醋酸奧曲肽注射液藥物組合物和醋酸奧曲肽制造技術

本發明專利技術涉及醋酸奧曲肽注射液藥物組合物和醋酸奧曲肽。具體的，本發明專利技術涉及的醋酸奧曲肽注射液藥物組合物其組成為：醋酸奧曲肽以奧曲肽計0.1g、甘露醇40～50g、乳酸3～4g、碳酸氫鈉適量調pH至3.7～4.7、注射用水適量加至1000ml等。本發明專利技術還涉及醋酸奧曲肽產品及其制備方法。本發明專利技術呈現如說明書所述優異技術效果。

Octreotide Acetate Injection pharmaceutical composition and octreotide acetate

The present invention relates to a Octreotide Acetate Injection pharmaceutical composition and octreotide acetate. Specifically, the invention relates to a pharmaceutical composition of Octreotide Acetate Injection which is composed of: octreotide acetate octreotide 0.1g, mannitol 40 ~ 50g, 3 ~ 4G, the amount of lactic acid and sodium bicarbonate pH adjusted to 3.7 ~ 4.7, the amount of injection water added to 1000ml. The invention also relates to acetic acid octreotide product and a preparation method thereof. The present invention presents excellent technical results as described in the specification.

【技術實現步驟摘要】
醋酸奧曲肽注射液藥物組合物和醋酸奧曲肽
本專利技術屬于醫藥
，更具體地，本專利技術公開了一種醋酸奧曲肽注射液藥物組合物和醋酸奧曲肽，以及該醋酸奧曲肽注射液藥物組合物的制法。本專利技術制備的醋酸奧曲肽注射液藥物組合物和醋酸奧曲肽具有優異的性質。
技術介紹
醋酸奧曲肽(OctreotideAcetate)是由八個氨基酸組成的合成多肽，其化學名為：D-苯丙氨酰-L-半胱氨酰-L-苯丙氨酰-D-色氨酰-L-賴氨酰-L-蘇氨酰-N-[(1R,2R)-2-羥基-1-(羥甲基)丙基]-L-半胱氨酰胺環(2→7)-二硫鍵醋酸鹽，其英文化學名為：L-Cysteinamide,D-phenylalanyl-L-cysteinyl-L-phenylalanyl-D-tryptophyl-L-lysyl-L-threonyl-N-[2-hydroxy-1-(hydroxymethyl)propyl]-，cyclic(2→7)-disulfide；[R-(R*，R*)]acetatesalt，CAS：83150-76-9，其化學結構式和分子式、分子量分別為：或者，其化學結構式為：自1973年Brazeau等從羊下丘腦中分離出生長抑素(Somatostatin，ST)以來，對ST的產生、分布及生物活性作了大量研究，并測定了它的一級結構。隨著放射免疫檢測和免疫細胞化學的進展，發現ST族激素在體內廣泛分布。如中樞神經系統、下丘腦、周圍神經系統、胰島D細胞、胃腸道上皮腺上皮和軸突細胞等。在垂體前葉，ST抑制生長激素和促甲狀腺激素的釋放。在胰腺，ST抑制胰島和胰高血糖素的分泌。ST對胃腸道系統影響廣泛，抑制激素，如胃泌素、胰泌素、血管活性腸肽和其它激素的釋放，抑制胃酸、胃蛋白酶的分泌，降低內臟血流量和腸活動，降低碳水化合物吸收，增加大腸對水和電解質的吸收。ST還具有細胞保護作用等。因而被認為能夠用于治療某些胃腸道及外科疾病。但ST的體內半衰期非常短，僅有2-3min，需連續靜注，并且ST無器官特異性，停藥后易引起生長激素等過度分泌，長期應用ST可導致腸道吸收不良和葡萄糖耐受性降低。因此ST的臨床應用一直受到限制。在1982年，瑞士Sandoz藥廠(現為NovartisCo.)合成了新一代長效型生長抑素類似物醋酸奧曲肽(Octreotide，Sandostatin，SMS201-995，以下簡稱奧曲肽)。它是一個以ST相同，并除去了ST中6個氨基酸。它可與廣泛存在于中樞神經系統、垂體和胰腺β細胞等處的ST受體結合產生生物學效應，而且抑制生長激素(GH)、胰島素、胰高血糖素、胃酸分泌均比ST強，特異性也較高。同時，由于1，4位L-氨基酸分別被相應D-氨基酸取代，8位為氨基L醇，故奧曲肽不易被蛋白酶迅速水解，并延長了體內半衰期，t1/2為80-160min，使用時不需連續靜注。因此，奧曲肽除具有ST類似物的抑制功能外，還具有下列特點：(1)對內分泌的抑制作用更強，對生長激素，胰離糖素和胰島素的抑制作用分別是ST的45倍、11倍和1.3倍。(2)半衰期長：皮下注射半衰期為2h。(3)停藥后不發生反跳性高分泌。所以奧曲肽近年來被用于多種疾病的治療，且副作用相對減少，已廣泛應用于消化道腫瘤、上消化道出血、急性胰腺炎、轉移性類癌、肢端肥大癥等病的治療。奧曲肽于1988年在新西蘭首先上市，上市劑型為注射劑，1989年美國FDA批準在美國上市。醋酸奧曲肽注射液，臨床使用可靜脈注射、皮下注射、靜脈滴注(滴注給藥時間可達12小時以上)，其儲存方式為2～8℃，避光保存，在室溫中(20～30℃)可保存14天，由此可見醋酸奧曲肽溶液穩定性是其產品質量優劣的重要衡量標準。有一些文獻公開了醋酸奧曲肽的制備方法。例如，CN103965291A(專利申請號201410228795.1)公開了奧曲肽、奧曲肽醋酸鹽的制備方法。該奧曲肽的制備方法包括下述步驟：采用高效液相反相色譜法將奧曲肽粗品溶液依次進行反相純化、反相脫鹽，即可；高效液相反相色譜法的填料為苯乙烯-二乙烯基苯(PS-DVB)共聚物。本專利技術將反相純化和反相脫鹽聯用，設計出聚合物填料苯乙烯-二乙烯基苯的最新應用，可以大批量制備奧曲肽和奧曲肽醋酸鹽。CN103965291A(專利申請號201010165270.X)公開了一種采用固相合成法制備奧曲肽的方法，包括如下步驟：(1)、將N-芴甲氧羰基-O-叔丁基蘇氨醇連接到作為載體的樹脂上獲得N-芴甲氧羰基-O-叔丁基蘇氨醇樹脂；(2)、按照Fmoc/tBu固相多肽合成的方法，根據奧曲肽的序列，將保護氨基酸按C端至N端的順序逐個偶聯到步驟(1)所得樹脂上獲得奧曲肽八肽樹脂；(3)、使用裂解劑將八肽從所述奧曲肽八肽樹脂上切下，得到線性粗肽；(4)、步驟(3)所得線性粗肽經氧化反應形成二硫鍵，經制備高效液相色譜純化即得所述奧曲肽，其特征在于：步驟(4)中，所述氧化反應在pH＝7.0～7.5以及氧化劑H2O2的存在下進行，其中H2O2與線性粗肽的投料摩爾比為7～9∶1。據信該專利技術采用雙氧水來氧化線性粗肽獲得奧曲肽，僅需1～3小時氧化反應即完全，與傳統的空氣氧化法相比，反應時間大大縮短，且奧曲肽產品收率大幅提高，適于大規模生產奧曲肽及其鹽。CN103102390A(專利申請號201110352635.4)公開了一種奧曲肽的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：步驟1：獲得氨基酸序列為D-Phe-Cys的二肽；以樹脂為載體，按照固相法合成六肽樹脂；所述六肽樹脂中氨基酸殘基序列為Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol；在堿性條件下，取所述二肽與所述六肽樹脂發生縮合反應，切肽制得線性八肽；所述線性八肽的氨基酸殘基序列為D-Phe-Cys-Phe-D-Trp-Lys-Thr-Cys-Thr-ol；步驟2：取所述線性八肽溶于過量的N，N-二甲基甲酰胺的水溶液中，調整pH值為6.8～8.0，加入過量的氧化劑，在18～30℃環化2～3h，調整pH值為3.5～5.0，純化后，制得結構如式Ⅰ所示的奧曲肽；其中，Thr-ol是蘇氨醇，Cys是半胱氨酸，Thr是蘇氨酸，Lys是賴氨酸，D-Trp是D型色氨酸，Phe是苯丙氨酸，D-Phe是D型苯丙氨酸。據信該專利技術提高了奧曲肽的收率及純度。CN1355173A(專利申請號00134258.4)公開了制備醋酸奧曲肽的方法，其包括：a).將下式三肽R1-D-Phe-Cys(R2)-Phe-OH與下式五肽R3-D-Trp-Lys(R4)-Thr(R5)-Cys(R2)-NH-CH(CH2-OR6)-CH(OR5)-CH3反應生成下式八肽R1-D-Phe-Cys(R2)-Phe-D-Trp-Lys(R4)-Thr(R5)-Cys(R2)-NH-CH(CH2-OR6)-CH(OR5)-CH3在上述三肽、五肽及八肽中，R1＝BOC；R2＝Bzl、4-Me-Bzl或4-MeO-Bzl；R3＝Fmoc；R4＝Z或2-Cl-Z；R5＝Bzl；R6＝CH3-、CH3CH2-、CH3CH2CH2-或CH3CH2CH2CH2-。b).用無水氟化氫脫除a)中所得八肽上所有側鏈保護基，得到下式還原型奧曲肽，D-Phe-Cys-Phe-D-Try-Lys-Th本文檔來自技高網...

【技術保護點】
醋酸奧曲肽注射液藥物組合物，其組成為：醋酸奧曲肽以奧曲肽計0.1g、甘露醇40～50g、乳酸3～4g、蔗糖1～3g、碳酸氫鈉適量調pH至3.7～4.7、注射用水適量加至1000ml。

【技術特征摘要】
1.醋酸奧曲肽注射液藥物組合物，其組成為：醋酸奧曲肽以奧曲肽計0.1g、甘露醇40～50g、乳酸3～4g、蔗糖1～3g、碳酸氫鈉適量調pH至3.7～4.7、注射用水適量加至1000ml。2.根據權利要求1的醋酸奧曲肽注射液藥物組合物，其組成為：醋酸奧曲肽以奧曲肽計0.1g、甘露醇42～48g、乳酸3.2～3.6g、蔗糖1.5～2.5g、碳酸氫鈉適量調pH至3.7～4.7、注射用水適量加至1000ml。3.根據權利要求1的醋酸奧曲肽注射液藥物組合物，其組成為：醋酸奧曲肽以奧曲肽計0.1g、甘露醇45g、乳酸3.4g、蔗糖2g、碳酸氫鈉適量調pH至3.7～4.7、注射用水適量加至1000ml。4.根據權利要求1的醋酸奧曲肽注射液藥物組合物，其是照包括如下步驟的方法制備得到的：取處方量的甘露醇、2/3～3/4處方量的乳酸加注射用水700ml，攪拌溶解，加0.1％活性炭，加熱至80℃攪拌30分鐘，經鈦棒循環脫炭，濾液冷卻至15～30℃，加入碳酸氫鈉調pH至3.7～4.7，備用；另取處方量的醋酸奧曲肽、蔗糖和余量的乳酸，加15～30℃注射用水100ml，加0.1％活性炭攪拌30分鐘，經鈦棒循環脫炭，濾液加入碳酸氫鈉調pH至3.7～4.7；使兩種濾液合并，必要時用碳酸氫鈉調pH至3.7～4.7，加注射用水至1000ml；經蠕動泵送至無菌室中，經0.22μm的微孔濾膜過濾至澄明并除菌，按每瓶1ml的裝量灌裝于玻璃瓶中，密封，即得醋酸奧曲肽注射液藥物組合物。5.制備醋酸奧曲肽的方法，包括如下步驟：以氯甲基樹脂為起始原料，將Boc-Thr(tBu)-OH制備成銫鹽，按照固相合成的方法依次連接具有保護基團的氨基酸，依次為：Boc-Cys(Trt)-OH、Boc-Thr(tBu)-OH、Boc-Lys(Fmoc)-OH、Boc-D-Trp-OH、Boc-Phe-OH、Boc-Cys(Trt)-OH、Fmoc-D-Phe-OH，獲得保護八肽樹脂，其間依次用HCl/異丙醇脫去Boc-保護基團，用DIC、HOBT為縮合劑進行接肽反應；用鈀碳/氫氣還原，同時將肽鏈切落，獲得還原型奧曲肽；將還原型奧曲肽粗品溶于水，在攪拌下滴加2mol/L氨水至pH7.8-9，室溫通空氣24-36小時使二硫鍵成環，加冰醋酸，加活性碳，過濾，得奧曲肽粗品；奧曲肽粗品經C18柱分離純化，制得醋酸奧曲肽精品。6.根據權利要求5的方法，其中在進行二硫鍵成環的過程中，所用的空氣預先依次通過飽和氫氧化鈣溶液和2.5M硫酸溶液處理。7.根據權利要求5的方法，其中，依次連接具有保護基團的氨基酸，獲得保護八肽樹脂，其間依次脫去Boc-保護基團的方法包括如下步驟：(1)Boc-Thr(tBu)-OCs的制備使Boc-Thr(tBu)-OH溶于甲醇與水中，另取碳酸銫加水溶解至澄清，攪拌下加入上述Boc-Thr(tBu)-OH溶液，溶液pH7.5，減壓濃縮至干，得糖漿狀殘留物為Boc-Thr(tBu)-OCs；[在本步驟的一個實施方案中，碳酸銫的摩爾數為Boc-Thr(tBu)-OH的1～5倍](2)Boc-Thr(tBu)-O-樹脂的制備取氯甲基樹脂，用DMF浸泡使樹脂溶脹，加上述糖漿狀殘留物Boc-Thr(tBu)-OCs和DMF使進行反應；過濾，樹脂用DMF洗滌二次，純化水洗滌，無水乙醇洗滌，減壓干燥，得Boc-Thr(tBu)-O-樹脂[在本步驟的一個實施方案中，Boc-Thr(tBu)-OCs的摩爾數為樹脂的1～3倍；在一個實施方案中，氯甲基樹脂與Boc-Thr(tBu)-OCs的反應溫度：40-65℃，反應時間：36-72小時]；(3)Boc-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-樹脂的制備：在步驟(2)的Boc-Thr(tBu)-O-樹脂中，加入2mol/LHCl/異丙醇溶液與DCM，反應，抽干，分別用DCM、無水甲醇、DCM各洗滌二次，抽干，再加10％三乙胺的DCM溶液(體積比)反應，抽干，DCM洗滌；加入Boc-Cys(Trt)-OH、DIC、HOBT、DMF，將混合物反應，抽干，分別用DMF、無水甲醇、DMF洗滌，抽干，即得[在一個實施方案中，脫除Boc-基采用2mol/LHCl/異丙醇溶液，HCl濃度為1mol/L～9mol/L；2mol/LHCl/異丙醇用量為樹脂重量的2～8倍，例如2.5～5.5倍]；(4)Boc-Thr(tBu)-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-樹脂的制備在步驟(3)的Boc-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-樹脂中，加入2mol/LHCl/異丙醇溶液與DCM，反應，抽干，分別用DCM、無水甲醇、DCM各洗滌二次，抽干，加10％三乙胺的DCM溶液反應，抽干，DCM洗滌；加Boc-Thr(tBu)-OH、DIC、HOBT、DMF，將混合物反應，抽干，分別用DMF、無水甲醇、DMF各洗滌三次，抽干，即得[在一個實施方案中，脫除Boc-基采用2mol/LHCl/異丙醇溶液，HCl濃度為1mol/L～9mol/L；2mol/LHCl/異丙醇用量為樹脂重量的2～8倍，例如2.5～5.5倍]；(5)Boc-Lys(Fmoc)-Thr(tBu)-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-樹脂的制備在步驟(4)的Boc-Thr(tBu)-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-樹脂中，加入2mol/LHCl/異丙醇溶液與DCM，反應，抽干，分別用DCM、無水甲醇、DCM各洗滌，抽干，加10％三乙胺的DCM溶液反應，抽干，DCM洗滌；加Boc-Lys(Fmoc)-OH、DIC、HOBT、DMF，將混合物反應，抽干，分別用DMF、無水甲醇、DMF洗滌，抽干，即得[在一個實施方案中，脫除Boc-基采用2mol/LHCl/異丙醇溶液，HCl濃度為1mol/L～9mol/L；2mol/LHCl/異丙醇用量為樹脂重量的2～8倍，例如2.5～5.5倍]；(6)Boc-D-Trp-Lys(Fmoc)-Thr(tBu)-Cys(Trt)-Thr(tBu)-O-...

【專利技術屬性】
技術研發人員：余茹，金春花，王秀瓊，黃小石，曾業浩，王良紅，丁牡丹，吳國慶，
申請(專利權)人：成都天臺山制藥有限公司，
類型：發明
國別省市：四川,51