本發明專利技術公開了一種解脲脲原體快速培養方法及其培養基。所述的培養基與現有技術的培養基相比添加了多種的組分，該組分具有快速的提高培養效率能夠有效的鑒定解脲脲原體。具有培養時間短，易于鑒定的優點。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術設及一種解脈脈原體快速培養方法及其培養基，屬于生物培養領域。
技術介紹
脈原體OJreaplasma)是從人體中分離的能自身繁垣的13種支原體之一，屬硬壁 菌口柔膜體綱支原體目支原體科脈原體屬。脈原體介于病毒和細菌之間，是在人工培養 基上能繁殖的最小的原核細胞型微生物，無細胞壁，能自我復制，呈球桿狀，大小為125~ 250nm，分子量為4. 5X108,具高度多形性。脈原體根據分子生物學特征分為兩個生物 群和14個血清型，兩個生物群包括微小脈原體OJreaplasmaparvum，化）和解脈脈原體 OJreaplasmaureal^ixum，化），14個血清型中，基因組較小的血清型1、3、6、14屬于微小 脈原體，占脈原體感染的90%~92%;基因組較大的血清型2、4、5、8~13屬于解脈脈原 體，占脈原體感染的8%~10%。 檢測解脈脈原體和人型支原體的方法有特異性抗體檢測法、PCR法、SouthernBlot 法和分離培養法等。免疫學檢測方法容易出現交叉反應，PCR法容易出現假陰性和假陽性， 而SouthernBlot法對實驗技術要求較高，不適合在醫院內使用。臨床上常用的檢測方法 是分離培養法。國內有關泌尿生殖道支原體培養的實際應用和研究顯示，支原體的鑒定主 要采用液體培養法。雖然液體培養法使用方便、快捷、容易判斷，但是運種方法只能從液體 顏色的改變來推斷支原體是否存在，假陽性率高，準確性不高。而固體培養法則可W通過顯 微鏡觀察到人型支原體和解脈脈原體的菌落，從而確證支原體的存在，較好地解決臨床標 本假陽性率高的問題。但是固體培養法判讀結果的時間較長，因而需要時間較長才能對UU 和ffil引起的泌尿道生殖道感染進行確診，不利于疾病的診斷和治療。 基于現有技術的缺陷，尋找一種能夠快速培養解脈脈原體固體培養基是現在迫切 需要解決的技術問題。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種快速檢測支原體的固體培養基及其制備方法。 本專利技術所采用的技術方案是： -種快速培養解脈脈原體的固體培養基，其配方如下： 瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉lOg，肥陽S緩沖劑3g，k半脫氨酸0. 5g，憐酸二氨 鐘5g，脈1. 5g，硫酸儘0. 2g，葡萄糖Ig~3g，馬血清300ml，抗生素700, 000IU，橫胺甲基異 惡挫3g，甲氧節氨喀晚5mg，多粘菌素6mg，RPMI1640細胞培養基5g，蒸饋水定容至1000ml。 本專利技術所得解脈脈原體培養基具有檢出可靠、支原體分離率高的特點，同時去除 精氨酸，不利于人型支原體生長，從而使得解脈脈原體的鑒定結果更加準確。 本專利技術的有益效果是： 使用本專利技術的固體培養基可選擇性地培養解脈脈原體，通過菌落的形成確證支原 體的存在，并能從菌落形態判斷支原體的類型，因此，相對于液體培養基常出現假陽性的情 況，本專利技術的固體培養基在診斷泌尿生殖道感染方面的準確性大大提高。除此w外，在支原 體菌落形成時間上，目前固體培養基的結果判讀時間為24小時，而使用本專利技術的支原體培 養基判讀結果只需要10小時，大大縮短了檢測時間，實現了解脈脈原體的快速檢測，并且 所形成的菌落比在市售培養基上形成的菌落要大得多，為醫生制訂合理的治療方案提供了 快速可靠的檢驗結果。【具體實施方式】 實施例1培養基的配置 培養基制備：共設5組，分別為培養基1-4四組和對照1組。對照1組為支原體肉 湯固體培養基。 其中培養基1為按照瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉lOg，肥陽S緩沖劑3g，k半 脫氨酸0. 5g，憐酸二氨鐘5g，脈1. 5g，硫酸儘0. 2g，葡萄糖Ig~3g，馬血清300ml，抗生素 700, 000IU，橫胺甲基異惡挫3g，甲氧節氨喀晚5mg，多粘菌素6mg，RPMI1640細胞培養基5g 的配方配置，蒸饋水定容1000ml。[001引培養基2為按照瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉lOg，肥陽S緩沖劑3g，k半脫氨 酸0. 5g，憐酸二氨鐘5g，脈1. 5g，硫酸儘0. 2g，葡萄糖Ig~3g，馬血清300ml，精氨酸2g，抗 生素700, 000IU，甲氧節氨喀晚5mg，多粘菌素6mg，RPMI1640細胞培養基5g的配方配置，蒸 饋水定容1000ml。 培養基3為按照瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉lOg，肥陽S緩沖劑3g，k半脫 氨酸0. 5g，憐酸二氨鐘5g，脈1. 5g，硫酸儘0. 2g，葡萄糖Ig~3g，馬血清300ml，抗生素 700, 000IU，橫胺甲基異惡挫3g，多粘菌素6mg，RPMI1640細胞培養基5g的配方配置，蒸饋 水定容1000ml。 其中培養基4為按照瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉lOg，肥陽S緩沖劑3g，k半 脫氨酸0. 5g，憐酸二氨鐘5g，脈1. 5g，硫酸儘0. 2g，葡萄糖Ig~3g，馬血清300ml，抗生素 700, 000IU，甲氧節氨喀晚5mg，多粘菌素6mg，RPMI1640細胞培養基5g的配方配置，蒸饋水 定容1000ml。 實施例2培養基培養效果驗證 標本采集培養方法： 婦科患者的泌尿生殖道標本拭子10例，均為解脈脈原體陽性，通過擴培，分為5 組，每組3個平行樣。人型支原體標本作為對照。分別用拭子接種固體培養基，然后36Γ培 養，10小時后檢驗培養結果。 結果判定（顏色） 實施例3培養基培養準確性驗證 取臨床標本10例，接種固體培養基1，然后36°C培養，10小時后檢驗培養結果。通 過檢驗發現，有4例為解脈脈原體陽性。 通過CN102409098A中的解脈脈原體PCR檢測試劑盒進行準確性鑒定，發現4例均 為解脈脈原體陽性，結果準確。其余6例沒有檢測到解脈脈原體。 結論：培養基1可W有效的提高解脈脈原體標本檢驗的準確率，減少假陰性和假 陽性的發生，使婦科患者的臨床診斷正確率進一步加強?！局鳈囗棥?. 一種培養基，其特征在于：能快速培養解脲脲原體。2. 如權利要求1所述的培養基，其特征在于：其包括瓊脂粉12g，新鮮牛肉提取純粉 10g，HEPES緩沖劑3g，L-半胱氨酸0. 5g，磷酸二氫鉀5g，脲1. 5g，硫酸猛0. 2g，葡萄糖lg~ 3g，馬血清300ml，抗生素700, 000IU，磺胺甲基異惡唑3g，甲氧芐氨嘧啶5mg，多粘菌素6mg， RPMI1640細胞培養基5g，蒸餾水定容1000ml。3. -種鑒別解脲脲原體的方法，其特征在于使用權利要求1-2所述的培養基?！緦＠勘緦＠夹g公開了一種解脲脲原體快速培養方法及其培養基。所述的培養基與現有技術的培養基相比添加了多種的組分，該組分具有快速的提高培養效率能夠有效的鑒定解脲脲原體。具有培養時間短，易于鑒定的優點。【IPC分類】C12Q1/04【公開號】CN105331671【申請號】CN201510829005【專利技術人】劉慧 , 陳艷萍, 代玉龍, 辛克盛 【申請人】劉慧【公開日】2016年2月17日【申請日】2015年11月20日本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種培養基，其特征在于：能快速培養解脲脲原體。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：劉慧，陳艷萍，代玉龍，辛克盛，
申請(專利權)人：劉慧，
類型：發明
國別省市：山東;37
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