本發(fā)明專利技術(shù)提供了一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料及其合成方法以及其在復(fù)雜遞藥制劑中的應(yīng)用，屬于智能型脂質(zhì)體技術(shù)領(lǐng)域，由于人體的疾病部位會(huì)產(chǎn)生不同的微環(huán)境變化，例如：血管通透性增加，局部酸性升高、局部溫度升高等，本發(fā)明專利技術(shù)公開的新型材料正是能夠隨人體微環(huán)境變化而改變高分子構(gòu)型的特性，利用變形的高分子特性對細(xì)胞磷脂雙層膜的干擾能力產(chǎn)生影響，從而達(dá)到在病變部位快速釋放藥物的目的，以實(shí)現(xiàn)智能化給藥、提高治療疾病的效果。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料及其合成方法以及其在復(fù)雜遞藥制劑中的應(yīng)用
本專利技術(shù)涉及智能型脂質(zhì)體
，具體涉及一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料的合成方法及其在復(fù)雜遞藥制劑中的應(yīng)用。
技術(shù)介紹
大量的動(dòng)物和臨床實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)已經(jīng)證明脂質(zhì)體包裹的抗癌藥物、抗生素和抗真菌化合物可以提高藥效。脂質(zhì)體制劑的優(yōu)勢在于改變了藥物的體內(nèi)藥物代謝和藥物的器官分布，可以顯著的降低藥物的毒副作用[DengYJ,2007]。特別應(yīng)該指出的是脂質(zhì)體可以選擇性的富集在新生腫瘤、感染和發(fā)炎部位，所以能將藥物連同脂質(zhì)體一起靶向送往病灶[ChonnandCullis,1995]。雖然我們已經(jīng)成功的將各種藥物包裹在脂質(zhì)體中并送往病灶和病變細(xì)胞，但是多數(shù)常規(guī)脂質(zhì)體并不能響應(yīng)細(xì)胞水平的微環(huán)境變化，在很多情況下脂質(zhì)體都完好的逗留在細(xì)胞的微器官中不能釋放所包裹的藥物，或脂質(zhì)體藥物在溶酶體內(nèi)被分解后排出了細(xì)胞外不能發(fā)揮作用[BaptistaALFandCoutinhoPJG,2003]。顯而易見，如何解決脂質(zhì)體制劑隨生理微環(huán)境變化而釋放其包裹的藥物就成為進(jìn)一步提高脂質(zhì)體藥物療效的關(guān)鍵。一般來說，脂質(zhì)體主要是以吞噬機(jī)制進(jìn)入細(xì)胞內(nèi)，含有脂質(zhì)體的吞噬體會(huì)繼續(xù)被送入酸性的溶酶體(Straubingeretal.,1983)。從吞噬體進(jìn)入溶酶體是一個(gè)連續(xù)的變化過程，吞噬體本身的內(nèi)部酸度需要從血液中的pH7.4逐漸降低到溶酶體內(nèi)的pH4.0[Tycko,etal.1983;Tycko,etal.1982]。所以，載藥脂質(zhì)體如果能夠隨著外部酸度變化的話（酸敏脂質(zhì)體），當(dāng)脂質(zhì)體進(jìn)入酸性吞噬體后，隨著酸性條件而破裂，或者融合，就可以使藥物從脂質(zhì)體中釋放出來。酸敏脂質(zhì)體的制備是通過腦磷脂-酸敏化合物的搭配，或者選用酸敏多肽和高分子材料修飾脂質(zhì)體雙層膜而實(shí)現(xiàn)的。酸敏脂質(zhì)體既要滿足在生理?xiàng)l件（pH7.4）穩(wěn)定，又要求其在酸性時(shí)迅速釋放包裹的藥物。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
針對這一特性合成了用脂肪胺部分隨機(jī)修飾的聚2-乙基丙烯酸脂肪酰胺衍生物并系統(tǒng)的研究了鑲嵌法在聚2-乙基丙烯酸脂質(zhì)體制備中的應(yīng)用,本專利技術(shù)設(shè)計(jì)和合成的智能高分子兩性脂質(zhì)材料被證明能夠達(dá)到智能響應(yīng)病灶處微環(huán)境的變化，這種材料制備的酸敏脂質(zhì)體能夠滿足在正常的生理?xiàng)l件下穩(wěn)定,在酸性條件下釋放所載荷的藥物的靶向性能，為了實(shí)現(xiàn)本專利技術(shù)的目的，本專利技術(shù)采用如下技術(shù)方案：一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料包括聚酸敏高分子脂質(zhì)體，所述聚酸敏高分子脂質(zhì)體包括高分子磷脂或者有一個(gè)酸性敏感斷裂的化學(xué)鍵，所述高分子磷脂隨著溫度變化能夠引起載藥制劑的藥物釋放，其中，所述聚酸敏高分子脂質(zhì)體為2-乙基丙烯酸長鏈脂肪酰胺衍生物，智能高分子脂質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)和合成方法如圖1所示。上述智能高分子兩性脂質(zhì)材料的合成方法，具體是采用高分子插入法制備了2-乙基丙烯酸酸敏高分子脂質(zhì)體，具體包括如下步驟：A1）將100mg熒光修飾的聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA和3mmol的1-十烷基胺溶解在pH7的水溶液中，所述聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA的羧酸單位為100mmol，聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA的單體分子量為MW為100；A2）將20mg/ml的EDC甲醇溶液加入高分子/烷基胺混合溶液，在室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)液的同時(shí)用薄層色譜跟蹤反應(yīng)，薄層色譜跟蹤反應(yīng)的色譜展開劑為CHCl3:MeOH:triethylamine=8:2:0.2,顯色劑為印三醇ninhydrin；A3）將溶液的pH調(diào)低到2-3，沉淀出修飾的高分子衍生物；A4）將分離出的沉淀物從新溶解在2M的NaOH溶液并攪拌半小時(shí)，再把溶液的pH調(diào)到2-3，將懸濁液超速離心分離出沉淀；A5）將沉淀用去離子水洗滌3-5次，冷凍干燥即可得到最終產(chǎn)物，產(chǎn)率一般在60-85%之間。進(jìn)一步的，上述智能高分子兩性脂質(zhì)材料的合成方法，具體還包括如下步驟：B1）取磷脂混合物共溶于氯仿/甲醇，加入試管內(nèi)氮?dú)獯蹈尚纬删鶆虻幕旌狭字∧?，真空干燥過夜，所述磷脂混合物的卵磷脂/膽固醇=55：45摩爾比；B2）在含有磷脂膜的試管內(nèi)加入HBS緩沖液，快速震蕩使磷脂膜水合溶解，所述HBS緩沖液包括20mmol/L的Hepes和150mmol/L的NaCl,HBS緩沖液的pH為7.5；B3）將得到的多層脂質(zhì)體以液氮速凍，然后在55℃水中溶解，重復(fù)速凍-熱解5次，在55℃用擠壓器將多層脂質(zhì)體反復(fù)擠壓通過雙層100nm孔徑的薄膜5次，即得到所需粒徑的大單室脂質(zhì)體。優(yōu)選的，制備熒光標(biāo)記的脂質(zhì)體方法為在磷脂配方中分別加入0.5%摩爾濃度的Rh-PE和NBD-PE，制備聚（2-乙基丙烯酸）酸敏脂質(zhì)時(shí)，將烷基化修飾程度為3mol%聚2-乙基丙烯酸脂肪酰胺溶液(pH7.4)與預(yù)先制備的脂質(zhì)體混合，在40℃溫度下緩慢攪拌，過夜，所述2-乙基丙烯酸脂肪酰胺溶液的pH為7.4。本專利技術(shù)提出的智能高分子兩性脂質(zhì)材料具有以下有益效果：本專利技術(shù)設(shè)計(jì)的高分子材料在這些微環(huán)境變化時(shí)，或者發(fā)生高分子材料斷裂、或者高分子材料疏水性增加，從而引發(fā)細(xì)胞膜的融合性增強(qiáng)、或者破壞細(xì)胞膜、或者可以提高載藥的脂質(zhì)體遞藥系統(tǒng)的融合性增加，使得載藥制劑在病變部位能夠快速釋放藥物，從而達(dá)到智能化給藥，提高治療疾病的效果。酸敏聚（2-乙基丙烯酸）高分子脂質(zhì)體在正常的生理環(huán)境穩(wěn)定，其包裹的藥物不發(fā)生泄露和突釋。一旦進(jìn)入酸性環(huán)境，聚（2-乙基丙烯酸）的羧酸側(cè)鏈質(zhì)子化，高分子疏水性增加，這些疏水的高分子嵌入磷脂膜，破壞脂質(zhì)體雙層膜，使得包裹的藥物釋放，達(dá)到選擇性釋放藥物的目的。膜通透性實(shí)驗(yàn)研究數(shù)據(jù)證明，聚（2-乙基丙烯酸）高分子酸敏脂質(zhì)體可以在酸性條件選擇性的釋放包裹的藥物，酸敏釋藥的同時(shí)伴隨著脂質(zhì)體本身粒徑的顯著增大。脂質(zhì)體粒徑增大極可能是酸敏引發(fā)的脂質(zhì)體相互間的膜融合的結(jié)果。實(shí)驗(yàn)證明聚（2-乙基丙烯酸）脂質(zhì)體的酸敏性非常靈敏。當(dāng)試藥溶液的酸度降到pH5時(shí)有80%的鈣黃綠素釋放出脂質(zhì)體。同時(shí)進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)結(jié)果也顯示酸敏高分子脂質(zhì)體在酸性條件下的融合特性與脂質(zhì)體攜帶的酸敏高分子化合物的分子量有直接關(guān)系，分子量高，脂質(zhì)體間融合的效果好。實(shí)驗(yàn)還采用Cos7細(xì)胞研究了酸敏高分子脂質(zhì)體在細(xì)胞內(nèi)的酸敏釋藥性能。鏡下觀察的結(jié)果表明，普通脂質(zhì)體在被細(xì)胞攝取后，無法快速釋放其包裹的藥物，而經(jīng)過聚（2-乙基丙烯酸）修飾的脂質(zhì)體可以在被細(xì)胞攝取后快速釋放藥物，表明酸敏高分子脂質(zhì)體不影響細(xì)胞對脂質(zhì)體的攝入，同時(shí)具有非常顯著的細(xì)胞內(nèi)酸敏釋藥性能。目前，含有高分子化合物的遞藥系統(tǒng)逐漸成研究熱點(diǎn)，本專利技術(shù)成功的利用了（2-乙基丙烯酸）高分子化合物為載體，制備了酸敏脂質(zhì)體制劑，其制劑學(xué)特性良好，酸敏遞藥效果顯著，期待可為載藥高分子材料的研究提供思路，同時(shí)也為制劑學(xué)研究提供新材料。附圖說明圖1為本專利技術(shù)中智能高分子脂質(zhì)的基本結(jié)構(gòu)和合成方法示意圖；圖2為本專利技術(shù)中十烷基胺的衍生物制備的脂質(zhì)體制劑粒徑數(shù)據(jù)圖；圖3為本專利技術(shù)中智能高分子脂溶性片段修飾度對高分子嵌入脂質(zhì)體的影響數(shù)據(jù)圖；圖4為本專利技術(shù)中智能高分子制備的本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
1.一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料，其特征在于，包括聚酸敏高分子脂質(zhì)體，所述聚酸敏高分子脂質(zhì)體包括高分子磷脂或者有一個(gè)酸性敏感斷裂的化學(xué)鍵，所述高分子磷脂隨著溫度變化能夠引起載藥制劑的藥物釋放。/n
【技術(shù)特征摘要】
1.一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料，其特征在于，包括聚酸敏高分子脂質(zhì)體，所述聚酸敏高分子脂質(zhì)體包括高分子磷脂或者有一個(gè)酸性敏感斷裂的化學(xué)鍵，所述高分子磷脂隨著溫度變化能夠引起載藥制劑的藥物釋放。
2.根據(jù)權(quán)利要求2所述的智能高分子兩性脂質(zhì)材料，其特征在于，所述聚酸敏高分子脂質(zhì)體為2-乙基丙烯酸長鏈脂肪酰胺衍生物。
3.一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料的合成方法，其特征在于，采用高分子插入法制備了2-乙基丙烯酸酸敏高分子脂質(zhì)體，具體包括如下步驟：
A1）將100mg熒光修飾的聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA和3mmol的1-十烷基胺溶解在pH7的水溶液中，所述聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA的羧酸單位為100mmol，聚2-乙基丙烯酸Py-PEAA的單體分子量為MW為100；
A2）將20mg/ml的EDC甲醇溶液加入高分子/烷基胺混合溶液，在室溫繼續(xù)攪拌反應(yīng)液的同時(shí)用薄層色譜跟蹤反應(yīng)，薄層色譜跟蹤反應(yīng)的色譜展開劑為CHCl3:MeOH:triethylamine=8:2:0.2,顯色劑為印三醇ninhydrin；
A3）將溶液的pH調(diào)低到2-3，沉淀出修飾的高分子衍生物；
A4）將分離出的沉淀物從新溶解在2M的NaOH溶液并攪拌半小時(shí)，再把溶液的pH調(diào)到2-3，將懸濁液超速離心分離出沉淀；
A5）將沉淀用去離子水洗滌3-5次，冷凍干燥即可得到最終產(chǎn)物，產(chǎn)率一般在60-85%之間。
4.一種智能高分子兩性脂質(zhì)材料的合成方法，其特征在于，采用高分子插入法制備...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄭巖，
申請(專利權(quán))人：西安力邦制藥有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：陜西;61
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