本發明專利技術涉及一種膠原蛋白的提取工藝，其先將豬跟腱洗凈粉碎成豬跟腱顆粒，再將豬跟腱顆粒脫脂，再將脫脂后的豬跟腱顆粒放入乙酸溶液中并加入胃蛋白酶，將它們充分混勻，使用磁力攪拌在常溫下浸泡，獲得酶解液；再將酶解液過濾、離心，獲得膠原蛋白溶液粗品；再用乙酸溶液對膠原蛋白溶液粗品透析，最終剩下的透析液即為膠原蛋白提取液。本發明專利技術以豬跟腱為原材料，采用酸酶結合提取膠原蛋白，可促進豬跟腱的深加工利用，避免豬跟腱潛在巨大價值的埋沒浪費。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種膠原蛋白的提取工藝，屬于于蛋白基生物材料領域。
技術介紹
膠原蛋白是一類在所有哺乳動物中都存在的纖維狀、大分子蛋白質，在哺乳動物體內是由結締組織細胞和其他類型的細胞(如肝臟、肺、脾及腦組織細胞)所分泌的，作為骨骼與皮膚的主要組成部分，它們是哺乳動物細胞中最豐富的蛋白質，約占整個細胞總蛋白的1/4。典型的膠原分子是長且堅韌的三螺旋結構，由2條α 1鏈和1條α 2多肽鏈組成，3條α肽鏈交互纏繞形成了繩索狀的超螺旋結構，每種膠原蛋白至少含有一段三螺旋結構區域。同樣的動物跟腱中含有大量的膠原。膠原蛋白是一類蛋白質家族，現在已發現27種以上不同類型的膠原蛋白，其中I型、II型、III型以及IV型膠原蛋白是通過蛋白質水平上的一級結構分析發現的，其他則是通過在核酸水平上的膠原域的相似性分析發現的。膠原蛋白與其他蛋白質一樣，也是由α-氨基酸組成的，并且具有1?4級結構和典型的三螺旋結構。膠原蛋白因其具有低免疫原性、細胞適應性和細胞增殖作用、組織相容性、可生物降解性等特性，而被廣泛應用于制備止血敷料、人工皮膚、血管、神經、軟骨、粘膜組織以及骨組織等領域的研究中，并且逐漸在拓展化工、食品相關方面的領域。但現在對于豬跟腱料提取膠原并應用在生產中鮮有研究。而我國畜牧業發展迅速，全國豬肉年產量、肉制品及副產品加工總值逐年上升。我國是一個養豬大國，隨著科學技術的不斷發展，養豬業也得到了飛速的發展，豬出欄數和豬肉產量保持逐年增長的勢頭。在生豬產品的生產過程中大量的優質膠原蛋白源一一豬跟腱潛在的巨大價值被埋沒。
技術實現思路
本專利技術的目的在于克服現有技術中存在的不足，提供一種一種膠原蛋白的提取工藝，其以豬跟腱為原材料，采用酸酶結合提取膠原蛋白，可促進豬跟腱的深加工利用，避免豬跟腱潛在巨大價值的埋沒浪費。按照本專利技術提供的技術方案:一種膠原蛋白的提取工藝，其特征在于包括如下步驟: (1)豬跟腱顆粒的準備:將豬跟腱洗干凈，粉碎成豬跟腱顆粒； (2)豬跟腱顆粒的脫脂:將步驟(1)中制得的豬跟腱顆粒進行脫脂； (3)酶解:將步驟(2)脫脂后的豬跟腱顆粒放入濃度為0.1%?0.5%的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶；豬跟腱顆粒和胃蛋白酶的放入比例為:每100?150毫克的0.1%?0.5%乙酸溶液中加入5?10克豬跟腱顆粒和1?5克的胃蛋白酶；然后將它們充分混勻，使用磁力攪拌在常溫下浸泡30?60小時，獲得酶解液； (4)過濾:將步驟(3)獲得的酶解液使用紗布過濾除渣，然后真空抽濾； (5)離心:將步驟(4)過濾后的酶解液使用離心機進行離心，然后取上清液，上清液為膠原蛋白溶液粗品； (6)透析:將步驟(5)獲得的膠原蛋白溶液粗品先用0.05mol/L?0.155mol/L的乙酸溶液透析40?50小時，再以蒸餾水透析20?25小時，最終剩下的透析液即為膠原蛋白提取液。作為本專利技術的進一步改進，所述步驟(1)中豬跟腱顆粒的獲得方法具體為:將豬跟腱洗干凈，沿著跟腱纖維方向切成厚度不超過5mm的薄片，然后再切碎、烘干，最后放入粉碎機中粉碎，獲得豬跟腱顆粒。作為本專利技術的進一步改進，所述步驟(2)中豬跟腱顆粒的脫脂方法具體為:將制得的豬跟腱顆粒放入濾紙包內，用長鑷子將濾紙包放入抽提筒中，注入1?2倍一次虹吸量的石油醚，使樣品包完全浸沒在石油醚中；然后將抽提器各部分連接好，接通冷凝水水流，在水溫為70?80°C的恒溫水浴中進行脫脂抽提，抽提完畢后，用長鑷子取出濾紙包，放通風處使石油醚揮發。作為本專利技術的進一步改進，所述步驟(2)中進行脫脂抽提操作的抽提室室溫為12 ?25Γ。作為本專利技術的進一步改進，所述步驟(3)中所用的胃蛋白酶選用酶活力大于等于1200u/g的胃蛋白酶。作為本專利技術的進一步改進，所述步驟(5)中離心的工藝參數為:離心機轉速5000r/min，離心時間 90min。作為本專利技術的進一步改進，所述膠原蛋白提取工藝中的酶解到透析均是在溫度為5?35°C、pH值為1.5?3的條件下進行。本專利技術與現有技術相比，具有如下優點:本專利技術以豬跟腱為原材料，采用酸酶結合提取膠原蛋白，可促進豬跟腱的深加工利用，避免豬跟腱潛在巨大價值的埋沒浪費。【具體實施方式】下面結合具體實施例對本專利技術作進一步說明。實施例1 (1)、豬跟腱顆粒的準備:將豬跟腱洗干凈，沿著跟腱纖維方向切成厚度不超過5mm的薄片，然后再切碎、烘干，最后放入粉碎機中粉碎，獲得豬跟腱顆粒； (2)、豬跟腱顆粒的脫脂:取步驟(1)中制得的豬跟腱顆粒25g放入濾紙包內，用長鑷子將濾紙包放入抽提筒中，注入1.67倍一次虹吸量的石油醚，使樣品包完全浸沒在石油醚中；然后將抽提器各部分連接好，接通冷凝水水流，在水溫為70°C的恒溫水浴中進行脫脂抽提，抽提完畢后，用長鑷子取出濾紙包，放通風處使石油醚揮發；脫脂抽提操作的抽提室室溫為18°C ; (3)酶解:將步驟(2)脫脂后的豬跟腱顆粒放入濃度為0.1%的乙酸溶液中，并加入酶活力多1200 u/g的胃蛋白酶；豬跟腱顆粒和胃蛋白酶的放入比例為:每100毫克的0.1%乙酸溶液中加入6克豬跟腱顆粒和1克的胃蛋白酶；然后將它們充分混勻，使用磁力攪拌在常溫下浸泡50小時，獲得酶解液； (4)過濾:將步驟(3)獲得的酶解液使用紗布進行過濾除渣，然后進行抽濾； (5 )離心:將步驟(4)過濾后的溶液使用離心機進行離心，離心機轉速為5000r/min，離心時間90min ;然后取上清液，上清液為膠原蛋白粗品； (6)透析:將步驟(5)獲得的膠原蛋白粗品先用0.lmol/L的乙酸溶液透析45小時，再以蒸餾水透析23小時，最終剩下的透析液即為膠原蛋白提取液。在實施例1中，所述膠原蛋白提取工藝中的酶解到透析均是在溫度為5?35°C、pH值為1.5?3的條件下進行。當前第1頁1 2 本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種膠原蛋白的提取工藝，其特征在于包括如下步驟：（1）豬跟腱顆粒的準備：將豬跟腱洗干凈，粉碎成豬跟腱顆粒；（2）豬跟腱顆粒的脫脂：將步驟（1）中制得的豬跟腱顆粒進行脫脂；（3）酶解：將步驟（2）脫脂后的豬跟腱顆粒放入濃度為0.1%～0.5%的乙酸溶液中，并加入胃蛋白酶；豬跟腱顆粒和胃蛋白酶的放入比例為：每100～150毫克的0.1%～0.5%乙酸溶液中加入5～10克豬跟腱顆粒和1～5克的胃蛋白酶；然后將它們充分混勻，使用磁力攪拌在常溫下浸泡30～60小時，獲得酶解液；（4）過濾：將步驟（3）獲得的酶解液使用紗布過濾除渣，然后真空抽濾；（5）離心：將步驟（4）過濾后的酶解液使用離心機進行離心，然后取上清液，上清液為膠原蛋白溶液粗品；（6）透析：將步驟（5）獲得的膠原蛋白溶液粗品先用0.05mol/L～0.155mol/L的乙酸溶液透析40～50小時，再以蒸餾水透析20～25小時，最終剩下的透析液即為膠原蛋白提取液。
【技術特征摘要】
【專利技術屬性】
技術研發人員：王利強，劉迪，楊思聰，王琳，沈俊逸，楊振宇，李思聰，
申請(專利權)人：江南大學，
類型：發明
國別省市：江蘇;32
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