一種過水解酶固定化酶制劑的制備方法技術

本發明專利技術涉及酶制劑制備技術，具體涉及一種過水解酶的固定化酶制劑的制備方法。其技術方案是：誘導大腸桿菌重組菌株表達過水解酶后，經裂解、純化、濃縮得到濃度為10～18g/L的過水解酶蛋白；將過水解酶蛋白與牛血清白蛋白混合，加入乙二醇二甲醚溶液，沉淀后向上述沉淀體系中進一步加入戊二醛，搖床震蕩獲得過水解酶的交聯酶聚集體；將交聯酶聚集體與聚乙烯醇混合后立即將其滴加到硝酸鈉溶液中獲得片狀過水解酶固定化酶制劑，凍干保存。本發明專利技術制備方法簡單方便，價格低廉，具備市場競爭優勢；制備的固定化酶制劑，對印染廢水進行脫色處理，在脫色率超過80%的情況下可以循環利用6次以上，具有良好的應用效果。

【技術實現步驟摘要】

【技術保護點】
一種過水解酶的固定化酶制劑的制備方法，?其特征在于：配方過水解酶蛋白??????????????????????????????4?g牛血清白蛋白??????????????????????????0.1～2?g乙二醇二甲醚?????????????????????400～3600?mL戊二醛??????????????????????????????30～80?mL聚乙烯醇????????????????????????????100～200?g硝酸鈉????????????????????????????????????50?g;制備（1）誘導大腸桿菌重組菌株表達過水解酶后，裂解大腸桿菌制備過水解酶粗酶液；經親和色譜柱純化過水解酶粗酶液，制備電泳純的過水解酶蛋白質樣品；濃縮過水解酶蛋白質樣品；（2）將過水解酶蛋白與牛血清白蛋白均勻混合成混合蛋白液；加入乙二醇二甲醚溶液，混勻后室溫下沉淀；向上述沉淀體系進一步加入戊二醛至體系終濃度為25～200?mmol/L，室溫下搖床上震蕩獲得過水解酶的交聯酶聚集體；（3）離心收集過水解酶的交聯酶聚集體，洗滌后與質量濃度為6～20%的聚乙烯醇混合均勻進行包埋，然后立即將其滴加到質量濃度為10～80%的硝酸鈉溶液中，3～4小時后穩定固定化酶的形態，獲得片狀過水解酶固定化酶制劑。...

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：舒正玉，武海龍，林紅，黃建忠，李婷，劉艷如，
申請(專利權)人：福建師范大學，
類型：發明
國別省市：福建;35