一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑及制備方法技術

本發明專利技術提供了一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑及制備方法，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，所述凝膠基質主要由下列組分組成：去離子水、右旋糖酐、槲寄生葉提取物、藻酸丙二醇酯、油醇、愈創木膠；該方法包括：制備槲寄生葉提取物；將槲寄生葉提取物溶于去離子水中，靜置過夜，加入藻酸丙二醇酯、油醇和愈創木膠，攪拌，加入右旋糖酐，攪拌，配置凝膠基質，將凝膠基質中加入免疫細胞，攪拌均勻即可。本發明專利技術能夠保證免疫細胞在長期保存過程中的細胞活性，同時，本發明專利技術不僅能夠提高免疫細胞凝膠制劑的穩定性，保證長期存放的制劑藥效，而且能夠提高釋藥效率，防止霉變，實用性強。

Immune cell gel preparation capable of long-term preservation and preparation method thereof

The present invention provides a long-term preserved immune cell gel preparation and preparation method. The gel preparation is composed of immune cells and gel matrix. The gel matrix is composed mainly of the following components: Deionized water, dextran, mistletoe leaf extract, alginate two alcohol ester, oleol and guaiacol. The extract of mistletoe leaves was prepared; the extract of mistletoe leaves was dissolved in deionized water and was placed in the deionized water for the night, adding the alginate, oleol and guaiaci gum, stirring, adding dextran, stirring and configuring the gel matrix, adding the gel matrix into the immune cells and mixing it evenly. The invention can ensure the cell activity of the immune cells in the long-term preservation process, and at the same time, the invention can not only improve the stability of the immune cell gel preparation, ensure the long-term storage of the drug effect, but also improve the drug release efficiency, prevent mildew, and have strong practicability.

【技術實現步驟摘要】
一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑及制備方法
本專利技術屬于凝膠制劑
，特別涉及一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑及制備方法。
技術介紹
目前，對于疾病的診斷治療已經進入分子和細胞時代，干細胞、免疫細胞具有很大的治療潛力，免疫細胞是指參與免疫應答或與免疫應答相關的細胞，免疫細胞一般包括淋巴細胞、樹突狀細胞、單核/巨噬細胞、粒細胞、肥大細胞等。免疫細胞可以分為多種，在人體中各種免疫細胞擔任著重要的角色。現階段，免疫細胞的應用較為局限，國內外尚未見到有免疫細胞制劑。凝膠制劑是國內近年來興起的一種藥物新劑型凝膠制劑是指藥物與能形成凝膠的輔料制成溶液、混懸或乳狀液型的稠厚液體或半固體制劑，制備凝膠制劑常用基質一般由水、甘油或丙二醇與纖維素衍生物、卡波姆和海藻酸鹽等高分子材料構成，這種凝膠劑為水凝膠，雖然其無油膩感，易于涂布與清除，但是釋藥慢，且易失水與霉變，嚴重影響凝膠制劑的質量和各種性能。
技術實現思路
為了解決現有的凝膠制劑存在的上述問題，本專利技術提供了一種具有很好的穩定性、釋藥快且不容易失水及霉變的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑。本專利技術具體技術方案如下：本專利技術提供了一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有0.3×1011-1.2×1011個免疫細胞，所述凝膠基質主要由下列重量份數的組分組成：本專利技術通過在凝膠制劑中加入右旋糖酐和槲寄生葉提取物不僅作為凝膠基質，而且其為免疫細胞的存活提供了營養成分，保證了免疫細胞的存活率，此外，藻酸丙二醇酯、油醇及愈創木膠的加入能夠提高凝膠基質的穩定性，可用于長期保存免疫細胞，同時加入的藻酸丙二醇酯、油醇及愈創木膠還可以提高凝膠制劑的釋藥效率，防止霉變，實用性強。進一步的，所述免疫細胞選自T淋巴細胞、B淋巴細胞、K淋巴細胞、NK淋巴細胞、CIK細胞中的一種。優選的，所述槲寄生葉提取物的提取方法如下：將槲寄生葉洗凈，進行冷凍干燥，并將干燥的槲寄生葉研磨成粉末；取所述粉末添加到試管中，每g所述粉末中加入10ml無水乙醇，超聲提取30～60min，離心，將上清液轉移至另一試管中；對殘渣重復提取2次，并將每次提取的上清液合并；對步驟S2中得到的上清液進行減壓濃縮，得到總體積小于5mL的濃縮液；將所述濃縮液用去離子水充分溶解，并定容至50mL，即得到所述槲寄生葉提取物。通過上述方法及方法中特殊的參數設置制備的槲寄生葉提取物能夠提高細胞的抗逆性，減少免疫細胞在保存過程中的活性損失，為細胞的保存提高穩定的適宜環境。進一步的，所述凝膠基質還包括以下重量份數的成分：淀粉磷酸酯鈉0.5-1羧甲基纖維素鈣0.1-1.4羥乙基甲基纖維素0.1-0.6。本專利技術通過在凝膠基質中加入淀粉磷酸酯鈉、羧甲基纖維素鈣、羥乙基甲基纖維素中可以顯著提高凝膠基質的釋藥速度，透皮吸收性能更好，還可以提高免疫細胞在凝膠基質中的分散性，并且加入的淀粉磷酸酯鈉、羧甲基纖維素鈣、羥乙基甲基纖維素不會對免疫細胞產生干擾和吸附，不會影響免疫細胞的活性。進一步的，所述凝膠基質還包括以下重量份數的成分：丙二醇二乙酯0.2-1.2月桂酸異丙醇酰胺0.1-1.5。本專利技術通過在凝膠基質中加入的丙二醇二乙酯和月桂酸異丙醇酰胺可以顯著提高凝膠基質的保濕性，從而使凝膠制劑與皮膚接觸更加舒適，保證了凝膠制劑與皮膚的粘結性，可顯著降低凝膠制劑對皮膚的刺激性。進一步的，所述凝膠基質還包括以下重量份數的成分：氯芐乙胺0.1-0.5異丙醇0.1-1聚維碘酮0.1-0.8。本專利技術提供的凝膠制劑中加入的氯芐乙胺、異丙醇及聚維碘酮的混合成分能夠有效起到防腐、殺菌的作用，為免疫細胞的長期保存提供了基礎，有效降低免疫細胞的存活率，保證了細胞活性，降低了活性損失。優選的，所述凝膠基質主要由下列重量份數的組分組成：本專利技術提供的上述凝膠基質為最佳基質成分，通過上述成分的混合，不僅能夠延長免疫細胞的保存期，而且能夠保證免疫細胞在長期保存過程中的活性，同時有效具有保濕、防腐效果，同時釋藥快，實用性強。本專利技術還提供了一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑的制備方法，該方法包括以下步驟：S1：制備槲寄生葉提取物；S2、將槲寄生葉提取物溶于去離子水中，靜置過夜，加入藻酸丙二醇酯、油醇和愈創木膠，攪拌10min，轉速3500轉/min，加入右旋糖酐，攪拌13min，轉速500轉/min，配置凝膠基質，以每g凝膠基質中加入0.3×1011-1.2×1011個免疫細胞，攪拌均勻即可。優選的，步驟S1中，所述槲寄生葉提取物的制備方法如下：S1：將槲寄生葉洗凈，進行冷凍干燥，并將干燥的槲寄生葉研磨成粉末；S2：取所述粉末添加到試管中，每g所述粉末中加入10ml無水乙醇，超聲提取30～60min，離心，將上清液轉移至另一試管中；對殘渣重復提取2次，并將每次提取的上清液合并；S3：對步驟S2中得到的上清液進行減壓濃縮，得到總體積小于5mL的濃縮液；S4：將所述濃縮液用去離子水充分溶解，并定容至50mL，即得到所述槲寄生葉提取物。進一步的，所述免疫細胞選自T淋巴細胞、B淋巴細胞、K淋巴細胞、NK淋巴細胞、CIK細胞中的一種。本專利技術的有益效果如下：本專利技術提供的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑中加入的右旋糖酐、槲寄生葉提取物能夠保證免疫細胞在長期保存過程中的細胞活性，此外，該凝膠基質中加入的藻酸丙二醇酯、油醇及愈創木膠不僅能夠提高免疫細胞凝膠制劑的穩定性，保證長期存放的制劑藥效，而且能夠提高釋藥效率，防止霉變，實用性強。具體實施方式下面結合以下實施例對本專利技術作進一步詳細說明。實施例1一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有0.3×1011個免疫細胞，所述凝膠基質主要由下列重量數的組分組成：其中，免疫細胞為T淋巴細胞。實施例2一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有0.8×1011個免疫細胞，所述凝膠基質主要由下列重量數的組分組成：其中，免疫細胞為B淋巴細胞。該凝膠制劑的制備方法包括以下步驟：S1：制備槲寄生葉提取物；S2、將槲寄生葉提取物溶于去離子水中，靜置過夜，加入藻酸丙二醇酯、油醇和愈創木膠，攪拌10min，轉速3500轉/min，加入右旋糖酐，攪拌13min，轉速500轉/min，配置凝膠基質，以每g凝膠基質中加入0.8×1011個免疫細胞，攪拌均勻即可。步驟S1中，所述槲寄生葉提取物的制備方法如下：S1：將槲寄生葉洗凈，進行冷凍干燥，并將干燥的槲寄生葉研磨成粉末；S2：取所述粉末添加到試管中，每g所述粉末中加入10ml無水乙醇，超聲提取50min，離心，將上清液轉移至另一試管中；對殘渣重復提取2次，并將每次提取的上清液合并；S3：對步驟S2中得到的上清液進行減壓濃縮，得到總體積小于5mL的濃縮液；S4：將所述濃縮液用去離子水充分溶解，并定容至50mL，即得到所述槲寄生葉提取物。實施例3一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有1.2×1011個免疫細胞，所述凝膠基質主要由下列重量數的組分組成：其中，免疫細胞為K淋巴細胞。實施例4一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有0.3×10

【技術特征摘要】
1.一種可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠制劑由免疫細胞和凝膠基質組成，每g所述凝膠基質中含有0.3×1011-1.2×1011個免疫細胞，所述凝膠基質主要由下列重量份數的組分組成：2.如權利要求1所述的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述免疫細胞選自T淋巴細胞、B淋巴細胞、K淋巴細胞、NK淋巴細胞、CIK細胞中的一種。3.如權利要求1所述的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述槲寄生葉提取物的提取方法如下：將槲寄生葉洗凈，進行冷凍干燥，并將干燥的槲寄生葉研磨成粉末；取所述粉末添加到試管中，每g所述粉末中加入10ml無水乙醇，超聲提取30～60min，離心，將上清液轉移至另一試管中；對殘渣重復提取2次，并將每次提取的上清液合并；對步驟S2中得到的上清液進行減壓濃縮，得到總體積小于5mL的濃縮液；將所述濃縮液用去離子水充分溶解，并定容至50mL，即得到所述槲寄生葉提取物。4.如權利要求1所述的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠基質還包括以下重量份數的成分：淀粉磷酸酯鈉0.5-1羧甲基纖維素鈣0.1-1.4羥乙基甲基纖維素0.1-0.6。5.如權利要求4所述的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠基質還包括以下重量份數的成分：丙二醇二乙酯0.2-1.2月桂酸異丙醇酰胺0.1-1.5。6.如權利要求5所述的可長期保存的免疫細胞凝膠制劑，其特征在于，所述凝膠基質還包...

【專利技術屬性】
技術研發人員：曹毓琳，劉俊江，時兆田，白志惠，
申請(專利權)人：北京臻惠康生物科技有限公司，
類型：發明
國別省市：北京,11