯，所述寡肽的氨基 酸序列包括TYT。3. 權(quán)利要求1或2所述的寡肽或其...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：程云，虞瑞鶴，趙萬洲，趙軍，郭仁鋒，
申請(專利權(quán))人：程云，虞瑞鶴，
類型：發(fā)明
國別省市：11[中國|北京]