本發明專利技術屬于醫藥技術領域，提供了一種中草藥過山蕨有效成分及其提取方法和用途。該提取方法包括水提法、醇提法、大孔樹脂純化法、溶劑萃取法。經該方法所得的提取物主要有效成分為總黃酮、總皂苷、總有機酸，其含量分別為總黃酮１％－３５％，總皂苷１％－２５％，總酚酸１％－３％。本發明專利技術還提供了過山蕨直接或與藥學上通常用于該類制劑的固體或液體混合制成適宜劑型的方法，過山蕨有效成分及其制劑具有治療血栓閉塞性脈管炎，腎炎，外傷出血，子宮出血，神經性皮炎，腦栓塞引起的偏癱以及糖尿病并發癥的作用。該提取方法簡單易行、成本低，所得提取物無毒副作用。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術屬于醫藥
，涉及中草藥過山蕨的有效成分提取方法和用途，以及過山蕨有效成分制劑的生產加工方法。
技術介紹
過山蕨(C卿f,潔"》/r/面R叩r.)，又名馬蹬草，還卩曰草，過橋草，為鐵角蕨科，過山蕨屬多年生草本植物。本屬全世界共兩種，中國產一種。過山蕨是一種傳統草藥，民間用于治療外傷出血，子宮出血，血栓閉塞性脈管炎，腎炎，神經性皮炎，腦栓塞引起的偏癱以及糖尿病并發癥等，具有確切療效。實驗表明，該草藥毒性很小，對血壓無明顯影響，長期給藥對家兔肝功能未見不良影響。其有效成分的提取及利用其有效成分生產加工成制劑未有報道。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供過山蕨有效成分的提取方法，以及利用其有效成分生產加工數種制劑，將其作為治療血栓閉塞性脈管炎，腎炎，外傷出血，子.宮出血，神經性皮炎，腦栓塞引起的偏癱以及糖尿病并發癥的藥物。過山蕨有效成分組成如下Compd,1 H CH2CH GlcCompd2 Gto CH2OH GlcC加pd.3 Glc CHpH GJc2-1 GlcCompcM H CH20"GIC GlcCompU.5 Glc CH20"Glc GlcCompd.6 GfcwGlc CH20H Glc2-"vlCompd.7 GIC"MGtewAra CH2OH GlcCompil.8 GlCwGlca^Gal CH2OH GIc2-1GlcCompd.9 GlcCH3 GlcCampd.10 Gk^GIcCH3 GlcCompd." GlcCH20(6"CoumsTOyl) Glcz.，G'cGlc / "D"glLJcopyranoskteAra ct-L-arabinopyranosideR2Conrvd.22 OHCompd.23 OHCompd.24 OCH3Compd.26 OHR3HHCompd.14Compd.15Gompd.16Compd.17Compd.18Compd.19 Glc^GIc (6"Caffeoyl)Compd.21 GIC2-，Glc (6切umaroy0本專利技術是是通過如下方案實現的所述過山蕨有效成分的制備方法分四種方法l:取原藥材去雜后，加15至30倍量水煎煮不少于兩次，每次提 取時間不少于1小時，提取液濃縮至藥液體積的五分之一至二十分之一， 在0-10'C下低溫靜置6-24小時至沉淀完全，除去沉淀，取上清液加乙醇沉 淀l-2次，控制提取液中乙醇濃度在50%-90%,在0-1(TC下低溫靜置12-48 小時至沉淀完全，再次過濾，濾液回收乙醇至無醇味，所得上清液經大孔 樹脂(HPD100或DIOI)進行分離純化，分別以水，5%-30%乙醇，30%-60°/ 乙醇，60%-95%乙醇洗脫，5%-30%乙醇洗脫物為有效成分組1， 30%-60%乙醇 洗脫物為有效成分組2, 60%-95%乙醇洗脫物為有效成分組3,三者按折合 生藥材量l: 1: 1組合為過山蕨有效提取物。方法2:取原藥材去雜后，加15至30倍量的5%-95%的乙醇煎煮不少于兩次，每次提取時間不少于1小時，提取液濃縮至藥液體積的五分之一 至二十分之一，在0-l(TC下低溫靜置12-24小時至沉淀完全，除去沉淀， 所得上清液經大孔樹脂(HPD 100或D101 )進行分離純化，分別以水，5%-30% 乙醇，30%-60%乙醇,60%-95%乙醇洗脫，5%-30%乙醇洗脫物為有效成分組1， 30%-60%乙醇洗脫物為有效成分組2， 60%-95%乙醇洗脫物為有效成分組3，三者按折合生藥材量l: 1: l組合為過山蕨有效提取物。方法3:取原藥材去雜后，加15至30倍量的5%-95%的乙醇煎煮不少 于兩次，每次提取時間不少于1小時，提取液濃縮至藥液體積的五分之一 至二十分之一，在O-l(TC下低溫靜置12-24小時至沉淀完全，除去沉淀， 取上清液分別用石油醚(或環己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取兩次 以上至萃取完全。回收溶媒，所得正丁醇萃取層經大孔樹脂(HPD 100或 D101)純化，分別以水，5%-95%乙醇，乙醇洗脫，5%-95%乙醇洗脫物為有 效成分組分l,乙酸乙酯萃取層為有效成分組2, 二者按折合生藥材量l: 1 組合為過山蕨有效提取物。方法4:取原藥材去雜后，加15至30倍量水煎煮不少于兩次，每次提 取時間不少于1小時，提取液濃縮至藥液體積的五分之一至二十分之一， 在0-1(TC下低溫靜置6-24小時至沉淀完全，除去沉淀，取上清液分別用石 油醚(或環己烷、正己烷)、乙酸乙酯、正丁醇萃取兩次以上至萃取完全。 回收溶媒，所得正丁醇萃取層經大孔樹脂純化，分別以水，5%-95%乙醇， 乙醇洗脫，5%-95%乙醇洗脫物為有效成分組分1，乙酸乙酯萃取層為有效成 分組2， 二者按折合生藥材量l: l組合為過山蕨有效提取物。所得過山蕨有效成分提取物中，總黃酮含量為1%-35%,總皂苷含量為 "/「25%,總酚酸含量為1%-3%。由上述方法可見，過山蕨有效成分提取物由總黃酮、總皂苷和總酚酸 組成，可通過上述四種方法制備，可簡述為方法一水提-水沉-醇沉-大孔 樹脂分段純化；方法二醇提-水沉-大孔樹脂分段純化；方法三醇提-溶 劑分段萃取-大孔樹脂純化；方法四水提-溶劑分段萃取-大孔樹脂純化。本專利技術所述提取物具有抗氧化、清除自由基、醛糖還原酶抑制、擴張血 管等活性，可用于治療血栓閉塞性脈管炎、糖尿病性腎炎、外傷出血等癥的治療。利用本專利技術獲得的過山蕨有效成分提取物中的部分單體化合物具 有顯著的抗氧化、清除自由基、醛糖還原酶抑制的活性。 本專利技術的優點如下(1) 本制備方法所得過山蕨提取物成分明確，其中化合物卜12, 19-21 為過山蕨特有成分，質量可控性強。(2) 本專利技術所得過山蕨有效成分提取物由三種不同類型天然產物組成，具有多靶點協同作用且毒副作用低的優點。(3) 制備方法簡便、易行，提取充分，適宜于工業生產(4) 過山蕨有效成分提取物活性顯著，療效確切，可有效降低中藥服 用量。附圖說明圖1為部分單體化合物類S0D活性測試結果*: IC50<10 uM 圖2為部分單體化合物自由基清除活性測試結果*: IC50〈15uM 圖3為部分單體化合物醛糖還原酶抑制活性測試結果 *: IC50〈50uM 具體實施例方式實施例1按照有效成分制備方法1(1) 取干燥過山蕨全草10kg,去除雜質、灰塵(2) 在中藥提取罐中加入藥材和18倍量的水，加熱煮沸，提取兩次， 每次2小時。(3) 合并兩次提取液，濃縮至20L,在4'C下低溫靜置24小時至沉淀 完全，除去沉淀。(4) 取上清液加入乙醇，調節醇濃度至50 / ，在10。C下低溫靜置24小 時至沉淀完全，再次過濾，濾液回收乙醇至無醇味。(5 )上清液上樣至非極性大孔樹脂柱，分別用水(8VR )、 20%乙醇(4VR)、 60%乙醇(4VJ、 90%乙醇(4Vb)梯度洗脫，得水洗物棄去，20%乙 醇洗脫物、60%乙醇洗脫物、90%乙醇洗脫物按照折合生藥量1: 1: 1比例混合，得過山蕨有效提取物，其中總黃酮含量為30%,總皂 苷含量為20%,總酚酸含量為1%。實施例2按照有效成分制備方法2(1) 取干燥過山蕨全草5kg，去除雜質、灰塵(2) 在中本文檔來自技高網...
【技術保護點】
過山蕨有效成分，其特征在于：包括山柰酚型黃酮苷類、環阿爾廷型三萜皂苷類、小分子酚酸類；該有效成分的結構式為： ＊＊＊。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：李寧，李銑，張鵬，馬忠俊，
申請(專利權)人：沈陽藥科大學，
類型：發明
國別省市：89[中國|沈陽]
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