Pan-ELR制造技術

提供了特異性結合7種人ELR

Pan-ELR

Specific binding of seven human ELRs was provided.

【技術實現步驟摘要】
Pan-ELR+CXC趨化因子抗體本申請是申請日為2014年3月5日的中國專利申請201480013248.X“Pan-ELR+CXC趨化因子抗體”的分案申請。
本專利技術涉及針對ELR+CXC趨化因子的抗體，以及它們在治療由ELR+CXC趨化因子介導發病的疾病中的用途。
技術介紹
ELR+CXC趨化因子（這樣稱謂是因為該趨化因子家族成員都具有緊鄰它們的CXC基序的E-L-R氨基酸基序）在各種發病機制中發揮重要作用，包括嗜中性粒細胞向炎癥和血管生成位點的遷移。嗜中性粒細胞促進幾種急性和慢性炎癥/自身免疫性疾病的發病，諸如炎性腸病（IBD）、牛皮癬和掌跖膿皰病。ELR+CXC趨化因子還在腫瘤生成和腫瘤轉移中發揮關鍵作用。這些趨化因子在腫瘤中高表達。在腫瘤環境中，ELR+CXC趨化因子涉及多個通路，例如血管生成、內皮細胞和白細胞在腫瘤部位的移動和侵襲，以及腫瘤細胞的增殖和存活。趨化因子分為4個亞家族：CXC、CC、（X）C和CX3C。在CXC趨化因子中，一個氨基酸隔開前兩個半胱氨酸（“CXC基序”）。ELR+CXC趨化因子是CXCR1和/或CXCR2趨化因子受體的配體，其是特異性結合ELR+CXC趨化因子的G-蛋白偶聯的7種跨膜結構域型受體。所述7種人ELR+CXC趨化因子是人Gro-α（也稱為CXCL1）、人Gro-β（也稱為CXCL2）、人Gro-γ（也稱為CXCL3）、人ENA-78（也稱為CXCL5）、人GCP-2（也稱為CXCL6）、人NAP-2（也稱為CXCL7）和人IL-8（也稱為CXCL8）。所有的ELR+CXC趨化因子都結合CXCR2受體；此外，一些ELR+CXC趨化因子結合CXCR1和CXCR2受體兩者（即，CXCL6和CXCL8），它們都促進活化途徑中的冗余。先前已經描述了結合個別ELR+CXC趨化因子的抗體。在早期的臨床實驗中已經評價了針對CXCL8（IL-8）的兩種單克隆抗體在炎癥疾病中具有效力（JLeukBiol66:401-410;JImmunol181:669-679）。此外WO2008/130969公開了結合人IL-8(CXCL8)、人Gro-α(CXCL1)、人Gro-β(CXCL2)、人Gro-γ(CXCL3)和人ENA-78(CXCL5)的抗體。但是，該公開沒有證實該抗體緊密結合GCP-2（CXCL6），并且沒有提及對NAP-2（CXCL7）的結合。但是，尚未公開能夠結合并中和所有7種人ELR+CXC趨化因子的抗體。靶向一種或一些人ELR+CXC趨化因子使得其它ELR+CXC趨化因子有機會引發多種生物學功能。中和所有7種ELR+CXC趨化因子可以影響CXCR1+或CXCR2+細胞遷移到炎癥部位的能力，并且可以抑制血管生成。鑒于在CXCR1和CXCR2受體活化通路中顯著的冗余，對于結合所有7種人ELR+CXC趨化因子的具有特異性和高親和力的抗體仍然存在需要。對中和所有7種人ELR+CXC趨化因子的抗體存在需要。對于物理性能穩定的抗體也存在需要。因此，希望提供能夠結合并中和所有7種人ELR+CXC趨化因子并且物理性能穩定的septa-特異性抗體。
技術實現思路
本專利技術提供了中和人Gro-α、Gro-β、Gro-γ、ENA-78、GCP-2、NAP-2和IL-8的抗體。本專利技術還提供了中和Gro-α、Gro-β、Gro-γ、ENA-78、GCP-2、NAP-2和IL-8的抗體，其中所述抗體在下列氨基酸處結合IL-8（SEQIDNO:27）:Arg6、Ile10、Ala35、Ile40。本專利技術還提供了中和人Gro-α、Gro-β、Gro-γ、ENA-78、GCP-2、NAP-2和IL-8的抗體，其中所述抗體在下列氨基酸處結合IL-8（SEQIDNO:27）:Arg6、Ile10、Ala35、Ile40和Leu49。本專利技術提供了抗體，其包含輕鏈和重鏈，其中所述輕鏈包含輕鏈可變區（LCVR）并且所述重鏈包含重鏈可變區（HCVR），其中所述LCVR包括LCDR1、LCDR2、LCDR3并且所述HCVR包括HCDR1、HCDR2、HCDR3，其中LCDR1是RASQSISNNLH（SEQIDNO：7），LCDR2是YTSRSVS（SEQIDNO：8），LCDR3是GQNNEWPEV（SEQIDNO：9），HCDR1是GYEFTSYWIH（序列IDNO：10），HCDR2是NISPNSGSANYNEKFKS（SEQIDNO：11），并且HCDR3是EGPYSYYPSRXaaYYGSDL（SEQIDNO：20），其中Xaa是E或Q。在另一方面，本專利技術提供了一種抗體，其中HCVR的氨基酸序列是SEQIDNO:2或SEQIDNO:14。本專利技術還提供了一種抗體，其中LCVR的氨基酸序列是SEQIDNO:4或SEQIDNO:16。本專利技術提供了一種抗體，其中重鏈的氨基酸序列是SEQIDNO:1或SEQIDNO:13。本專利技術還提供了一種抗體，其中輕鏈的氨基酸序列是SEQIDNO:3或SEQIDNO:15。本專利技術還提供了一種DNA分子，所述DNA分子包含編碼具有SEQIDNO:1或SEQIDNO:13的氨基酸序列多肽的第一多核苷酸序列；和包含編碼具有SEQIDNO:3或SEQIDNO:15的氨基酸序列多肽的第二多核苷酸序列。本專利技術提供了包含上述DNA分子的哺乳動物細胞，其中所述細胞能夠表達抗體，所述抗體包含具有SEQIDNO:1或SEQIDNO:13的氨基酸序列的重鏈和具有SEQIDNO:3或SEQIDNO:15的氨基酸序列的輕鏈。已知能夠表達功能性免疫球蛋白的哺乳動物宿主細胞包括中國倉鼠卵巢（CHO）細胞、COS細胞和NS0細胞。用于本專利技術的優選的宿主細胞是NS0細胞。本專利技術進一步提供了用于生產包含氨基酸序列是SEQIDNO:3或SEQIDNO:15的輕鏈和氨基酸序列是SEQIDNO:1或SEQIDNO:13的重鏈的抗體的方法，所述方法包括在使得抗體表達的條件下培養上述哺乳動物細胞并回收表達的抗體。本專利技術提供一種治療潰瘍性結腸炎、腎癌或卵巢癌的方法，包括對有需要的患者施用治療有效量的本專利技術的抗體。本專利技術進一步提供了用于治療的本專利技術的抗體。此外，本專利技術提供了用于治療潰瘍性結腸炎、腎癌或卵巢癌的本專利技術的抗體。此外，本專利技術提供了本專利技術的抗體在制備用于治療潰瘍性結腸炎、腎癌或卵巢癌的藥物中的用途。本專利技術提供了包含本專利技術的抗體和一種或多種藥學可接受的載體、稀釋劑或賦形劑的藥物組合物。具體實施方式如本文所用，術語“人ELR+CXC趨化因子”意在指具有E-L-R基序并結合CXCR1和/或CXCR2受體的7種已知的CXC趨化因子。人ELR+CXC趨化因子是人Gro-α（也稱為CXCL1）（SEQIDNO：21）、人Gro-β（也稱為CXCL2）（SEQIDNO：22）、人Gro-γ（也稱為CXCL3）（SEQIDNO：23）、人ENA-78（也稱為CXCL5）（SEQIDNO：24）、人GCP-2（也稱為CXCL6）（SEQIDNO：25）、人NAP-2（也稱為CXCL7）（SEQIDNO：26）和人IL-8（也稱為CXCL8）（SEQIDNO：27）。本文中所有7種人ELR+CXC趨化因子統稱為“人pan-本文檔來自技高網...

【技術保護點】
1.結合人生長調節的癌基因(“Gro”)?–?α、人Gro?β、人Gro?γ、人表皮中性粒細胞活化肽?78、人粒細胞趨化蛋白?2、人中性粒細胞活化蛋白?2和人白介素?8的抗體，其中所述抗體包含輕鏈和重鏈，其中所述輕鏈包含輕鏈可變區(LCVR)且所述重鏈包含重鏈可變區(HCVR)，其中所述LCVR包含輕鏈互補決定區(“LCDR”)?LCDR1、LCDR2、LCDR3且所述HCVR包含重鏈互補決定區(“HCDR”)?HCDR1、HCDR2、HCDR3，其中LCDR1是RASQSISNNLH?(SEQ?ID?NO:?7)，LCDR2是YTSRSVS?(SEQ?ID?NO:?8)，LCDR3是GQNNEWPEV?(SEQ?ID?NO:?9)，HCDR1是GYEFTSYWIH?(SEQ?ID?NO:?10)，HCDR2是NISPNSGSANYNEKFKS?(SEQ?ID?NO:?11)，且HCDR3是EGPYSYYPSREYYGSDL?(SEQ?ID?NO:?12)，所述抗體用于治療斑塊狀牛皮癬。

【技術特征摘要】
2013.03.15 US 61/7928001.結合人生長調節的癌基因(“Gro”)–α、人Gro-β、人Gro-γ、人表皮中性粒細胞活化肽-78、人粒細胞趨化蛋白-2、人中性粒細胞活化蛋白-2和人白介素-8的抗體，其中所述抗體包含輕鏈和重鏈，其中所述輕鏈包含輕鏈可變區(LCVR)且所述重鏈包含重鏈可變區(HCVR)，其中所述LCVR包含輕鏈互補決定區(“LCDR”)LCDR1、LCDR2、LCDR3且所述HCVR包含重鏈互補決定區(“HCDR”)HCDR1、HCDR2、HCDR3，其中LCDR1是RASQSISNNLH(SEQIDNO:7)，LCDR2是YTSRSVS(SEQIDNO:8)，LCDR3是GQNNEWPEV(SEQIDNO:9)，HCDR1是GYEFTSYWIH(SEQIDNO:10)，HCDR2是NISPNSGSANYNEKFKS(SEQIDNO:11)，且HCDR3是EGPYSYYPSREYYGSDL(SEQIDNO:12)，所述抗體用于治療斑塊狀牛皮癬。2.結合人生長調節的癌基因(“Gro”)–α、人Gro-β、人Gro-γ、人表皮中性粒細胞活化肽-78、人粒細胞趨化蛋白-2、人中性粒細胞活化蛋白-...

【專利技術屬性】
技術研發人員：CB貝德勒，KK基克利，BA斯特里夫勒，DR維徹爾，JS博伊爾斯，
申請(專利權)人：伊萊利利公司，
類型：發明
國別省市：美國,US