【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
一、
本專利技術(shù)涉及一種生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，尤其是一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法、凝膠性能測定方法及應(yīng)用。二、
技術(shù)介紹
由于不存在血管和神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)，膝關(guān)節(jié)軟骨幾乎沒有自身修復(fù)能力，特別是形成了大的損傷部位時，會導(dǎo)致關(guān)節(jié)痛以及關(guān)節(jié)功能的喪失，常進(jìn)展為骨關(guān)節(jié)炎。另外，由于老齡或運動導(dǎo)致關(guān)節(jié)的過度使用，膝關(guān)節(jié)軟骨損傷患者越來越多，嚴(yán)重影響了患者的生活質(zhì)量，因此用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)材料的制備方法是一種重要的生物方法，在現(xiàn)有的用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)材料的制備方法中，骨關(guān)節(jié)炎的治療主要著眼于消除患部的疼痛或炎癥，通過在患者部位是給予非類固醇性抗炎癥藥實現(xiàn)，對老年患者腎功能降低，從安全性的角度考慮，難以連續(xù)口服給予非類固醇性抗炎癥藥；也可以將軟骨關(guān)節(jié)液的成分之一透明質(zhì)酸制成制劑得到的產(chǎn)品通過給予關(guān)節(jié)腔內(nèi)，具有改善關(guān)節(jié)的潤滑功能、并且抑制疼痛的作用，但對于軟骨損傷進(jìn)一步進(jìn)展形成的重度骨關(guān)節(jié)炎，必須進(jìn)行人工關(guān)節(jié)置換進(jìn)行治療，現(xiàn)在還沒有一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法、凝膠性能測定方法及應(yīng)用。三、
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的客體是一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，本專利技術(shù)的客體是一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的凝膠性能測定方法，本專利技術(shù)的客體是一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的應(yīng)用。為了克服上述技術(shù)缺點，本專利技術(shù)的目的是提供一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法、凝膠性能測定方法及應(yīng)用，因此提高了軟骨損傷進(jìn)一步進(jìn)展形成的重度骨關(guān)節(jié)炎的非手術(shù)治療效果。為...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，其特征是：其步驟：在人羊膜?PEI體系的混合液與殼聚糖溶液的混合液中加入GP溶液進(jìn)行調(diào)和處理，得到作為生物基質(zhì)凝膠材料的基體的殼聚糖/人羊膜?PEI/GP體系混合液。
【技術(shù)特征摘要】
1.一種用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，其特征是：其步驟：在人羊膜-PEI體系的混合液與殼聚糖溶液的混合液中加入GP溶液進(jìn)行調(diào)和處理，得到作為生物基質(zhì)凝膠材料的基體的殼聚糖/人羊膜-PEI/GP體系混合液。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，其特征是：按照對人羊膜-PEI體系的混合液與殼聚糖溶液的混合液的組合混合液通過GP溶液的反應(yīng)得到最終生物基質(zhì)凝膠材料為技術(shù)要點。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于促進(jìn)軟骨再生修復(fù)的生物基質(zhì)凝膠材料的制備方法，其特征是：其步驟是：第一步驟、人羊膜-PEI體系的制備：(a)、全溶脫細(xì)胞人羊膜制備：把人羊膜用PBS進(jìn)行血跡清除處理，再用生理鹽水進(jìn)行反復(fù)清洗，把人羊膜切成1.8-2.2cm ×2.8-3.2cm，加入0.02% EDTA 溶液后通過振搖方式混合得到中間混合液體Ⅰ，通過離心方式把中間混合液體進(jìn)行分離，棄除上清液后，加入0.23-0.27 mol 醋酸溶液，在溫度為90 ℃的水中緩慢搖動，直至完全溶解中間混合液體Ⅱ，設(shè)定參數(shù)為轉(zhuǎn)速3800-4200rpm、時間28-32min對中間混合液體Ⅱ進(jìn)行離心處理， 提取取上清液，把提取的上清液經(jīng)過壓力為65.55-69.55KPa、溫度為110.6-119.6℃和時間8-12min的消毒處理裝得到中間混合液體Ⅲ，把中間混合液體Ⅲ在-18至-22℃保存；(b)、人羊膜-PEI體系的制備：將PEI溶液稀釋到濃度0.8-1.2%，用NaOH稀溶液調(diào)節(jié)PEI溶液的pH值為4-6，加入中間混合液體Ⅲ使PEI濃度設(shè)置為0.4-0.6%得到人羊膜-PEI體系的混合液，冷凍干燥，第二步驟、殼聚糖/人羊膜-PEI/GP體系的制備：(a)、殼聚糖溶液的制備把脫乙酞度大于90%并且重量為0.18-0.22g的殼聚糖粉溶解到濃度為0.5M 的28-32ml的醋酸溶液中，通過磁力攪拌的方式至完全溶解，然后用醋酸溶液定容至88-102ml，得到濃度為2mg/ml的殼聚糖溶液，在室溫進(jìn)行保存，將攪拌均勻的殼聚糖溶液用牛皮紙封口置于120-122℃的滅菌鍋中消毒9-11分鐘，待滅菌后的殼聚糖溶液溫度降至室溫后放入3-5℃冰箱保存；(b)、甘油磷酸二鈉即GP溶液的制備將GP粉末溶解于三蒸水中，獲得質(zhì)量濃度為54-58%的溶液，通過0.22μm的濾膜過濾除菌后得到GP溶液，在溫度為3-5℃保存；(c)、殼聚糖/人羊膜-PEI/GP制備在超凈臺中，量取配制好的無菌殼聚糖溶液與配制好的人羊膜-PEI溶液，把第二步驟中的(a)步驟得到的殼聚糖溶液與第一步驟中得到的人羊膜-PEI體系的混合液按18-22:1的比例加入無菌燒杯中，把燒杯放到冰上進(jìn)行0.9-1.1小時的超聲處理得到殼聚糖人羊膜溶液，把燒杯中的殼聚糖人羊膜溶液放到冰上進(jìn)行攪拌并且把把第二步驟中的(b)步驟得到的GP溶液緩慢逐步滴入到殼聚糖人羊膜溶液中，滴入的過程中觀察殼聚糖人羊膜溶液是否存在明顯絮狀物質(zhì)出現(xiàn)并且當(dāng)沒有明顯絮狀物質(zhì)出現(xiàn)得到的中間混合液體Ⅳ，使中間混合液體Ⅳ中的GP的最終濃度為580-620mg/ml并且用飽和磷酸二氫鈉調(diào)節(jié)pH值到6.9-7.2得到殼聚糖/人羊膜-PEI/GP體系混合液，當(dāng)絮狀物質(zhì)出現(xiàn)就終止GP溶液滴入...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：田麗娜，羅光會，梁峰，朱麟，楊繼建，
申請(專利權(quán))人：山東景源生物科技有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：山東;37
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