本發(fā)明專利技術(shù)涉及藥物分析技術(shù)領(lǐng)域，公開了一種新化合物，為地西他濱的一種新雜質(zhì)。本發(fā)明專利技術(shù)還公開這一雜質(zhì)的制備方法、該雜質(zhì)的檢測方法以及應(yīng)用。本發(fā)明專利技術(shù)所公開的制備方法操作簡單、成本低。檢測方法能很好地分離出雜質(zhì)，重現(xiàn)性好、靈敏度高。本發(fā)明專利技術(shù)為地西他濱原料和/或制劑的定量及定性分析提供了對照品，提高了地西他濱的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)，從而為地西他濱安全用藥提供了指導(dǎo)，提高了地西他濱的質(zhì)量及用藥安全。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及藥物分析
，具體涉及一種新的化合物即地西他濱雜質(zhì)、應(yīng)用及其HPLC檢測。
技術(shù)介紹
地西他濱(Decitabine)是蘇伯儉股份有限公司(SuperGen)開發(fā)的抗癌藥物，是一個(gè)非選擇性DNA甲基化抑制劑，作為DNA甲基轉(zhuǎn)移酶抑制劑，能阻止DNA中胞嘧啶殘基的甲基化。研究發(fā)現(xiàn)，地西他濱對急性骨髓細(xì)胞白血病(AML)、慢性骨髓細(xì)胞白血病(CML)和骨髓增生異常綜合癥(MDS)具有非常顯著的效果。地西他濱的化學(xué)名為：4-氨基-1-(2-脫氧-β-D-赤式-戊呋喃糖苷基)-1，3，5-三嗪-2(1H)-酮，別名為5-氮雜-2’-脫氧胞苷，分子式為C8H12N4O4，分子量為228.2，CAS登記號為2353-33-5，結(jié)構(gòu)式如式(I)所示。地西他濱通過化學(xué)合成制備得到，在其最終產(chǎn)物中，含有較多的雜質(zhì)，比如目前在Chem.Res.Toxicol.2009,22,1194–1204第1200頁已公開了地西他濱4個(gè)雜質(zhì)，化學(xué)名稱分別為：N1-2-(2-脫氧-β-D-吡喃核糖)脒基脲苷、N1-2-(2-脫氧-α-D-吡喃核糖)脒基脲苷、N1-2-(2-脫氧-β-D-呋喃核糖)脒基脲苷或N1-2-(2-脫氧-α-D-呋喃核糖)脒基脲苷。中國專利技術(shù)專利CN103130855A，公開了地西他濱另一個(gè)主要雜質(zhì)地西他濱α異構(gòu)體，如式(II)所示，該雜質(zhì)沒有藥效活性。另外，中國專利技術(shù)專利CN103130855A，還公開了以通式VI表示的地西他濱中間體。但還有一些雜質(zhì)，還無法分離或制備得到，因而無法進(jìn)行活性及毒副作用等分析。這些雜質(zhì)的存在，極大的影響了用藥安全，因此急需制備得到。
技術(shù)實(shí)現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是提供一種新化合物，即地西他濱雜質(zhì)，分子量為366.07，分子式為C15H15ClN4O5，化學(xué)名稱為：4-氨基-1-(5-O-對氯苯甲酰-3-羥基-2-脫氧-D-核糖)-1,3,5-三嗪-2(1H)-酮)，結(jié)構(gòu)式如式(III)：地西他濱雜質(zhì)質(zhì)譜圖如圖2，從圖2知，地西他濱雜質(zhì)的分子量為366.07。地西他濱雜質(zhì)采用常規(guī)元素分析方法，分析結(jié)果如下表1：表1：元素測定值1(％)測定值2(％)平均值(％)理論值(％)N15.0315.0315.0315.28C49.0649.0849.0749.12H4.044.034.044.12從表1知，地西他濱雜質(zhì)分子式中C原子、H原子、N原子的理論值與測定值相符合。從附圖3知，地西他濱雜質(zhì)是無水化合物。本專利技術(shù)還提供了一種地西他濱雜質(zhì)的用途，即地西他濱雜質(zhì)在檢測地西他濱原料和/或制劑中的應(yīng)用。本專利技術(shù)的另一個(gè)目的是提供一種地西他濱雜質(zhì)的制備方法，包括如下步驟：1)將4-氨基-1-(3,5-二-O-對氯苯甲酰-2-脫氧-D-核糖在醇氨溶液中，攪拌反應(yīng)，獲得白色混濁液體；2)抽濾、洗滌、干燥獲得地西他濱雜質(zhì)粗品；3)將地西他濱雜質(zhì)粗品加入甲醇中，加熱攪拌溶解，抽濾，干燥，獲得地西他濱雜質(zhì)。其中4-氨基-1-(3,5-二-O-對氯苯甲酰-2-脫氧-D-核糖，結(jié)構(gòu)式如下：其中，4-氨基-1-(3,5-二-O-對氯苯甲酰-2-脫氧-D-核糖可以購買市售產(chǎn)品，也可以參照CN101560232A制備獲得。本專利技術(shù)制備方法優(yōu)選方案如下：步驟1)中所述醇氨為甲醇氨、乙醇氨、丙醇氨、異丙醇氨，優(yōu)選甲醇氨。步驟1)中所述醇氨溶液中氨濃度為10％至飽和濃度，優(yōu)選醇氨溶液的飽和氨溶液。其中醇氨溶液可以購買市售產(chǎn)品，也可以在-10至0℃時(shí)，往無水醇溶液中通氨氣，制備含氨濃度為10％至醇氨飽和溶液。步驟1)中所述反應(yīng)溫度為-40℃至10℃，優(yōu)選-15℃；所述攪拌反應(yīng)時(shí)間為4-12小時(shí)，優(yōu)選8小時(shí)。其中反應(yīng)溫度為-40℃至10℃是通過低溫溶液循環(huán)裝置控制溫度。步驟1)中所述攪拌反應(yīng)時(shí)間為4-12小時(shí)，優(yōu)選8小時(shí)。步驟1)中所述4-氨基-1-(3,5-二-O-對氯苯甲酰-2-脫氧-D-核糖與醇氨溶液重量體積比為1:30-50g/ml，優(yōu)選1:40g/ml。步驟2)中所述干燥是在45℃干燥6-12小時(shí)，優(yōu)選8小時(shí)。步驟3)中所述地西他濱雜質(zhì)粗品與甲醇重量體積比為1:40-60g/ml,優(yōu)選1:50g/ml；所述加熱攪拌是加熱至65-75℃，優(yōu)選70℃，攪拌20-40min，優(yōu)選30min；所述干燥是45℃干燥4小時(shí)。本專利技術(shù)方法中真空干燥的真空度大于0.09Mpa；地西他濱雜質(zhì)粗品或純化后地西他濱雜質(zhì)置于真空烘箱里進(jìn)行干燥。本專利技術(shù)的再一個(gè)目的是提供一種地西他濱雜質(zhì)的HPLC的檢測方法，采用VenusilHILIC色譜柱，以乙腈甲酸緩沖液為流動(dòng)相進(jìn)行色譜柱分離后，用紫外檢測器對地西他濱雜質(zhì)進(jìn)行檢測。作為優(yōu)選，所述VenusilHILIC色譜柱型號是250mm*4.6mm*5um；所述乙腈甲酸緩沖液是含0.1％甲酸的乙腈：水體積比為96:4；所述紫外檢測器檢測波長為220nm。流速：1ml/min；進(jìn)樣量：20ul。其中含0.1％甲酸的乙腈可以購買市售產(chǎn)品，也可以采用1升乙腈加1ml甲酸制備獲得。本專利技術(shù)帶來的有益技術(shù)效果如下：1、本專利技術(shù)提供了一種地西他濱重要雜質(zhì)，純度在99％以上，為地西他濱雜質(zhì)檢測定量及定性分析提供對照品，可用于地西他濱原料和/或制劑中雜質(zhì)對照定位，定性或定量使用，對地西他濱用藥安全具有非常重要的指導(dǎo)意義。2、本專利技術(shù)提供的地西他濱雜質(zhì)制備方法，以獲得高純度的地西他濱雜質(zhì)，所用試劑如甲醇飽和氨溶液、甲醇，毒性小；制備粗品和純化均僅需一步，操作簡單，成本低、適于綠色工業(yè)化大生產(chǎn)。3、本專利技術(shù)提供的地西他濱雜質(zhì)的HPLC的檢測方法，采用型號為250mm*4.6mm*5um的VenusilHILIC色譜柱，配合分離效果較好的流動(dòng)相，能較好地分離雜質(zhì)，操作簡捷，10分鐘內(nèi)出現(xiàn)主峰，30分鐘內(nèi)完成檢測，而且重現(xiàn)性好，靈敏度高，從而保證產(chǎn)品質(zhì)量。附圖說明圖1為本專利技術(shù)實(shí)施例1歸一化的HPLC譜圖。圖2為本專利技術(shù)實(shí)施例1的質(zhì)譜圖。圖3為本專利技術(shù)實(shí)施例1的TGA譜圖。具體實(shí)施方式本專利技術(shù)實(shí)施例公開了一種地西他濱雜質(zhì)及其制備和HPLC檢測方法。本領(lǐng)域技術(shù)人員可以借鑒本文內(nèi)容，適當(dāng)改進(jìn)工藝參數(shù)實(shí)現(xiàn)。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動(dòng)對本領(lǐng)域技術(shù)人本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種地西他濱雜質(zhì)，具有如下結(jié)構(gòu)式(III)：
【技術(shù)特征摘要】
2015.03.10 CN 20151010355341.一種地西他濱雜質(zhì)，具有如下結(jié)構(gòu)式(III)：
2.如權(quán)1所述的地西他濱雜質(zhì)在檢測地西他濱原料和/或制劑中的應(yīng)用。
3.權(quán)利要求1所述地西他濱雜質(zhì)的制備方法，包括如下步驟：
1)將4-氨基-1-(3,5-二-O-對氯苯甲酰-2-脫氧-D-核糖在醇氨溶液中，攪
拌反應(yīng)，獲得白色混濁液體；
2)抽濾、洗滌、干燥獲得地西他濱雜質(zhì)粗品；
3)將地西他濱雜質(zhì)粗品加入甲醇中，加熱攪拌溶解，抽濾，干燥，獲
得地西他濱雜質(zhì)。
4.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述醇氨為甲
醇氨、乙醇氨、丙醇氨、異丙醇氨，優(yōu)選甲醇氨。
5.如權(quán)利要求3或4所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述醇氨
溶液中氨濃度為10％至飽和濃度，優(yōu)選醇氨溶液的飽和氨溶液。
6.如權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于，步驟1)中所述反應(yīng)溫度
為-40℃至10℃，優(yōu)選-15℃；所述攪拌反應(yīng)時(shí)間為4-12小時(shí)，優(yōu)選8小時(shí)。
7.如權(quán)利要求3所述的制備方...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：鄭直，楊建科，金燕芬，李國琴，吳紅霞，
申請(專利權(quán))人：杭州華東醫(yī)藥集團(tuán)新藥研究院有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：浙江;33
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