【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】
本專利技術(shù)涉及診斷測試領(lǐng)域，更特別涉及定量固定化在固體載體上的官能團的方法。
技術(shù)介紹
1、在醫(yī)學(xué)和臨床化學(xué)領(lǐng)域中，通過利用特異性結(jié)合對成員之間的相互作用進行生理活性物質(zhì)或被分析物的許多研究和測定。例如，患者樣品中的目標被分析物本身可以是特異性結(jié)合對的一個成員，其可以通過使用固定化在固體載體上的特異性結(jié)合對的相應(yīng)成員檢測。在這種情況下，例如，固定化的結(jié)合對成員可以是用于檢測樣品中的目標抗體的抗原。已經(jīng)為這些應(yīng)用開發(fā)出各種固體載體材料并且需要各種結(jié)合技術(shù)將特異性結(jié)合對成員固定化在固體載體上。
2、例如，順磁粒子(pmp)是已知的固體載體材料，其可以用官能團如胺官能團官能化。在一些情況下，可以選擇這些官能團以與鍵合在結(jié)合對成員上的連接基(例如戊二醛)鍵合。該結(jié)合對成員可能對樣品中的目標被分析物(其通常是如上文提到的結(jié)合對的第二成員)有選擇性。在將該結(jié)合對成員固定化在固體載體上時，可能必須確保適當量的官能團可供直接或間接連接該結(jié)合對成員。例如，太少的可用官能團可能導(dǎo)致在加入結(jié)合對成員時太少的連接位點。這可能導(dǎo)致固體載體不能準確測定在特定濃度下，特別是在目標被分析物的可檢測范圍內(nèi)的較高濃度下的目標被分析物的量。另一方面，提供更高濃度的用于固定化特異性結(jié)合成員的官能團可能顯著提高生產(chǎn)成本而沒有任何額外益處。
3、因此，需要測定和/或確認直接或間接存在于固體載體上的官能團數(shù)以將特異性結(jié)合對成員優(yōu)化固定化到固體載體上。盡管存在定量測定溶液中的官能團量的已知方法，但此類方法通常不適合固體載體，因為在此類定量方法中形成的有
技術(shù)實現(xiàn)思路
1、根據(jù)本專利技術(shù)的一個方面，提供定量固定化在固體載體上的官能團的量的方法。在某些方面中，該方法能夠測定在固體載體產(chǎn)品的制造過程中待布置在固體載體上的官能團的最佳數(shù)量。由此可以消除和/或減少浪費，并可以改進固體載體的性能。例如，通過定量固體載體上可用的官能團數(shù)，可以保證足夠的官能團可供直接或間接連接特異性結(jié)合對的第一成員。此后，可以制造具有特異性結(jié)合對成員的最佳載量的類似固體載體。在某些實施方案中，本文所述的方法因此能夠在直接或間接連接在固體載體上提供的特異性結(jié)合對的一個成員之前定量可用官能團。
2、本文所用的術(shù)語“大約”是指指定值的±10％的值。
3、本文所用的術(shù)語“附加”、“結(jié)合”、“固定化”、“連接”等被理解為不限于共價鍵合并且可包括兩個或更多個分子之間的任何類型的吸引、親合、構(gòu)象選擇、誘導(dǎo)契合或鍵合。
4、本文所用的短語“有效量”是指適合帶來預(yù)期結(jié)果的材料量。
5、本文所用的術(shù)語“樣品”包括具有或疑似具有目標被分析物的任何樣品并且可以是生物或非生物樣品。
6、本文所用的術(shù)語“對象”是指任何人類或非人類哺乳動物。
7、在下列說明書中結(jié)合附圖解釋本專利技術(shù)的方面。
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1.定量固定化在包含一種或多種順磁粒子的固體載體上的目標官能團的方法，該方法包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述一種或多種順磁粒子上的目標官能團通過將所述官能團添加到所述一種或多種順磁粒子上的反應(yīng)固定化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在鍵合到所述一種或多種順磁粒子上的連接劑上提供所述目標官能團。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述醛類官能團通過將醛類官能團添加到所述一種或多種順磁粒子上存在的氨基上的反應(yīng)固定化在所述一種或多種順磁粒子上。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述醛類官能團通過戊二醛與所述一種或多種順磁粒子上的氨基之間的反應(yīng)固定化在所述一種或多種順磁粒子上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其進一步包括，在步驟(h)之前：
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員的有效量為化學(xué)計算量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員是抗原、抗體、酶、底物或多核苷酸。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其
10.定量固定化在包含一種或多種順磁粒子的固體載體上的目標官能團的方法，該方法包括：
11.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述一種或多種順磁粒子上的目標官能團通過將所述官能團添加到所述一種或多種順磁粒子上的反應(yīng)固定化。
12.根據(jù)權(quán)利要求11所述的方法，其中所述固定化氨基官能團由氨基硅烷化合物與所述一種或多種順磁粒子之間的反應(yīng)提供。
13.根據(jù)權(quán)利要求10所述的方法，其中所述選擇性化合物包含丙醛。
14.根據(jù)權(quán)利要求10至13任一項所述的方法，其進一步包括，在步驟(h)之前：
15.根據(jù)權(quán)利要求10至13任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員的有效量為化學(xué)計算量。
16.根據(jù)權(quán)利要求10至15任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員是抗原、抗體、酶、底物或多核苷酸。
17.根據(jù)權(quán)利要求10至13任一項所述的方法，其中使所述目標官能團與一定量的選擇性化合物接觸包括使所述目標官能團與一定量的選擇性化合物反應(yīng)。
18.用于實施根據(jù)權(quán)利要求1至17任一項所述的方法的試劑盒。
19.根據(jù)權(quán)利要求18中所述的試劑盒，其包含選擇性結(jié)合到目標官能團上的選擇性化合物；和選擇性結(jié)合到所述選擇性化合物上的指示劑。
20.根據(jù)權(quán)利要求18或19所述的試劑盒，其進一步包含包裝或用于實施根據(jù)權(quán)利要求1至17任一項所述的方法的說明書。
...【技術(shù)特征摘要】
1.定量固定化在包含一種或多種順磁粒子的固體載體上的目標官能團的方法，該方法包括：
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述一種或多種順磁粒子上的目標官能團通過將所述官能團添加到所述一種或多種順磁粒子上的反應(yīng)固定化。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中在鍵合到所述一種或多種順磁粒子上的連接劑上提供所述目標官能團。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其中所述醛類官能團通過將醛類官能團添加到所述一種或多種順磁粒子上存在的氨基上的反應(yīng)固定化在所述一種或多種順磁粒子上。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其中所述醛類官能團通過戊二醛與所述一種或多種順磁粒子上的氨基之間的反應(yīng)固定化在所述一種或多種順磁粒子上。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其進一步包括，在步驟(h)之前：
7.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員的有效量為化學(xué)計算量。
8.根據(jù)權(quán)利要求1至7任一項所述的方法，其中所述第一結(jié)合對成員是抗原、抗體、酶、底物或多核苷酸。
9.根據(jù)權(quán)利要求1至5任一項所述的方法，其中使所述目標官能團與一定量的選擇性化合物接觸包括使所述目標官能團與一定量的選擇性化合物反應(yīng)。
10.定量固定化在包含一種或多種順磁粒子的固體載體上的目標官能團的方法，該...
【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：S·林，C·里默，R·斯皮爾斯，
申請(專利權(quán))人：西門子醫(yī)療保健診斷公司，
類型：發(fā)明
國別省市：
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