一種新的多肽——人核糖體蛋白L14.22和編碼這種多肽的多核苷酸制造技術

本發明專利技術公開了一種新的多肽－人核糖體蛋白Ｌ１４．２２，編碼此多肽的多核苷酸和經ＤＮＡ重組技術產生這種多肽的方法。本發明專利技術還公開了此多肽用于治療多種疾病的方法，如惡性腫瘤，血液病，ＨＩＶ感染和免疫性疾病和各類炎癥等。本發明專利技術還公開了抗此多肽的拮抗劑及其治療作用。本發明專利技術還公開了編碼這種新的人核糖體蛋白Ｌ１４．２２的多核苷酸的用途。（*該技術在2019年保護過期，可自由使用*）

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于生物
，具體地說，本專利技術描述了一種新的多肽--人核糖體蛋白L14.22，以及編碼此多肽的多核苷酸序列。本專利技術還涉及此多核苷酸和多肽的制備方法和應用。核糖體是合成蛋白質的細胞器，主要成分是蛋白質與核糖體RNA。核糖體蛋白十分保守，在核糖體的翻譯過程中起重要作用，例如對rRNA折疊成有功能的三維結構起重要作用；在蛋白質合成中，核糖體的空間構象發生一系列的變化，某些核糖體蛋白可能對核糖體的構象起“微調”作用；在核糖體的結合位點上甚至可能在催化作用中，核糖體蛋白與rRNA共同行使功能。另一些研究還發現，某些核糖體蛋白還是細胞增殖和凋亡的調控因子。L14蛋白是一種最保守的核糖體蛋白，在核糖體核酸-蛋白復合物中起著重要的作用。研究表明在核糖體大亞基中，L14蛋白占據著肽酰轉移酶和GTP酶的中心位置。L14蛋白含有一個由5股組成的桶狀結構，C末端環狀結構包括兩個小的螺旋結構，還包括一個從桶狀結構中伸出的帶狀結構。RNA與L14的兩個部分結合。一個RNA結合位點在核糖體顆粒組裝的時候識別核糖體RNA的遠端。第二個RNA結合位點在之后的RNA緊縮時被占據。L14表面的疏水部分可能是蛋白-蛋白相互作用的位點，例如與L19蛋白。核糖體蛋白的缺失或不恰當的化學修飾，或核糖體蛋白的基因發生突變，都將影響核糖體的功能，降低多肽合成的活性，從而導致各種嚴重的后果，例如細胞膜結構不能維持、細胞代謝失常、細胞表面抗體減少、細胞生長停頓甚至死亡等等，由此引發各種疾病，例如發育紊亂、代謝疾病、免疫疾病、細胞死亡等等。本專利技術與在果蠅中發現的L14蛋白在蛋白水平上有27％的同源性，故認為本專利技術的基因為一編碼與L14蛋白相似的基因，并具有類似的生物學功能。本專利技術命名為人核糖體蛋白L23。由于如上所述人核糖體蛋白L14.22蛋白在調節細胞分裂和胚胎發育等機體重要功能中起重要作用，而且相信這些調節過程中涉及大量的蛋白，因而本領域中一直需要鑒定更多參與這些過程的人核糖體蛋白L14.22蛋白，特別是鑒定這種蛋白的氨基酸序列。新人核糖體蛋白L14.22蛋白編碼基因的分離也為研究確定該蛋白在健康和疾病狀態下的作用提供了基礎。這種蛋白可能構成開發疾病診斷和/或治療藥的基礎，因此分離其編碼DNA是非常重要的。本專利技術的一個目的是提供分離的新的多肽--人核糖體蛋白L14.22以及其片段、類似物和衍生物。本專利技術的另一個目的是提供編碼該多肽的多核苷酸。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人核糖體蛋白L14.22的多核苷酸的重組載體。本專利技術的另一個目的是提供含有編碼人核糖體蛋白L14.22的多核苷酸的基因工程化宿主細胞。本專利技術的另一個目的是提供生產人核糖體蛋白L14.22的方法。本專利技術的另一個目的是提供針對本專利技術的多肽--人核糖體蛋白L14.22的抗體。本專利技術的另一個目的是提供了針對本專利技術多肽--人核糖體蛋白L14.22的模擬化合物、拮抗劑、激動劑、抑制劑。本專利技術的另一個目的是提供診斷治療與人核糖體蛋白L14.22異常相關的疾病的方法。本專利技術涉及一種分離的多肽，該多肽是人源的，它包含具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽、或其保守性變體、生物活性片段或衍生物。較佳地，該多肽是具有SEQ ID NO:2氨基酸序列的多肽。本專利技術還涉及一種分離的多核苷酸，它包含選自下組的一種核苷酸序列或其變體(a)編碼具有SEQ ID No.2氨基酸序列的多肽的多核苷酸；(b)與多核苷酸(a)互補的多核苷酸；(c)與(a)或(b)的多核苷酸序列具有至少70％相同性的多核苷酸。更佳地，該多核苷酸的序列是選自下組的一種(a)具有SEQ ID NO:1中413-1024位的序列；和(b)具有SEQ ID NO:1中1-2002位的序列。本專利技術另外涉及一種含有本專利技術多核苷酸的載體，特別是表達載體；一種用該載體遺傳工程化的宿主細胞，包括轉化、轉導或轉染的宿主細胞；一種包括培養所述宿主細胞和回收表達產物的制備本專利技術多肽的方法。本專利技術還涉及一種能與本專利技術多肽特異性結合的抗體。本專利技術還涉及一種篩選的模擬、激活、拮抗或抑制人核糖體蛋白L14.22蛋白活性的化合物的方法，其包括利用本專利技術的多肽。本專利技術還涉及用該方法獲得的化合物。本專利技術還涉及一種體外檢測與人核糖體蛋白L14.22蛋白異常表達相關的疾病或疾病易感性的方法，包括檢測生物樣品中所述多肽或其編碼多核苷酸序列中的突變，或者檢測生物樣品中本專利技術多肽的量或生物活性。本專利技術也涉及一種藥物組合物，它含有本專利技術多肽或其模擬物、激活劑、拮抗劑或抑制劑以及藥學上可接受的載體。本專利技術還涉及本專利技術的多肽和/或多核苷酸在制備用于治療癌癥、發育性疾病或免疫性疾病或其它由于人核糖體蛋白L14.22表達異常所引起疾病的藥物的用途。本專利技術的其它方面由于本文的技術的公開，對本領域的技術人員而言是顯而易見的。本說明書和權利要求書中使用的下列術語除非特別說明具有如下的含義“核酸序列”是指寡核苷酸、核苷酸或多核苷酸及其片段或部分，也可以指基因組或合成的DNA或RNA，它們可以是單鏈或雙鏈的，代表有義鏈或反義鏈。類似地，術語“氨基酸序列”是指寡肽、肽、多肽或蛋白質序列及其片段或部分。當本專利技術中的“氨基酸序列”涉及一種天然存在的蛋白質分子的氨基酸序列時，這種“多肽”或“蛋白質”不意味著將氨基酸序列限制為與所述蛋白質分子相關的完整的天然氨基酸。蛋白質或多核苷酸“變體”是指一種具有一個或多個氨基酸或核苷酸改變的氨基酸序列或編碼它的多核苷酸序列。所述改變可包括氨基酸序列或核苷酸序列中氨基酸或核苷酸的缺失、插入或替換。變體可具有“保守性”改變，其中替換的氨基酸具有與原氨基酸相類似的結構或化學性質，如用亮氨酸替換異亮氨酸。變體也可具有非保守性改變，如用色氨酸替換甘氨酸。“缺失”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中一個或多個氨基酸或核苷酸的缺失。“插入”或“添加”是指在氨基酸序列或核苷酸序列中的改變導致與天然存在的分子相比，一個或多個氨基酸或核苷酸的增加。“替換”是指由不同的氨基酸或核苷酸替換一個或多個氨基酸或核苷酸。“生物活性”是指具有天然分子的結構、調控或生物化學功能的蛋白質。類似地，術語“免疫學活性”是指天然的、重組的或合成蛋白質及其片段在合適的動物或細胞中誘導特定免疫反應以及與特異性抗體結合的能力。“激動劑”是指當與人核糖體蛋白L14.22結合時，一種可引起該蛋白質改變從而調節該蛋白質活性的分子。激動劑可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結合人核糖體蛋白L14.22的分子。“拮抗劑”或“抑制物”是指當與人核糖體蛋白L14.22結合時，一種可封閉或調節人核糖體蛋白L14.22的生物學活性或免疫學活性的分子。拮抗劑和抑制物可以包括蛋白質、核酸、碳水化合物或任何其它可結合人核糖體蛋白L14.22的分子。“調節”是指人核糖體蛋白L14.22的功能發生改變，包括蛋白質活性的升高或降低、結合特性的改變及人核糖體蛋白L14.22的任何其它生物學性質、功能或免疫性質的改變。＂基本上純＂是指基本上不含天然與其相關的其它蛋白、脂類、糖類或其它物質。本領域的技術人員能用標準的蛋白質純化技術純化人核糖體蛋白L14.22。基本上純的人核糖體蛋白L14.22在非還原性聚丙烯酰胺凝膠上能本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種分離的多肽－人核糖體蛋白Ｌ１４．２２，其特征在于它包含有：ＳＥＱ ＩＤ ＮＯ：２所示的氨基酸序列的多肽、或其多肽的活性片段、類似物或衍生物。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：毛裕民，謝毅，
申請(專利權)人：上海博容基因開發有限公司，
類型：發明
國別省市：31[中國|上海]