本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括外植體選擇與消毒、從生芽誘導(dǎo)、叢生芽增殖、生根培養(yǎng)、壯苗培養(yǎng)和苗床培養(yǎng)等步驟。與紫莖傳統(tǒng)育苗方法相比，本發(fā)明專(zhuān)利技術(shù)的方法不受紫莖種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，利用紫莖當(dāng)年生新梢進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得紫莖幼苗，并將幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)獲得紫莖移栽苗，該繁育方法可有效提高紫莖的繁育系數(shù)，保留紫莖的優(yōu)良遺傳特性，幼苗成活率高達(dá)95％，移栽苗野外移栽成活率高達(dá)80％，可實(shí)現(xiàn)紫莖苗木的規(guī)模化生產(chǎn)和野外大面積育林生長(zhǎng)，并為紫莖這一珍稀瀕危植物的有效保護(hù)提供技術(shù)支持。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專(zhuān)利技術(shù)屬于植物繁殖
，具體涉及一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法。
技術(shù)介紹
紫莖(拉丁學(xué)名:Stewartia sinensis Rehd.et Wils.)屬山茶科紫莖屬多年生木本植物。由于植被不斷被破壞，天然更新力差，紫莖植株已日益減少，在中國(guó)紅皮書(shū)被列為“漸危種”。紫莖為中國(guó)特有的殘遺植物，對(duì)研究東亞-北美植物區(qū)系有科學(xué)意義，其樹(shù)皮片狀脫裂，內(nèi)皮棕黃光潔，斑駁奇麗，花白瓣黃蕊，清秀淡雅，常用于裝飾庭院；材質(zhì)堅(jiān)重，經(jīng)久耐用色美麗，為制造家具有優(yōu)良用材；根皮、莖皮、果可入藥；種子油可食用或制肥皂及潤(rùn)滑油，故紫莖具有較高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，尤其是隨著人們生活水平的提升，對(duì)物質(zhì)的追求也不斷的提升，用紫莖裝飾庭院，以紫莖這一優(yōu)質(zhì)而又美觀的木材制作的家具，也會(huì)得到越來(lái)越多的人士的青睞，其市場(chǎng)前景廣闊。紫莖在自然狀況下以種子進(jìn)行繁殖，由于受到種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，不能實(shí)現(xiàn)苗木規(guī)模化生產(chǎn)，且采用種子培育的實(shí)生苗木性狀差異大，不適合大面積育林生長(zhǎng)。組織培養(yǎng)是一種植株快速繁殖技術(shù)，其所需植株原材料少，不受生長(zhǎng)季節(jié)限制，培養(yǎng)周期短，變異低，可保持母本的優(yōu)良遺傳特性，可用于拯救瀕危珍稀植物，解決其無(wú)法短時(shí)大量繁殖的難題，實(shí)現(xiàn)模化生產(chǎn)。但目前關(guān)于紫莖的組織培養(yǎng)研究還未見(jiàn)報(bào)道。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專(zhuān)利技術(shù)的一個(gè)目的是解決至少上述問(wèn)題和/或缺陷，并提供至少后面將說(shuō)明的優(yōu)點(diǎn)。本專(zhuān)利技術(shù)還有一個(gè)目的是提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，利用紫莖
當(dāng)年生新梢進(jìn)行組織培養(yǎng)，獲得紫莖幼苗，并將幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)獲得紫莖移栽苗，該繁育方法不受紫莖種子數(shù)量和種子發(fā)芽率的限制，可有效提高紫莖的繁育系數(shù)，保留紫莖的優(yōu)良遺傳特性，幼苗成活率高達(dá)95％，移栽苗野外移栽成活率高達(dá)80％，可實(shí)現(xiàn)紫莖苗木的規(guī)模化生產(chǎn)和野外大面積育林生長(zhǎng)，有利于紫莖這一珍稀瀕危植物的有效保護(hù)。本專(zhuān)利技術(shù)還有一個(gè)目的是提供一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，包括以下步驟：A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5-10cm的枝條，將所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來(lái)水沖洗15-20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無(wú)菌水沖洗3-5次并用消毒濾紙除去其表面水分，得外植體，其中，所述天然消毒液的制備方法為：將10-12重量份代代、7-9重量份白千層、7-9重量份藍(lán)桉、6-8重量份大蒜、5-7重量份檸檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的水室溫下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，過(guò)濾，所得濾液即為所述天然消毒液；B、將步驟A中得到的所述外植體用無(wú)菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30天，得第一叢生芽，其中，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT(玉米素)，1.0-1.5mg/L 6-KT(激動(dòng)素)，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T(2.4.5-三氯苯氧乙酸)，15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-2200lux，光照時(shí)間為14-16h/天；所述蛋黃液是取新鮮蛋黃，經(jīng)充分?jǐn)嚢韬螅?0目濾布過(guò)濾制得；C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無(wú)菌解剖刀切割成帶有1-2個(gè)芽的小塊并分別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30天，得第二叢生芽，其中，所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT，1.5-2.0mg/L 6-KT，1.2-1.5mg/L NAA(α-萘乙酸)，15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18-20天，得完整植株，其中，所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-1.0mg/L IBA(吲哚丁酸)，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-2400lux，光照時(shí)間為14-16h/天；E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無(wú)菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28-30天，得幼苗，其中，所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA(6-芐氨基嘌呤)，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黃液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-2400lux，光照時(shí)間為14-16h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度為22-26℃，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16-20℃；F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5-6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，苗床中培養(yǎng)時(shí)，培養(yǎng)溫度為16-20℃、濕度為70-80％、陰蔽度為20-30％。優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述苗床由床體和基質(zhì)組成，其中，所述床體，其包括：床架，其為上表面開(kāi)口的中空長(zhǎng)方體，其長(zhǎng)為3-9m、寬為1-1.8m、高為20-25cm；所述床架的平行于長(zhǎng)度方向的右側(cè)面和與其相鄰的前側(cè)面、后側(cè)面及底面可拆卸連接；所述右側(cè)面的下方設(shè)有與豎直方向呈30-60°的向下傾斜的滑槽，所述滑槽與所述底面邊緣固定連接；噴霧裝置，其包括間隔設(shè)置在所述床架的內(nèi)部上方并與所述床架的長(zhǎng)度方向平行的多個(gè)進(jìn)水管和間隔設(shè)置在所述進(jìn)水管上的多個(gè)旋轉(zhuǎn)噴頭；溫控裝置，其為設(shè)置在所述床架的內(nèi)部下方的呈波浪形排列的熱交換管；自動(dòng)控制系統(tǒng)，其包括設(shè)置在所述床架的內(nèi)部的多個(gè)溫濕度傳感器和設(shè)置在所述前側(cè)面的外表面上的控制面板。優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述基質(zhì)，其包括：第一基質(zhì)層，其由15-20重量份稻殼、15-20重量份珍珠巖和10-12重量份鋸末經(jīng)高溫滅菌制得，其厚度為6-8cm；第二基質(zhì)層，其位于所述第一基質(zhì)層上方，其由20-30重量份廄肥、15-20重量份廢蜜液、15-20份蛋殼、10-15重量份豆渣、10-15重量份秸稈和0.8-1份酵素菌經(jīng)發(fā)酵后再加入40-50重量份黃壤土混合制得，其厚度為13-15cm；第三基質(zhì)層，其位于所述第二基質(zhì)層上方，其為厚度為1-2cm的表層腐殖土。優(yōu)選的是，所述的紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中ZT濃度為2.2mg/L，6-KT濃度為1.2mg/L，2.4.5-T濃度為1.2mg/L，蛋黃液濃度為18g/L，大豆肽濃度為5g/L，pH值為5.8。優(yōu)選的是，所述的紫莖本文檔來(lái)自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5?10cm的枝條，將所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來(lái)水沖洗15?20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無(wú)菌水沖洗3?5次并用消毒濾紙除去其表面水分，得外植體，其中，所述天然消毒液的制備方法為：將10?12重量份代代、7?9重量份白千層、7?9重量份藍(lán)桉、6?8重量份大蒜、5?7重量份檸檬草和4?6重量份丁香粉碎至50?100目，加入500重量份的水室溫下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2?4h，過(guò)濾，所得濾液即為所述天然消毒液；B、將步驟A中得到的所述外植體用無(wú)菌解剖刀切割成0.5?0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22?26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28?30天，得第一叢生芽，其中，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0?2.5mg/L?ZT，1.0?1.5mg/L?6?KT，1.0?1.5mg/L?2.4.5?T，15?20g/L蛋黃液，4?6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L瓊脂，pH值為5.5?5.8；第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為2000?2200lux，光照時(shí)間為14?16h/天；C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無(wú)菌解剖刀切割成帶有1?2個(gè)芽的小塊并分別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22?26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28?30天，得第二叢生芽，其中，所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0?2.5mg/L?ZT，1.5?2.0mg/L?6?KT，1.2?1.5mg/L?NAA，15?20g/L蛋黃液，4?6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5?5.8；D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22?26℃，黑暗條件下培養(yǎng)6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18?20天，得完整植株，其中，所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2?1.5mg/L?NAA，0.8?1.0mg/L?IBA，0.8?1.0mg/L多效唑，1?3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5?5.8；第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200?2400lux，光照時(shí)間為14?16h/天；E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無(wú)菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28?30天，得幼苗，其中，所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0?2.5mg/L?IBA，1.5?1.8mg/L?ZT，0.8?1.0mg/L?6?BA，0.8?1.0mg/L多效唑，20?25g/L蛋黃液，3?5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為5.5?5.8；第三光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200?2400lux，光照時(shí)間為14?16h/天，光照時(shí)培養(yǎng)溫度為22?26℃，非光照時(shí)培養(yǎng)溫度為16?20℃；F、將步驟E中得到的所述幼苗移栽到苗床中繼續(xù)培養(yǎng)5?6個(gè)月，得紫莖移栽苗，最后將所述紫莖移栽苗進(jìn)行野外移栽。...
【技術(shù)特征摘要】
1.一種紫莖組織培養(yǎng)快速繁育方法，其特征在于，包括以下步驟：A、選取性狀優(yōu)異的紫莖植株作母本，剪取其當(dāng)年生新梢，取其頂端5-10cm的枝條，將所述枝條用質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2％的洗潔精水溶液浸泡20min，取出，用線狀自來(lái)水沖洗15-20min，再放入天然消毒液中浸泡30min，最后將所述枝條用無(wú)菌水沖洗3-5次并用消毒濾紙除去其表面水分，得外植體，其中，所述天然消毒液的制備方法為：將10-12重量份代代、7-9重量份白千層、7-9重量份藍(lán)桉、6-8重量份大蒜、5-7重量份檸檬草和4-6重量份丁香粉碎至50-100目，加入500重量份的水室溫下浸泡1h，再于60℃下真空回流提取2-4h，過(guò)濾，所得濾液即為所述天然消毒液；B、將步驟A中得到的所述外植體用無(wú)菌解剖刀切割成0.5-0.8cm的小段并轉(zhuǎn)接到叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30天，得第一叢生芽，其中，所述叢生芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT，1.0-1.5mg/L 6-KT，1.0-1.5mg/L 2.4.5-T，15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和5g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；第一光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度為2000-2200lux，光照時(shí)間為14-16h/天；C、將步驟B中得到的所述第一叢生芽用無(wú)菌解剖刀切割成帶有1-2個(gè)芽的小塊并分別轉(zhuǎn)接到增殖培養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)2天后，轉(zhuǎn)入第一光照條件下培養(yǎng)28-30天，得第二叢生芽，其中，所述增殖培養(yǎng)基是以3/4MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L ZT，1.5-2.0mg/L 6-KT，1.2-1.5mg/L NAA，15-20g/L蛋黃液，4-6g/L大豆肽，30g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；D、將步驟C中得到的所述第二叢生芽轉(zhuǎn)接到生根養(yǎng)基中，于22-26℃，黑暗條件下培養(yǎng)6天后，轉(zhuǎn)入第二光照條件下培養(yǎng)18-20天，得完整植株，其中，所述生根培養(yǎng)基是以1/2MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括1.2-1.5mg/L NAA，0.8-1.0mg/L IBA，0.8-1.0mg/L多效唑，1-3g/L大豆肽，35g/L蔗糖和8g/L瓊脂，pH值為5.5-5.8；第二光照條件下培養(yǎng)時(shí)，光照強(qiáng)度2200-2400lux，光照時(shí)間為14-16h/天；E、向所述生根培養(yǎng)基中加入0.5cm厚的無(wú)菌水，敞口培養(yǎng)7天后，將所述完整植株取出，轉(zhuǎn)入壯苗培養(yǎng)基中，第三光照條件下培養(yǎng)28-30天，得幼苗，其中，所述壯苗培養(yǎng)基是以MS培養(yǎng)基為基本培養(yǎng)基，還包括2.0-2.5mg/L IBA，1.5-1.8mg/L ZT，0.8-1.0mg/L 6-BA，0.8-1.0mg/L多效唑，20-25g/L蛋黃液，3-5g/L活性炭，30g/L蔗糖和10g/L瓊脂，pH值為...
【專(zhuān)利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：陳思，
申請(qǐng)(專(zhuān)利權(quán))人：陳思，
類(lèi)型：發(fā)明
國(guó)別省市：廣西;45
還沒(méi)有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。