本發(fā)明專利技術(shù)屬分析化學(xué)領(lǐng)域，本發(fā)明專利技術(shù)公開了一種用HPLC-ELSD分離測定重酒石酸卡巴拉汀中N-乙基-N-甲基氨甲酸的方法。該方法用親水作用液相色譜填料（HILIC）的色譜柱，以一定比例的緩沖鹽溶液-有機(jī)相為流動相，可以定量測定重酒石酸卡巴拉汀中N-乙基-N-甲基氨甲酸的含量，從而有效控制重酒石酸卡巴拉汀的質(zhì)量。本發(fā)明專利技術(shù)方法專屬性強，準(zhǔn)確度高，操作簡便。
【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)屬于藥物分析
，具體而言，設(shè)及一種重酒石酸卡己拉汀的質(zhì)量控 制方法，尤其設(shè)及重酒石酸卡己拉汀中N-乙基-N-甲基氨甲酸含量的檢測方法。
技術(shù)介紹
重酒石酸卡己拉汀是一種氨基甲酸類腦選擇性乙酷膽堿醋酶抑制劑，通過延緩功 能完整的膽堿能神經(jīng)元對釋放乙酷膽堿的降解和促進(jìn)膽堿能神經(jīng)傳導(dǎo)，選擇性增強腦皮質(zhì) 和海馬等部位乙酷膽堿的效應(yīng)，從而有效治療輕、中度阿爾茨海默型癡呆癥。其化學(xué)名為乙 基甲基氨甲酸-3-苯醋心酒石酸鹽，分子式為。化2成〇2 ?〔品〇6。 結(jié)構(gòu)式為：N-乙基-N-甲基氨甲酯氯是重酒石酸卡己拉汀的關(guān)鍵起始物料，在合成該化合物的過 程中，它極易水解成N-乙基-N-甲基氨甲酸。而N-乙基-N-甲基氨甲酸可能會由于去除 不完全引入到原料藥終產(chǎn)品中，因此需對N-乙基-N-甲基氨甲酸加W控制，其結(jié)構(gòu)式為：對于合成重酒石酸卡己拉汀中引入的N-乙基-N-甲基氨甲酸，在原料藥中需進(jìn)行質(zhì)量 控制，因此，實現(xiàn)重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸的分離，對其合成和質(zhì)量控制 方面具有重要的現(xiàn)實意義。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)人通過大量實驗摸索了一種分離重酒石酸卡己拉汀中的N-乙基-N-甲基 氨甲酸，并測定其化學(xué)純度的方法，保證重酒石酸卡己拉汀的質(zhì)量可控。 本專利技術(shù)所述的一種測定重酒石酸卡己拉汀中的N-乙基-N-甲基氨甲酸含量的方 法，是采用親水作用液相色譜填料（HILIC)的色譜柱，W-定比例的緩沖鹽溶液-有機(jī)相為 流動相； 上述所述的HILIC親水性色譜柱，選自Merck品牌。 上述所說的有機(jī)相來自W下化合物：甲醇、乙臘，優(yōu)選乙臘。 上述所說的緩沖鹽可為甲酸鹽或乙酸鹽，優(yōu)選乙酸錠。 本專利技術(shù)所述的分離測定方法，可按照W下方法實現(xiàn)： 1) 取重酒石酸卡己拉汀及N-乙基-N-甲基氨甲酸的樣品適量，分別用乙臘溶解樣品， 配制成每1血含重酒石酸卡己拉汀及N-乙基-N-甲基氨甲酸0. 1~1. 5mg的樣品溶液； 2) 設(shè)置流動相流速為0. 5~1. 5血/min; 3) 流動相A為5~30mmol/L的乙酸錠溶液；流動相B為乙臘或甲醇； 4) 蒸發(fā)光檢測器所使用的漂移管溫度為30~80°C，增益值為5~12 ; 5) 取1)的樣品溶液10~50iiL注入液相色譜儀，完成重酒石酸卡己拉汀及N-乙 基-N-甲基氨甲酸的分離測定。其中： 高效液相色譜儀的型號，無特別要求，本專利技術(shù)采用的色譜儀品牌為島津： LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，化SD-LTII，CTO-lOASvp 色譜柱出ILIC(Se如anti;ZIC醬-HILIC，250X4. 6mm，5ym) 流動相：20mmol/L乙酸錠-乙臘（20:80) 流速：1. 0mL/min進(jìn)樣體積：l〇yL 化SD參數(shù)： 漂移管溫度：40 °C載氣壓力：350 KPa Gain值：9。 本專利技術(shù)采用HILIC(SeCiuanti切C|8、-H化lC，250X4.6mm，5ym)色譜柱，能夠有效分離 重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸。本專利技術(shù)解決了重酒石酸卡己拉汀與N-乙 基-N-甲基氨甲酸的分離和含量測定問題，從而確保了重酒石酸卡己拉汀原料藥的質(zhì)量可 控（結(jié)果見附圖1-5)【附圖說明】 圖1為實施例1時的重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸的HPLC圖； 圖2為實施例1時的重酒石酸卡己拉汀的HPLC圖； 圖3為實施例2時的溶劑HPLC圖； 圖4為實施例2時的重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸的HPLC圖； 圖5為實施例2時的重酒石酸卡己拉汀的HPLC圖；【具體實施方式】： W下實施例用于進(jìn)一步理解本專利技術(shù)，但不限于本實驗的范圍。 實施例1 儀器與條件 高效液相色譜儀的型號，無特別要求，本專利技術(shù)采用的色譜儀品牌為島津： LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，化SD-LTII，CTO-lOASvp 色譜柱出ILIC(Se如ant繁ZIC衰-HILIC，250X4. 6mm，5ym) 流動相：20mmol/L乙酸錠-乙臘（15:85) 流速：1. 0mL/min進(jìn)樣體積：1〇yL 化SD參數(shù)： 漂移管溫度：40 °C載氣壓力：350 KPa Gain值：9。 實驗步驟 取重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸適量，分別用乙臘溶解樣品，配制成含 重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸約0.5mg/血的樣品溶液。按上述條件進(jìn)行 液相色譜分析，記錄色譜圖。結(jié)果見附圖1~2,圖1中保留時間39. 898min的色譜峰為重 酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸的色譜峰重疊；圖2中保留時間39. 378min的 色譜峰為重酒石酸卡己拉汀的色譜峰，兩者分離度不符合要求。 陽〇1引 實施例2 儀器與條件 高效液相色譜儀的型號，無特別要求，本專利技術(shù)采用的色譜儀品牌為島津： LC-20AT，CBM-20A，SIL-20AC，化SD-LTII，CTO-lOASvp 色譜柱出ILIC(Se如ant繁ZIC蠢-HILIC，250X4. 6mm，5ym) 流動相：20mmol/L乙酸錠-乙臘（25:75) 流速：1. 0mL/min進(jìn)樣體積：1〇yL 化SD參數(shù)： 漂移管溫度：40°C載氣壓力：350KPa Gain值：9。 對上述重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸分析方法的W下項目進(jìn)行了 驗證： 1、系統(tǒng)適用性試驗 在上述確定的色譜條件下，取重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸各適量，分 別用乙臘溶解樣品，配制成含重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸約0. 5mg/血的 樣品溶液；另取乙臘適量作為空白溶劑。按上述條件進(jìn)行高效液相色譜分析，記錄色譜圖。 結(jié)果見附圖3~5,圖3為溶劑色譜圖；圖4中保留時間5. 024min的色譜峰為重酒石酸卡己 拉汀，10. 700min的色譜峰為N-乙基-N-甲基氨甲酸；圖5中保留時間4. 971min的色譜 峰重酒石酸卡己拉汀，可W看出在該條件下重酒石酸卡己拉汀與N-乙基-N-甲基氨甲酸之 間分離度符合要求，同時，各物質(zhì)峰純度和單點闊值均符合要求。 2、專屬性 取重酒石酸卡己拉汀樣品適量，分別于各苛刻條件下進(jìn)行破壞試驗，考察破壞產(chǎn)物與 主成分峰的分離情況。 酸破壞：取本品適量(約含棟桐酸帕利贓酬5mg)，精密稱定，置于10mL試管中， 加1mol/L鹽酸1mU放置2h，加1mol/L氨氧化鋼溶液中和至中性，加甲醇溶解并稀釋 至刻度，搖勻。 堿破壞：取本品適量(約含棟桐酸帕利贓酬5mg)，精密稱定，置于10mL試管中， 加1mol/L氨氧化鋼1mU放置2h，加1mol/L鹽酸溶液中和至中性，加甲醇溶解并稀釋 至刻度，搖勻。 氧化破壞：取本品適量(約含棟桐酸帕利贓酬5mg)，精密稱定，置于10mL試管 中，加30%雙氧水1mU放置2h，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。 高溫破壞：取本品適量(約含棟桐酸帕利贓酬5mg)，精密稱定，置于10血試管 中，置于60 °C烘箱中放置15天，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。光照破壞：取本品適量(約含棟桐酸帕利贓酬5mg)，精密稱定，置于10mL試管 中，在4500 ± 500LUX放置15天，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻。 取各破壞條件下的本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點】
一種測定重酒石酸卡巴拉汀中N?乙基?N?甲基氨甲酸的方法，其特征在于：采用HPLC?ELSD聯(lián)用的方法，用親水作用液相色譜填料（HILIC）的色譜柱，以一定比例緩沖鹽溶液?有機(jī)相為流動相。
【技術(shù)特征摘要】
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：譚麗媛，王宇杰，郭夏，
申請(專利權(quán))人：萬特制藥海南有限公司，
類型：發(fā)明
國別省市：海南;66
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