一種巖黃連總堿的質量檢測方法技術

本發明專利技術涉及一種巖黃連總堿的質量檢測方法，該方法包括對該有效部位的薄層鑒別，水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽的檢查，采用紫外分光光度法測定總生物堿含量以及采用高效液相色譜法同時測定去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。該方法具有較強的專屬性和良好的重現性，能有效控制巖黃連總堿的質量，確保產品的安全有效、質量可控。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術屬于中藥分析領域，涉及一種中藥有效部位的質量檢測方法，具體涉及一種巖黃連總生物堿的質量檢測方法。
技術介紹
巖黃連為S粟科植物石生黃堇Corydalis saxicola Bunting的全草,是齡、桂高寒山區珍貴的中草藥材。本品味苦、性涼，具清利濕熱，散瘀消腫功效。用于瘡癤腫毒，肝炎，肝硬化，肝癌。迄今為止對巖黃連的化學成分的研究不多，報道的現已分離鑒定出的化合物主要是生物堿，尚未有其他類化合物的報道。1980年，柯珉珉最早對巖黃連的化學成分進行研究，應用PH梯度分離，在強堿性部位分得水溶性季銨堿類生物堿小檗堿(berberine)及脫氫卡維丁 (巖黃連堿，dehydrocavidine)。K.H.Janbaz等于2003年報道,水溶性季銨堿類化合物，如小檗堿，具有肝損傷保護作用。巖黃連中主要有效成分是以脫氫卡維丁為代表的生物堿類化合物，而這類化合物具有潛在的抗HBV活性和肝保護活性。經檢索，目前關于巖黃連的專利主要集中在巖黃連生物堿的制備工藝上，沒有關于質量控制的相關專利。中藥長期以來，質量難以有效控制，有效控制中藥產品的質量是一個重大的課題，現有技術中采用的方法不完整，少數針對性不強，使用這些方法難以達到真正控制質量的目的。以上巖黃連總堿由于缺少系統的質量控制方法，難以控制其質量，以致正常的臨床用藥及療效無法保證。目前有關巖黃連制劑的質量標準研究中，上市品種巖黃連注射液的質量標準是采用薄層色譜定性鑒別脫氫卡維丁和鹽酸小檗堿，采用高效液相色譜法測定脫氫卡維丁的含量。文獻報道的巖黃連片和巖黃連直腸栓都是采用的與巖黃連注射液同樣的方法建立的質量標準。本專利技術針對現有技術的不足，采用新的手段對巖黃連總堿的質量進行控制，特別是采用高效液相色譜法同時測定該藥物中多種成分的含量，解決了巖黃連總堿質量控制的難題，本專利技術提供了一種實用的質量控制方法。該方法提供了薄層鑒別，水分、熾灼殘渣、重金屬含量等檢查，紫外分光光度法測定藥物中巖黃連總堿和高效液相色譜法測定藥物中去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿成分的含量等質量控制方法，提高后的質量標準能更好地控制巖黃連總堿的質量，本專利技術的質量控制方法，具有較強的專屬性和良好的重現性，真正體現中藥安全有效、質量可控。
技術實現思路
本專利技術的目的在于提供一種巖黃連的質量控制方法。為了達到這個目的，采用如下技術方案:，該方法包括以下步驟:(I)以巖黃連為對照藥材，以脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿為對照品，對巖黃連總堿進行薄層鑒別；(2)對巖黃連總堿的水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽進行檢查；(3)采用紫外分光光度法測定巖黃連總堿中總生物堿的含量；(4)采用高效液相色譜法同時測定巖黃連總堿中去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。上述巖黃連總堿的質量檢測方法，巖黃連總堿的薄層鑒別方法步驟為:a.供試品溶液的制備:取本品10mg，加入25ml甲醇溶解，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液；b.對照藥材溶液的制備:取巖黃連對照藥材0.1g,加5ml甲醇，超聲處理30分鐘，濾過,濾液作為對照藥材溶液；c.對照品溶液的制備:取脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含脫氫卡維丁 0.2mg、鹽酸巴馬汀0.2mg、鹽酸小檗堿0.1mg的混合液,作為混合對照品溶液；d.薄層條件及結果:照中國藥典2010年版一部附錄VI B記載的薄層色譜法進行試驗，吸取上述三種溶液各5 μ 1，點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為9: 2: 5: 3的乙酸乙酯-二氯甲烷-甲醇-濃氨試液，及比例為7: I: 2的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，吹干，置波長為365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。上述巖黃連總堿的質量檢測方法，巖黃連總堿水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽的檢查方法步驟為:a.照中國藥典2010年版一部附錄IX H第一法記載的水分測定法對巖黃連總堿的水分進行測定，巖黃連總堿中水分不得超過5.0% ；b.照中國藥典2010年版一部附錄IX J記載的熾灼殘渣測定法對巖黃連總堿的熾灼殘渣進行測定，巖黃連總堿中熾灼殘渣不得過2.0% ；c.中國藥典2010年版一部附錄IX E第二法記載的重金屬檢查方法進行測定，砷鹽的檢查按中國藥典2010年版一部附錄IX F記載的第一法古蔡氏法進行測定，巖黃連總堿中重金屬不得過百萬分之十，砷鹽不得過百萬分之二。上述巖黃連總堿的質量檢測方法，紫外分光光度法測定巖黃連總堿中總生物堿的含量步驟為:a.對照品溶液的制備取經五氧化二磷干燥過夜的脫氫卡維丁對照品約10mg，精密稱定，置IOOml量瓶中，加1%鹽酸甲醇溶液至刻度，搖勻，作為貯備液，備用；b.標準曲線的制備精密量取對照品貯備液0.3ml, 0.4ml, 0.5ml, 0.6ml, 0.8ml，1.0ml，分別置IOml量瓶中，加入1%鹽酸甲醇溶液至刻度,搖勻；以1%鹽酸甲醇溶液為空白，照中國藥典2010年版一部附錄V A記載的紫外-可見分光光度法，在347nm波長處測定吸收度，以吸收度為縱坐標、濃度為橫坐標繪制標準曲線；c.供試品溶液的制備取本品約25mg，精密稱定，置50ml容量瓶中，加1%鹽酸甲醇溶液至刻度，作為樣品貯備液，備用；精密吸取樣品貯備液1.0ml置50ml量瓶中，加1%鹽酸甲醇溶液至刻度，搖勻，即得；d.測定法:取供試品溶液，以1%鹽酸甲醇溶液為空白，依法測定吸收度，從標準曲線上讀出供試品溶液中脫氫卡維丁的量，計算，即得。本品含總生物堿以脫氫卡維丁C21H2304N 計，不得少于 50.0%。上述巖黃連總堿的質量檢測方法，高效液相色譜法同時測定巖黃連總堿中去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量步驟為:a.色譜條件與系統適用性試驗米用Hanbon 0DS-2C18,規格為250mmX4.6mm,5μπι的色譜柱，以比例為18.5: 81.5的乙腈-0.0lmol/L磷酸二氫鉀水溶液為流動相，柱溫30°C,檢測波長347nm,流速1.0ml/min,進樣量10 μ I,采樣時間50min ；b.對照品溶液的制備精密稱取去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿適量，加甲醇分別制成單個標準品儲備液，分別精密取各儲備液適量，配制成混合標準品儲備液，以上6個化合物在混合標準品儲備液中的質量濃度分別為 0.0238，0.0889，0.0134，0.098，0.06292，0.0174mg/mL ；c.供試品溶液的制備供試品溶液制備取本品約25mg，精密稱定，置50ml量瓶中，加1%鹽酸甲醇至刻度，搖勻，過0.45 μ m直徑微孔濾膜，取續濾液，即得；d.測定法:分別精密吸取對照品與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測定，即得，本品含去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維汀、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿總量不得少于32.0%。有益效果:本專利技術對巖黃連總堿提出了質量控制方法，該方法提供了鑒別、檢查、紫外分光光度法和高效液相色譜法同時本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種巖黃連總堿的質量檢測方法，其特征在于該方法包括以下步驟：（1）以巖黃連為對照藥材，以脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿為對照品，對巖黃連總堿進行薄層鑒別；（2）對巖黃連總堿的水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽進行檢查；（3）采用紫外分光光度法測定巖黃連總堿中總生物堿的含量；（4）采用高效液相色譜法同時測定巖黃連總堿中去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。

【技術特征摘要】
1.一種巖黃連總堿的質量檢測方法，其特征在于該方法包括以下步驟: (1)以巖黃連為對照藥材，以脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿為對照品，對巖黃連總堿進行薄層鑒別； (2)對巖黃連總堿的水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽進行檢查； (3)采用紫外分光光度法測定巖黃連總堿中總生物堿的含量； (4)采用高效液相色譜法同時測定巖黃連總堿中去氫碎葉紫堇堿、脫氫甲卡維汀、藥根堿、脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀和鹽酸小檗堿的含量。2.根據權利要求1所述巖黃連總堿的質量檢測方法，其特征在于巖黃連總堿的薄層鑒別方法步驟為: a.供試品溶液的制備:取本品10mg，加入25ml甲醇溶解，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為供試品溶液； b.對照藥材溶液的制備:取巖黃連對照藥材0.lg，加5ml甲醇，超聲處理30分鐘，濾過，濾液作為對照藥材溶液； c.對照品溶液的制備:取脫氫卡維丁、鹽酸巴馬汀、鹽酸小檗堿對照品，加甲醇制成每Iml含脫氫卡維丁 0.2mg、鹽酸巴馬汀0.2mg、鹽酸小檗堿0.1mg的混合液,作為混合對照品溶液； d.薄層條件及結果:照中國藥典2010年版一部附錄VIB記載的薄層色譜法進行試驗，吸取上述三種溶液各5 μ 1，點于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以比例為9: 2: 5: 3的乙酸乙酯-二氯甲烷-甲醇-濃氨試液，及比例為7:1: 2的正丁醇-冰醋酸-水為展開劑，展開，取出，吹干，置波長為365nm紫外光燈下檢視，供試品色譜中，在與對照品及對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。3.根據權利要求1所述巖黃連總堿的質量檢測方法，其特征在于巖黃連總堿水分、熾灼殘渣、重金屬及砷鹽的檢查方法步驟為: a.照中國藥典2010年版一部附錄IXH第一法記載的水分測定法對巖黃連總堿的水分進行測定，巖黃連總堿中水分不得超過5.0% ； b.照中國藥典2010年版一部附錄IXJ記載的熾灼殘渣測定法對巖黃連總堿的熾灼殘渣進行測定，巖黃連總堿中熾灼殘渣不得過2.0% ； c.中國藥典2010年版一部附錄IXE第二法記載的重金屬檢查方法進行測定，砷鹽的檢查按中國藥典2010年版一部附錄IX F記載的第一法古蔡氏法進行測定，巖黃連總堿中重金屬不得過百萬分之十，砷鹽不得過百萬分之二。4.根據權利要求1所述巖黃連總堿的質量檢測方法，其特征在于紫外分光光度法測定巖黃連總堿中總生物堿的含量步驟為: a.對照品溶液...

【專利技術屬性】
技術研發人員：季德，陸兔林，池玉梅，毛春芹，謝輝，李林，殷放宙，周淵，劉會珍，李惠連，
申請(專利權)人：南京中醫藥大學，
類型：發明
國別省市：