三磷酸腺苷二鈉的制備方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)公開了三磷酸腺苷二鈉的制備方法，現(xiàn)有技術(shù)中，生化反應(yīng)的酶促反應(yīng)金屬離子化合物是選用硫酸鎂，但是后續(xù)工藝中使用的強堿性陰離子樹脂對硫酸根離子的吸附能力很強，對后期的樹脂再生再生處理帶來很大困難，會引入新的雜質(zhì)離子；而用氯化鎂替代硫酸鎂，強堿性陰離子樹脂對氯離子的吸附能力比對硫酸根離子的吸附能力弱，利于后期的樹脂再生再生處理，不會引入新的雜質(zhì)離子。在樹脂分離工序的上樣時，是采用單條樹脂柱上樣至結(jié)束，本發(fā)明專利技術(shù)采用串柱上樣可以顯著提高流速，縮短上樣時間50％以上，且因為是串柱洗滌，產(chǎn)品流穿的可能性也小了很多，極大的提高了產(chǎn)品的收率，收率提高30％以上。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

本專利技術(shù)涉及藥物制劑
，具體涉及一種。
技術(shù)介紹
三磷酸腺苷二鈉，化學(xué)名:腺嘌呤核苷一 5’ 一三磷酸酯二鈉鹽三水合物，分子式:C10H14N5Na2O13P3.3H20，分子量:605.19，是核苷酸衍生物，參與體內(nèi)脂肪、蛋白質(zhì)、糖、核酸以及核苷酸的代謝。當(dāng)體內(nèi)吸收、分泌、肌肉收縮及進行生化合成反應(yīng)等需要能量時，三磷酸腺苷即分解成二磷酸腺苷及磷酸基，同時釋放出能量。三磷酸腺苷二鈉能夠穿透血-腦脊液屏障，能提高神經(jīng)細胞膜性結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性和重建能力、促進神經(jīng)突起的再生長。三磷酸腺苷二鈉是輔酶類藥物，臨床用于因組織損傷、細胞酶活力下降所致的各種疾病。如心力衰竭，心肌炎、心肌梗塞、腦動脈硬化、冠狀動脈硬化、進行性肌萎縮、腦出血后遺癥、急慢性肝炎、肝硬化和聽力障礙等，還用于進行性肌萎縮、腦溢血后遺癥、心功能不全、心肌疾病及肝炎等治療。中國專利CN200710019776.8，公開了一種三鱗酸腺苷二鈉的制備方法，包括下列步驟:(1)先加自來水于反應(yīng)鍋中，同時開動攪拌，用夾套加熱至43-45?，然后投放蔗糖、葡萄糖、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀，使其溶解，停止加熱，用循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40-42?以下時，投放速凍酵母泥，并用夾套加熱緩慢升溫；(2)用二倍于硫酸鎂體積的自來水溶解硫酸鎂，另外用水:腺苷液=12:1的比例先將自來水加熱至80°C，將腺苷溶解；(3)當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度至25±1°C時，依次投放硫酸鎂、腺苷液，并將反應(yīng)料液加熱至38-40°C，停止加熱，保溫2h，此時開始取樣測定腺苷的轉(zhuǎn)達化率，當(dāng)反應(yīng)達到三磷酸腺苷二鈉一條帶時，反應(yīng)結(jié)束；(4)滅活、調(diào)酸堿，反應(yīng)結(jié)束立即放掉夾套中熱水，一邊通冷卻水降溫，一邊投放冰于反應(yīng)鍋中，降溫至6-8°C時停止加冰，用磷酸調(diào)節(jié)pH3.0-4.0，靜置I小時后，再調(diào)節(jié)PH6.5-7.5，再靜置30分鐘后開始壓榨，當(dāng)反應(yīng)液壓榨結(jié)束后，再用純化水頂洗濾餅，30分鐘后，取水頂液檢測，當(dāng)三磷酸腺苷二鈉濃度< 0.1%時即停止水頂，然后將水頂液與壓榨液混勻，檢驗三磷酸腺苷二鈉濃度0.5-1%、透光度多90%方為合格，將混合液送分離工段處理；(5)樹脂分離:上樣:將上述混合液加純凈水稀釋至0.3-0.5%上樹脂柱，上樣8小時后每2小時檢測流出液中ATP濃度，當(dāng)上樣流出液中ATP ^ 0.1 %時停止上樣，改水頂，2小時后再進行上樣，直到上樣結(jié)束；水洗雜質(zhì):上樣結(jié)束，用純化水正進洗滌至流出液A257S 0.5 ;然后反進水洗至樹脂上層無混濁機械雜質(zhì)且流出液A 257S 0.5結(jié)束；稀鹽洗雜質(zhì):水洗結(jié)束，用0.05%稀氯化鈉溶液反進流洗，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度多0.1 %時，反進流洗雜質(zhì)結(jié)束，改正進，每2小時取樣，測流出液中ATP濃度，若濃度多0.5%時，開始洗脫；洗脫:當(dāng)液位降至樹脂上沿20cm處時，用2%濃鹽液進行洗脫，收集洗脫液，結(jié)束后送至脫色；(6)脫色:洗脫液先用二十萬分子量的中空纖維超濾膜進行第一次超濾去蛋白，再添加活性炭，攪拌30分鐘以上后靜置30分鐘，然后將脫色液送至精密過濾器超濾除熱原；(7)超濾、結(jié)晶:超濾:將脫色液再用納膜式超濾器進行第二次超濾除熱原，再送去:結(jié)晶；結(jié)晶:超濾液先用3N鹽酸調(diào)節(jié)pH至5.0,然后用夾套熱水升溫至30-32°C，同時開始攪拌，溫度達到32°C，開始加入95%乙醇，并保持溫度30_32°C，當(dāng)鍋內(nèi)出現(xiàn)白色混獨時，停止加乙醇，繼續(xù)攪拌半小時，然后開夾套冷卻，將料液冷卻至室溫；離心結(jié)晶液，濕品先用乙醇淋洗，再用無水乙醇浸泡，最后離心30分鐘甩干，將濕品放入濕品存入室中，母液送蒸餾回收崗位進行回收；將濕品均勻地鋪入盤中，放入烘箱內(nèi)，真空干燥溫度控制在38-42°C，16小時后取出將其搗碎，而后每5小時翻料I次，待濕品烘至40小時后，取樣品送分析室測快速失重，當(dāng)快速失重〈5%，即可出料；將干品放入干品存放室中保存，得產(chǎn)品。現(xiàn)有技術(shù)中，例如ATP等藥品一般是按照國家食品要監(jiān)督管理局或者藥典等指導(dǎo)文件建議的工藝步驟進行生產(chǎn)，如果藥品生產(chǎn)企業(yè)對已經(jīng)拿到批文的產(chǎn)品變更生產(chǎn)工藝，需要重新報批，會增加人力物力成本。因此，既然有指導(dǎo)文件的建議，藥品生產(chǎn)廠家一般不會隨意變更生產(chǎn)工藝。但是隨著時代的發(fā)展，技術(shù)的進步，以及環(huán)保節(jié)能的要求，對現(xiàn)有技術(shù)的改進也在不斷進行當(dāng)中，每一次改進都是對現(xiàn)有技術(shù)的不斷完善，相應(yīng)的也是在節(jié)約成本。
技術(shù)實現(xiàn)思路
本專利技術(shù)的目的是為了解決現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種。本專利技術(shù)所述，包括如下步驟:I)生化反應(yīng)(I)氯化鎂溶液、腺苷溶液、苯扎溴銨溶液的制備:①用少量反滲透水溶解氯化鎂制成氯化鎂溶液；②用適量加熱至85°C以上的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液；③用適量的反滲透水溶解苯扎溴銨稀釋成5%苯扎溴銨溶液；(2)投放速凍酵母:加反滲透水于反應(yīng)鍋中，開動攪拌用夾套熱水加熱至40-450C，投放蔗糖及磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀，使其溶解，待其全部溶解后，停止加熱，開循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40°C以下時，投放速凍酵母，并用夾套熱水緩慢升溫；(3) ATP生化反應(yīng):當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度升至20°C ± I時，依次投放氯化鎂溶液、苯扎溴銨溶液、腺苷溶液，反應(yīng)開始計時，將反應(yīng)液繼續(xù)加熱至36-39°C，保溫，待有氣泡溢出，開始取樣測定ATP轉(zhuǎn)化率，當(dāng)反應(yīng)達到ATP —條帶時，反應(yīng)結(jié)束；(4)滅活、調(diào)酸堿:反應(yīng)結(jié)束，立即放掉夾套熱水，迅速投放大量冰于反應(yīng)鍋內(nèi)，并通冷卻水降溫，當(dāng)溫度降至4°C以下，用磷酸調(diào)pH至2.5-3.0，I小時后，再用液堿調(diào)pH至5.5-6.0，調(diào)好堿后30分鐘開始壓榨，壓榨完畢，再用反滲透水頂洗濾餅，水頂液合并壓榨液，檢驗含量、透光度，合格送分離工段處理；2)樹脂分離(I)串柱上樣:將壓榨液及水頂液稀釋至0.2-0.45%，上D296樹脂柱，流速為4-6L/min，定時檢測流出液，查看是否有ATP漏出；當(dāng)流出液中ATP濃度多0.03%時，停止上樣，用反滲透水正頂至流出液ATP濃度< 0.01 %后，繼續(xù)上樣，如此反復(fù)直至上樣結(jié)束；(2)水洗雜質(zhì):串柱上樣結(jié)束，用反滲透水正進洗滌至流出液A257miS 0.2 ;然后反進水洗至樹脂上層無渾濁機械雜質(zhì)且流出液A257nmS 0.2后結(jié)束；流速控制在4-6L/min ；(3)稀鹽洗雜質(zhì):水洗結(jié)束，用 ρΗ2.0-2.2 的 0.04mol/LNaCl—0.01mol/L HCl 稀鹽液反進流洗，流速為6-10L/min ;每小時取樣，測流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度^ 0.03%時，反進洗雜質(zhì)結(jié)束；改正進，正進流速不變，每小時取樣一次，測流出液中ATP的濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度多0.025 %時，每半小時取樣一次監(jiān)測；當(dāng)流出液pH跳至2-4，且ADP基本洗盡或只有ATP時，洗滌結(jié)束，開始洗脫；(4)洗脫:用 ρΗ3.5-3.8 的 lmol/LnaCl-0.01mol/L HCl 濃鹽液進行洗脫，當(dāng)洗脫流出液ATP濃度>0.38%時，收集洗脫液，送脫色；當(dāng)洗脫流出液ATP濃度〈0.38%時，即停止收集；3)精制(I)脫色:洗脫液根據(jù)色澤加入0.1-0.5%活性炭和0.1-0.3%硅藻土攪拌I小時脫色，離心分離過濾后，脫色本文檔來自技高網(wǎng)...

【技術(shù)保護點】
三磷酸腺苷二鈉的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：1)生化反應(yīng)(1)氯化鎂溶液、腺苷溶液、苯扎溴銨溶液的制備：①用少量反滲透水溶解氯化鎂制成氯化鎂溶液；②用適量加熱至85℃以上的反滲透水溶解腺苷制成腺苷溶液；③用適量的反滲透水溶解苯扎溴銨稀釋成5％苯扎溴銨溶液；(2)投放速凍酵母：加反滲透水于反應(yīng)鍋中，開動攪拌用夾套熱水加熱至40?45℃，投放蔗糖及磷酸二氫鉀和磷酸氫二鉀，使其溶解，待其全部溶解后，停止加熱，開循環(huán)水降溫，當(dāng)溫度降至40℃以下時，投放速凍酵母，并用夾套熱水緩慢升溫；所述的速凍酵母，是指將啤酒酵母泥用適量反滲透水清洗，然后再用板框過濾器過濾，得到白色或淡褐色泥狀物，再通過速凍得到；(3)ATP生化反應(yīng)：當(dāng)反應(yīng)鍋內(nèi)溫度升至20℃±1時，依次投放氯化鎂溶液、苯扎溴銨溶液、腺苷溶液，反應(yīng)開始計時，將反應(yīng)液繼續(xù)加熱至36?39℃，保溫，待有氣泡溢出，開始取樣測定ATP轉(zhuǎn)化率，當(dāng)反應(yīng)達到ATP－條帶時，反應(yīng)結(jié)束；(4)滅活、調(diào)酸堿：反應(yīng)結(jié)束，立即放掉夾套熱水，迅速投放大量冰于反應(yīng)鍋內(nèi)，并通冷卻水降溫，當(dāng)溫度降至4℃以下，用磷酸調(diào)pH至2.5?3.0，1小時后，再用液堿調(diào)pH至5.5?6.0，調(diào)好堿后30分鐘開始壓榨，壓榨完畢，再用反滲透水頂洗濾餅，水頂液合并壓榨液，檢驗含量、透光度，合格送分離工段處理；2)樹脂分離(1)串柱上樣：將壓榨液及水頂液稀釋至0.2?0.45％，上D296樹脂柱，流速為4?6L/min，定時檢測流出液，查看是否有ATP漏出；當(dāng)流出液中ATP濃度≥0.03％時，停止上樣，用反滲透水正頂至流出液ATP濃度≤0.01％后，繼續(xù)上樣，如此反復(fù)直至上樣結(jié)束；(2)水洗雜質(zhì)：串柱上樣結(jié)束，用反滲透水正進洗滌至流出液A257nm≤0.2；然后反進水洗至樹脂上層無渾濁機械雜質(zhì)且流出液A257nm≤0.2后結(jié)束；流速控制在4?6L/min；(3)稀鹽洗雜質(zhì)：水洗結(jié)束，用pH?2.0?2.2的0.04mol/LNaCl??0.01mol/L?HCl稀鹽液反進流洗，流速為6?10L/min；每小時取樣，測流出液中ATP濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度≥0.03％時，反進洗雜質(zhì)結(jié)束；改正進，正進流速不變，每小時取樣一次，測流出液中ATP的濃度，當(dāng)流出液中ATP濃度≥0.025％時，每半小時取樣一次監(jiān)測；當(dāng)流出液pH跳至2?4，且ADP基本洗盡或只有ATP時，洗滌結(jié)束，開始洗脫；(4)洗脫：用pH?3.5?3.8的1mol/LnaCl?0.01mol/L?HCl濃鹽液進行洗脫，當(dāng)洗脫流出液ATP濃度>0.38％時，收集洗脫液，送脫色；當(dāng)洗脫流出液ATP濃度<0.38％時，即停止收集；3)精制(1)脫色：洗脫液根據(jù)色澤加入0.1?0.5％活性炭和0.1?0.3％硅藻土攪拌1小時脫色，離心分離過濾后，脫色液經(jīng)檢驗合格后送超濾除蛋白；(2)超濾：將脫色液用<1萬分子量的超濾膜進行超濾除蛋白，合格后送去結(jié)晶；(3)結(jié)晶：超濾液先用CP級HCl調(diào)pH至2.5?3.3，再用＞1萬分子量的超濾膜進行超濾除蛋白，合格后放入結(jié)晶釜，開動攪拌，開始加入95％(v/v)乙醇，出現(xiàn)白色混濁前酒精加入速度控制在100L/h；出現(xiàn)白色混濁時，停止加酒精，攪拌半小時，然后繼續(xù)加酒精至料液體積的1.5?2.0倍，保持溫度攪拌半小時，然后開夾套冷卻水，將料液冷至室溫，靜止1小時；離心分離結(jié)晶液，濕品先用95％(v/v)酒精洗滌，再用無水乙醇浸泡，最后甩干送去干燥；母液調(diào)pH至6.0?7.0后送蒸餾工段進行回收酒精；4)干燥包裝(1)干燥：將濕品放入干燥箱中，真空度≤－0.085Mpa，控制溫度在34?40℃，加P2O5吸濕，烘干過程定時翻料，并檢測水分，當(dāng)水分≤8％時可出料；(2)包裝：將合格的產(chǎn)品按規(guī)定的批量放入混合器中混合15?20分鐘，然后按進行包裝送檢，合格入庫。...

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：阮傳明，盧志榮，黃偉，
申請(專利權(quán))人：廣西浦北制藥廠，
類型：發(fā)明
國別省市：廣西;45