方法包括調(diào)節(jié)兩種分析物同系物之一對(duì)在用于確定樣品中的兩種分析物同系物的總量的測(cè)定中得到的信號(hào)的量的貢獻(xiàn)。采用一種非測(cè)定受體，其對(duì)所述兩種分析物同系物中的任何一種具有更大結(jié)合親和力，所述任何一種對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)要進(jìn)行調(diào)節(jié)。非測(cè)定受體的量足以實(shí)現(xiàn)所述分析物同系物對(duì)所述信號(hào)的貢獻(xiàn)的調(diào)節(jié)。進(jìn)行用于確定兩種分析物同系物的總量的測(cè)定，其中所述測(cè)定利用至少一種測(cè)定抗體。
【技術(shù)實(shí)現(xiàn)步驟摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】【專利說明】用于分析物同系物的測(cè)定本申請(qǐng)要求享有于2013年4月12日提交的非臨時(shí)申請(qǐng)美國(guó)系列號(hào)13/861,422的權(quán)益。前述申請(qǐng)的整體內(nèi)容明確地通過引用并入本文。
技術(shù)介紹
本專利技術(shù)涉及用于準(zhǔn)確地確定疑似含有分析物同系物的樣品中的分析物同系物的總量的組合物、方法和試劑盒。許多小分子化合物或半抗原諸如，例如藥物和維生素，以同系物形式存在，它們中的每一種直接地或通過它們的代謝產(chǎn)物中的一種或多種的中間性而為化合物的總生物學(xué)功能做出貢獻(xiàn)。為了得到活性分析物的總量的準(zhǔn)確測(cè)量，重要的是測(cè)量基本上等摩爾量的同系物形式，因?yàn)?，在同系物形式的量不相等的情況下，在測(cè)定中得到的信號(hào)是畸變的，且不會(huì)代表同系物形式的總量。圍繞基本上等摩爾量的分析物同系物的測(cè)量的一些問題包括，例如，難以得到同樣地結(jié)合分析物同系物的抗體，和被內(nèi)源性結(jié)合物質(zhì)結(jié)合的分析物同系物的不相等釋放。需要用于準(zhǔn)確的和靈敏的確定在疑似含有這類分析物的樣品中以同系物形式(它們都是有活性的)存在的分析物的總量的試劑和方法。例如，需要用于準(zhǔn)確地和靈敏地確定維生素D的同系物形式的濃度的試劑和方法。專利技術(shù)概述 根據(jù)本文描述的原理的一些實(shí)例涉及這樣的方法:其調(diào)節(jié)兩種分析物同系物之一對(duì)在用于確定樣品中的兩種分析物同系物的總量的測(cè)定中得到的信號(hào)的量的貢獻(xiàn)。在所述方法中，在測(cè)定介質(zhì)中提供組合。所述組合包含:疑似含有兩種分析物同系物的樣品；用于進(jìn)行測(cè)定的試劑，所述測(cè)定用于確定樣品中的兩種分析物同系物的總量，其中所述試劑包含至少一種結(jié)合所述兩種分析物同系物的測(cè)定受體；和非測(cè)定受體，其對(duì)所述兩種分析物同系物中的任何一種具有更大結(jié)合親和力，所述任何一種對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)要進(jìn)行調(diào)節(jié)。非測(cè)定受體的量足以實(shí)現(xiàn)所述分析物同系物對(duì)所述信號(hào)的貢獻(xiàn)的調(diào)節(jié)。進(jìn)行用于確定兩種分析物同系物的總量的測(cè)定。根據(jù)本文描述的原理的一些實(shí)例涉及確定樣品中的第一種分析物同系物和第二種分析物同系物的量的方法。在所述方法中，在測(cè)定介質(zhì)中提供組合。所述組合包含:疑似含有所述第一種分析物同系物和所述第二種分析物同系物的樣品；試劑，其用于進(jìn)行所述第一種分析物同系物和所述第二種分析物同系物的測(cè)定；和非測(cè)定受體，其對(duì)所述第一種分析物同系物或所述第二種分析物同系物中的任何一種具有更大結(jié)合親和力，所述任何一種對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)要進(jìn)行調(diào)節(jié)。用于進(jìn)行測(cè)定的試劑包含:測(cè)定抗體，其能夠結(jié)合所述第一種分析物同系物和所述第二種分析物同系物中的每一種以形成復(fù)合物；和信號(hào)產(chǎn)生系統(tǒng)的成員，其產(chǎn)生與所述復(fù)合物中的所述第一種分析物同系物和所述第二種分析物同系物的量有關(guān)的信號(hào)。非測(cè)定受體的量足以實(shí)現(xiàn)所述第一種分析物同系物或所述第二種分析物同系物對(duì)所述信號(hào)的貢獻(xiàn)的調(diào)節(jié)。在用于形成所述復(fù)合物的條件下溫育所述測(cè)定介質(zhì)。確定得自所述復(fù)合物的信號(hào)的量，并與所述樣品中所述第一種分析物同系物和所述第二種分析物同系物的總量關(guān)聯(lián)。根據(jù)本文描述的原理的一些實(shí)例涉及確定樣品中的25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素隊(duì)的總量的方法。在測(cè)定介質(zhì)中提供組合。所述組合包含:疑似含有25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素D 3的樣品，用于進(jìn)行25-羥基維生素D 2和25-羥基維生素D 3的測(cè)定的試劑，和對(duì)25-羥基維生素隊(duì)具有更大結(jié)合親和力的非測(cè)定抗體。用于進(jìn)行測(cè)定的試劑包含:測(cè)定抗體，其能夠結(jié)合25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素D 3以形成復(fù)合物；和信號(hào)產(chǎn)生系統(tǒng)的成員，其產(chǎn)生與25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素D 3復(fù)合物的量有關(guān)的信號(hào)。非測(cè)定抗體的量足以實(shí)現(xiàn)25-羥基維生素D2對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)的調(diào)節(jié)。在用于形成所述復(fù)合物的條件下溫育所述測(cè)定介質(zhì)。確定得自所述復(fù)合物的信號(hào)的量，并與所述樣品中25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素D 3的總量關(guān)聯(lián)。附圖簡(jiǎn)述 圖1是維生素D的同系物形式，即，25-羥基維生素隊(duì)和25-羥基維生素D 3的化學(xué)式的描繪。特定實(shí)施方案詳述一般討論 根據(jù)本文描述的原理的方法涉及調(diào)節(jié)兩種或更多種分析物同系物對(duì)在用于確定樣品中分析物同系物的總量的測(cè)定中得到的信號(hào)的量的貢獻(xiàn)。為何分析物同系物對(duì)在測(cè)定中得到的信號(hào)的貢獻(xiàn)可能導(dǎo)致樣品中分析物同系物的總量的不準(zhǔn)確確定，存在許多原因。這些原因包括，但不限于:測(cè)定抗體沒有同樣地結(jié)合存在于樣品中的不同分析物同系物，和/或分析物同系物之一可以被置換試劑從內(nèi)源性結(jié)合物質(zhì)置換的事實(shí)，所述置換試劑的量大于另一種分析物同系物的量。以上兩種情形引起在以下情況下產(chǎn)生的不等量信號(hào)的產(chǎn)生:分析物同系物之一對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)會(huì)提供錯(cuò)誤地反映原始樣品中的分析物同系物的總量的總信號(hào)量。例如，作為例證和不進(jìn)行限制，存在2個(gè)為25-羥基維生素D2的較高測(cè)定信號(hào)做出貢獻(xiàn)的潛在因素。第一個(gè)因素是，25-羥基維生素隊(duì)與維生素D結(jié)合蛋白的結(jié)合強(qiáng)度低于25-羥基維生素D3，所以25-羥基維生素隊(duì)更容易從維生素D結(jié)合蛋白釋放并造成可被測(cè)定抗體接近的游離25-羥基維生素D2分子的較高濃度。第二個(gè)因素是，在一些情況下，測(cè)定抗體對(duì)25-羥基維生素D2類似物的親和力大于25-羥基維生素D 3o兩個(gè)因素一起起作用可以導(dǎo)致來自25-羥基維生素D2的信號(hào)遠(yuǎn)高于來自25-羥基維生素D3的信號(hào)，這是非等摩爾濃度的根本原因。通過監(jiān)測(cè)針對(duì)校準(zhǔn)器(其跨越分析物的疑似目標(biāo)濃度范圍)得到的信號(hào)的量的差異，可以監(jiān)測(cè)特定測(cè)定形式在醫(yī)學(xué)決策范圍的低端處的性能。例如，校準(zhǔn)器(諸如，例如，校準(zhǔn)器LI和校準(zhǔn)器L2，或校準(zhǔn)器L2和校準(zhǔn)器L3，或校準(zhǔn)器LI和校準(zhǔn)器L4)的信號(hào)之間的大差異或分離是期望的。在一些實(shí)例中，可以采用5個(gè)校準(zhǔn)器，其任意命名為L(zhǎng)1-L5。通過如下確定信號(hào)的量，可以評(píng)價(jià)信噪比:使用不含有分析物的校準(zhǔn)器，即任意命名的校準(zhǔn)器LI(背景);和針對(duì)含有高于零的第一種已知量的分析物的校準(zhǔn)器(任意命名的校準(zhǔn)器L2)得到的信號(hào)的量。該評(píng)價(jià)還可以包括，使用校準(zhǔn)器LI和含有高于零的第二種已知量的分析物的校準(zhǔn)器(任意命名的L3)的信號(hào)的量，確定信號(hào)的量。這樣的評(píng)價(jià)也可以包括使用校準(zhǔn)器L4和L5的這類確定，其中每個(gè)校準(zhǔn)器含有已知增加量的分析物。取決于測(cè)定形式，信號(hào)的差異可以是信號(hào)的增加或信號(hào)的減小。例如，對(duì)于競(jìng)爭(zhēng)性測(cè)定，在大多數(shù)情況下，將存在與分析物的濃度有關(guān)的信號(hào)的減??；和，對(duì)于夾心測(cè)定，在大多數(shù)情況下，將存在與分析物的濃度有關(guān)的信號(hào)的增加。將在從使用已知分析物濃度的校準(zhǔn)器上測(cè)定得到的信號(hào)的量相對(duì)于每個(gè)校準(zhǔn)器中的分析物濃度繪圖，以形成校正曲線或標(biāo)準(zhǔn)曲線。將在含有未知量的信號(hào)的樣品上在測(cè)定中得到的結(jié)果與校正曲線進(jìn)行對(duì)比，以基于在分析物測(cè)定中得到的信號(hào)的量確定未知樣品中分析物的量。在分析物同系物或它們各自的代謝產(chǎn)物是有效的情況下，根據(jù)本文描述的原理的方法測(cè)量?jī)煞N或更多種分析物同系物的總量。短語(yǔ)“分析物同系物”或“分析物的同系物形式”表示這樣的分析物形式:其在結(jié)構(gòu)和功能上相關(guān)，且彼此相差一個(gè)或多個(gè)化學(xué)部分，諸如，例如，亞甲基、甲基、氫、酮基和例如差向異構(gòu)體。術(shù)語(yǔ)“有效”表示就特別的功能而言分析物的活性程度，其可以是例如生物學(xué)功能，諸如，例如骨代謝。例如，物質(zhì)的生物學(xué)活性涉及物質(zhì)的增強(qiáng)或抑制生物學(xué)功能的能力，諸如，例如，維持主體中的適當(dāng)?shù)牡V物質(zhì)和鹽水平、細(xì)胞功能。作為例證和不進(jìn)行限制，維生素D維持主體中的適當(dāng)?shù)拟}和本文檔來自技高網(wǎng)...
【技術(shù)保護(hù)點(diǎn)】
一種調(diào)節(jié)兩種分析物同系物之一對(duì)在用于確定樣品中的兩種分析物同系物的總量的測(cè)定中得到的信號(hào)的量的貢獻(xiàn)的方法，所述方法包括：(a)?提供在測(cè)定介質(zhì)中的組合： (i)?疑似含有兩種分析物同系物的樣品； (ii)?用于進(jìn)行測(cè)定的試劑，所述測(cè)定用于確定樣品中的兩種分析物同系物的總量，其中所述試劑包含至少一種結(jié)合所述兩種分析物同系物的測(cè)定受體，和 (iii)?非測(cè)定受體，其對(duì)所述兩種分析物同系物中的任何一種具有更大結(jié)合親和力，所述任何一種對(duì)信號(hào)的量的貢獻(xiàn)要進(jìn)行調(diào)節(jié)，其中非測(cè)定受體的量足以實(shí)現(xiàn)所述分析物同系物對(duì)所述信號(hào)的貢獻(xiàn)的調(diào)節(jié)；和(b)?進(jìn)行用于確定兩種分析物同系物的總量的測(cè)定。
【技術(shù)特征摘要】
【國(guó)外來華專利技術(shù)】...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：魏鐵全，W貝茲克，E加西亞，
申請(qǐng)(專利權(quán))人：西門子醫(yī)療保健診斷公司，
類型：發(fā)明
國(guó)別省市：美國(guó);US
還沒有人留言評(píng)論。發(fā)表了對(duì)其他瀏覽者有用的留言會(huì)獲得科技券。