內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用，屬于微生物領(lǐng)域，以解決現(xiàn)有液體發(fā)酵菌液存在貯存困難、不易運輸和二次發(fā)酵的問題。包括如下步驟：將內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus?mojavensis)菌株接入至固體基質(zhì)中發(fā)酵,接入量為4?12％，pH值為7.0?8.0,發(fā)酵時間為30?42h，發(fā)酵溫度為34?42℃。本發(fā)明專利技術(shù)利用農(nóng)業(yè)廢棄物固體發(fā)酵的微生物菌劑易于貯存和運輸，且使用方便，優(yōu)點明顯。本發(fā)明專利技術(shù)內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌防治黃瓜枯萎病和辣椒枯萎病的防效在61％以上，從而克服現(xiàn)有化學(xué)農(nóng)藥環(huán)保性差、易產(chǎn)生抗藥性和安全性差的缺陷，具有環(huán)保性好、不易產(chǎn)生抗藥性和安全性好、促生(肥料)功能，符合“減藥減肥”的國家要求，也有利于保護(hù)環(huán)境。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用
本專利技術(shù)屬于微生物領(lǐng)域，具體涉及一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法及其應(yīng)用。
技術(shù)介紹
進(jìn)入21世紀(jì)后，基于化學(xué)農(nóng)藥對環(huán)境的污染和農(nóng)藥殘留等問題，隨著“公共植保，綠色植保”理念的提出和實踐，生物農(nóng)藥研發(fā)成為我國生物產(chǎn)業(yè)、農(nóng)業(yè)科研與應(yīng)用的熱點，被列為國家中長期科技發(fā)展規(guī)劃的重大研究領(lǐng)域與方向，綠色植保已經(jīng)成為國家發(fā)展的重要需求與必然趨勢。其中尤以植物內(nèi)生細(xì)菌作為拮抗菌的研究得到眾多學(xué)者的關(guān)注。植物內(nèi)生細(xì)菌是指生活在植物體內(nèi)，但對植物沒有任何實質(zhì)性傷害的細(xì)菌，其通過固氮、溶磷和產(chǎn)IAA等生物學(xué)功能提高宿主的抗旱和抗寒等抗逆能力，特別是抑菌功能是其成為生防菌資源的有力支撐。植物內(nèi)生細(xì)菌也可以通過分泌抑菌物質(zhì)、與病原菌競爭營養(yǎng)空間及誘導(dǎo)植物獲得抗病性阻止或降低病原菌對植物的侵染或造成的危害。以內(nèi)生細(xì)菌為菌種資源研制的微生物農(nóng)藥不易產(chǎn)生抗藥性，不傷害天敵，且能利用農(nóng)副產(chǎn)品等廣泛生產(chǎn)，更重要的是內(nèi)生細(xì)菌可以定殖于作物體內(nèi)，甚至可以通過種子(苗木)傳播于下一代，長期起作用，省時省力，高效，應(yīng)用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)后為生產(chǎn)綠色或無公害農(nóng)產(chǎn)品提供了一個新的途徑。特別是生物農(nóng)藥多利用農(nóng)副產(chǎn)品或農(nóng)業(yè)廢棄物等發(fā)酵生產(chǎn)，一方面生產(chǎn)的生物農(nóng)藥應(yīng)用于農(nóng)業(yè)，減少化學(xué)農(nóng)藥的負(fù)面問題，提高農(nóng)產(chǎn)品產(chǎn)量和品質(zhì)，另一方面綜合利用農(nóng)副產(chǎn)品及農(nóng)業(yè)廢棄物，提高其附加值。微生物肥料作為一種新型肥料，施入土壤后，通過其特定菌株的快速繁殖，能固定大氣中的氮素、釋放土壤中固定態(tài)的磷、鉀元素，使得環(huán)境的養(yǎng)分潛力得以充分發(fā)揮，并為作物生長營造一個良好的土壤微生物環(huán)境，在減少化肥用量、降低環(huán)境污染、提高農(nóng)作物品質(zhì)等方面具有重要意義。尤其是集抑菌、固氮、解磷、解鉀和作物生長素于一身的復(fù)合微生物肥料的研發(fā)，在農(nóng)業(yè)可持續(xù)發(fā)展中有舉足輕重的作用。黃瓜、西瓜、甜瓜和辣椒等植物的枯萎病發(fā)生普遍，給農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中帶大巨大的經(jīng)濟(jì)損失，而且該病的病原菌在土壤中可以長期存活，一般化學(xué)農(nóng)藥進(jìn)入土壤后受土壤理化性質(zhì)影響效果較差，而效果較好的農(nóng)藥又殘效期長，影響農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留量和質(zhì)量安全，在目前國家提出“減藥減肥”的大方針下，尋找化學(xué)農(nóng)藥的替代品是當(dāng)務(wù)之急，而微生物農(nóng)藥和微生物肥料則是可選項之一。CN104152385A公開了一株莫哈韋芽孢桿菌菌株、微生物菌劑及其制備方法和應(yīng)用，公開了莫哈韋芽孢桿菌對馬鈴薯壞疽病菌等的抑制率及對馬鈴薯的促生效果，特別是報道了莫哈韋芽孢桿菌的液體發(fā)酵條件。但液體發(fā)酵菌液存在貯存困難、不易運輸和二次發(fā)酵等問題。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，以解決現(xiàn)有液體發(fā)酵菌液存在貯存困難、不易運輸和二次發(fā)酵的問題。本專利技術(shù)的另一個目的是提供一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的應(yīng)用。本專利技術(shù)提供的技術(shù)方案為：一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，包括如下步驟：將內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌株接入至固體基質(zhì)中發(fā)酵,接入量為4-12％，pH值為7.0-8.0,發(fā)酵時間為30-42h，發(fā)酵溫度為34-42℃。優(yōu)選地，內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌株的接入量為8％，pH值為7.5,發(fā)酵時間為36h，發(fā)酵溫度為38℃。優(yōu)選地，麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、稻殼粉20.9％、玉米面17.9％、豆粕13.4％、葡萄糖20g/kg、脲10g/kg、硫酸亞鐵15g/kg，料:水＝1:1.2。優(yōu)選地，內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌體的活菌數(shù)為3.61×1012CFU/mL-3.43×1013CFU/mL。優(yōu)選地，內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌體的活菌數(shù)為3.43×1013CFU/mL。上述內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑在防治黃瓜枯萎病和辣椒枯萎病中的應(yīng)用。本專利技術(shù)高寒草地牧草內(nèi)生細(xì)菌莫哈韋芽孢桿菌采用CN104152385A公開的莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905。本專利技術(shù)利用農(nóng)業(yè)廢棄物固體發(fā)酵的微生物菌劑易于貯存和運輸，且使用方便，優(yōu)點明顯。本專利技術(shù)內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌特點是，一方面由于內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌可定殖于植物體內(nèi)，受外界環(huán)境影響小，生防作用穩(wěn)定持久，甚至通過種子等途徑傳播于下一代，另一方面莫哈韋芽孢桿菌的固體發(fā)酵生產(chǎn)微生物農(nóng)藥的條件及該微生物農(nóng)藥對黃瓜枯萎病和辣椒枯萎病防治效果未見報道。本專利技術(shù)內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌防治黃瓜枯萎病和辣椒枯萎病的防效在61％以上，從而克服現(xiàn)有化學(xué)農(nóng)藥環(huán)保性差、易產(chǎn)生抗藥性和安全性差的缺陷，具有環(huán)保性好、不易產(chǎn)生抗藥性和安全性好、促生(肥料)功能，符合“減藥減肥”的國家要求，也有利于保護(hù)環(huán)境。具體實施方式下面的實施例可以進(jìn)一步說明本專利技術(shù)，但不以任何方式限制本專利技術(shù)。實施例1：微生物菌劑其活性成分為莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905的菌體，其中，含有按重量百分比計的莫哈韋芽孢桿菌4％，基質(zhì)余量，基質(zhì)由以下物質(zhì)組成：麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、稻殼粉20.9％、玉米面17.9％、豆粕13.4％、葡萄糖20g/kg、脲10g/kg、硫酸亞鐵15g/kg。莫哈韋芽孢桿菌的活菌數(shù)為3.61×1012CFU/mL。實施例2：微生物菌劑的制備方法，將莫哈韋芽孢桿菌接入至基質(zhì)中發(fā)酵，料水比為1：1.2，接入量為4％，pH7.0，發(fā)酵時間為30h，發(fā)酵溫度為34℃，制得微生物菌劑用作農(nóng)藥或肥料。實施例3：微生物菌劑，其活性成分為莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905的菌體，其中，含有按重量百分比計的莫哈韋芽孢桿菌8％，基質(zhì)余量，基質(zhì)由以下物質(zhì)組成：麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、稻殼粉20.9％、玉米面17.9％、豆粕13.4％、葡萄糖20g/kg、脲10g/kg、硫酸亞鐵15g/kg。莫哈韋芽孢桿菌的活菌數(shù)為3.43×1013CFU/mL。實施例4：微生物菌劑的制備方法，將莫哈韋芽孢桿菌菌體接入至基質(zhì)中發(fā)酵，接入量為8％，pH7.5，發(fā)酵時間為36h，發(fā)酵溫度為38℃，制得微生物菌劑用作農(nóng)藥或肥料。實施例5：微生物菌劑，其活性成分為上述莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905的菌體，其中，含有按重量百分比計的莫哈韋芽孢桿菌12％，基質(zhì)余量，基質(zhì)由以下物質(zhì)組成：麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、稻殼粉20.9％、玉米面17.9％、豆粕13.4％、葡萄糖20g/kg、脲10g/kg、硫酸亞鐵15g/kg。莫哈韋芽孢桿菌的活菌數(shù)為1.0×1013CFU/mL。實施例6：微生物菌劑的制備方法，將莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905菌體接入至基質(zhì)中發(fā)酵，接入量為12％，發(fā)酵時間為42h，發(fā)酵溫度為42℃，制得微生物菌劑可用作農(nóng)藥或肥料。下面通過試驗一和實驗二對莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)QLY002，CGMCCNo.8905菌株的固體發(fā)酵基質(zhì)進(jìn)行優(yōu)化。試驗一：本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護(hù)點】
一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下步驟：將內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillus?mojavensis)菌株接入至固體基質(zhì)中發(fā)酵,接入量為4?12％，pH值為7.0?8.0,發(fā)酵時間為30?42h，發(fā)酵溫度為34?42℃。

【技術(shù)特征摘要】
1.一種內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，其特征在于包括如下步驟：將內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌株接入至固體基質(zhì)中發(fā)酵,接入量為4-12％，pH值為7.0-8.0,發(fā)酵時間為30-42h，發(fā)酵溫度為34-42℃。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，其特征在于：內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌(Bacillusmojavensis)菌株的接入量為8％，pH值為7.5,發(fā)酵時間為36h，發(fā)酵溫度為38℃。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的內(nèi)生莫哈韋芽孢桿菌固體菌劑的生產(chǎn)方法，其特征在于：所述固體基質(zhì)由以下物質(zhì)組成：麩皮占26.9％、玉米秸稈粉20.9％、...

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：楊成德，陳秀蓉，薛莉，牛小麗，
申請(專利權(quán))人：甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：甘肅,62