G6PD缺陷型Caki-1穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株及其構(gòu)建方法技術(shù)

本發(fā)明專利技術(shù)涉及醫(yī)學(xué)分子生物學(xué)相關(guān)技術(shù)，尤其是采用siRNA干擾技術(shù)構(gòu)建細胞研究模型。本發(fā)明專利技術(shù)所述的G6PD缺陷型Caki-1穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株是含有靶向干擾G6PD基因表達的DNA雙鏈片段和綠色熒光蛋白(green?fluorescent?protein,GFP)基因、可將Caki-1細胞株經(jīng)siRNA干擾技術(shù)靶向沉默了內(nèi)源性G6PD表達量80％以上的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株；所述的DNA雙鏈片段為：干擾F鏈5'-GATCCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTCAAGAGATGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTA-3'和干擾R鏈5'-AGCTTAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACATCTCTTGAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGGG-3'。本申請應(yīng)用siRNA干擾技術(shù)沉默人腎透明細胞癌Caki-1細胞內(nèi)源性G6PD表達80％以上，構(gòu)建了G6PD缺陷型Caki-1穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株(Caki-1-G6PD?siRAN)。這一細胞模型可用于探究G6PD與腎細胞癌的相關(guān)性，以及G6PD在腎細胞癌發(fā)生發(fā)展中的具體作用及相關(guān)調(diào)控機制。

【技術(shù)實現(xiàn)步驟摘要】

【技術(shù)保護點】
一種G6PD缺陷型Caki?1穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株，其特征在于是含有靶向干擾G6PD基因表達的DNA雙鏈片段和綠色熒光蛋白(green?fluorescent?protein,GFP)基因、可將Caki?1細胞株經(jīng)siRNA干擾技術(shù)靶向沉默了內(nèi)源性G6PD表達量80％以上的穩(wěn)轉(zhuǎn)細胞株；所述的DNA雙鏈片段為：干擾F鏈5'?GATCCCCGCCTCAGTGCCACTTGACATTCAAGAGATGTCAAGTGGCACTGAGGCTTTTTTA?3'和干擾R鏈5'?AGCTTAAAAAAGCCTCAGTGCCACTTGACATCTCTTGAATGTCAAGTGGCACTGAGGCGGG?3'。

【技術(shù)特征摘要】

【專利技術(shù)屬性】
技術(shù)研發(fā)人員：朱月春，況應(yīng)敏，張巧，王艷玲，楊麗娟，陳龍，韓巧巧，
申請(專利權(quán))人：昆明醫(yī)科大學(xué)，
類型：發(fā)明
國別省市：云南;53