一種養血清腦顆粒蒽醌類成分檢測方法技術

本發明專利技術涉及一種養血清腦顆粒蒽醌類成分檢測方法，包括以下步驟：步驟1，對照品溶液的制備；步驟2，供試品溶液的制備；步驟3，注入色譜儀，得到色譜圖；步驟4，根據色譜圖得到供試品溶液中蒽醌類成分的種類。

【技術實現步驟摘要】

:本專利技術涉及一種中藥有效成分的檢測方法，特別涉及。
技術介紹
:養血清腦顆粒是由天津天士力制藥股份有限公司生產的一種復方中藥，以川芎、當歸為君藥，由11味中藥采用現代化制劑工藝精制而成。養血清腦顆粒可以改善軟腦膜微循環，增加腦血流量，緩解血管痙攣與止痛，具有養血平肝、活血通絡之功效。根據文獻報道，決明子中蒽醌類成分具有降血壓、降血脂、抗動脈粥樣硬化等功效。養血清腦顆粒其處方如下:主藥:當歸、川芎、白芍、熟地黃、鉤藤、雞血藤、夏枯草、決明子、珍珠母、延胡索、細辛。輔料為:糊精、甜菊素。決明子是養血清腦顆粒中的重要藥味之一，其中主要成分為蒽醌類成分包括:大黃酌.(Chrysophanol)、大黃素(Emodin)、蘆薈大黃素(Aloeemodin)、大黃酸(Rhein)、橙黃決明素(Aurantio-obtusin,即I, 7-二甲氧基-2,6,8-三輕-3-甲基蒽醌)、大黃酹-四批喃葡萄糖苷(chrysophanol-tetra- β -D-glucopyranoside) 3_ 甲基 _2_ 輕基-1,6, 7,8-四甲氧基蒽醌(2-hydroxy-l, 6, 7,8-tetramethoxy-3_methyIanthraquinone)及 3_ 甲基-2,8- 二輕基-1,6, 7_ 三甲氧基蒽醌(2,8-dihydroxy-l, 6, 7-trimethoxy-3_methyIanthraquinone)等。為對養血清腦顆粒中的蒽醌類成分進行檢測和分析，本專利技術對養血清腦顆粒中的化學成分進行分析與研究。以蒽醌部位為研究對象，為制定新的質量標準和有效控制產品質量提供了依據
技術實現思路
:本專利技術經過篩選，獲得一種靈敏度高，檢測準確，操作簡單，成本低廉的養血清腦顆粒蒽醌類成分檢測方法。本專利技術的檢測方法，包括以下步驟:步驟I，對照品溶液的制備；步驟2,供試品溶液的制備；步驟3，注入液相色譜-質譜聯用色譜儀，得到色譜圖；步驟4，根據色譜圖得到供試品溶液中蒽醌類成分的種類。根據本專利技術的檢測方法，其中步驟I所述對照品采用橙黃決明素、蘆薈大黃素、大黃素和大黃酚。根據本專利技術的檢測方法，其中，步驟I所述對照品溶液的制備，步驟如下:準確稱取上述對照品(橙黃決明素5.lmg,蘆薈大黃素2.85mg,大黃素5.0lmg,大黃酹4.18mg)置于IOOml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，取續濾液作為對照品溶液。根據本專利技術的檢測方法，其中步驟2所述供試品溶液采用DlOl大孔樹脂柱和聚酰胺柱制備。步驟2所述供試品溶液的制備，步驟如下:精密稱取未加入輔料的養血清腦顆粒浸膏100g，用20%的乙醇溶解，以DlOl大孔樹脂柱層析分離，20%乙醇(5bv)、95%乙醇(5bv)分別洗脫，收集95%乙醇洗脫液，將可能的藥效物質進行富集。將95%乙醇洗脫液濃縮，用30%乙醇溶液溶解，以100-200目的聚酰胺柱層析分離，30%乙醇(5bv)、95%乙醇(5bv)分別洗脫。收集95%乙醇洗脫液即為目標蒽醌部位。根據本專利技術的方法，其中步驟3中所述色譜儀為液相色譜-質譜聯用儀器，色譜條件如下:液相條件:色譜柱PhenomenexC18 (250 X 4.60mm, Gemini 5 μ m);流動相 A 為乙腈，流動相B為0.5%的甲酸-水，采用梯度洗脫。體積流量為1.0ml/min,檢測波長為254nm，190-500nm全波長掃描，柱溫為30°C，進樣量10 μ I ;質譜條件:檢測模式為電噴霧離子化(ESI)方式，檢測離子為正、負離子，掃描范圍lOO-lOOOm/z，干 燥氣的流量為8L/min，干燥氣的溫度為350°C，霧化氣的壓力為35psi。其中，流動相梯度洗脫程序如下:權利要求1.，包括以下步驟: 步驟I，對照品溶液的制備； 步驟2,供試品溶液的制備； 步驟3，注入液相色譜-質譜聯用色譜儀，得到色譜圖； 步驟4，根據色譜圖得到供試品溶液中蒽醌類成分的種類。2.根據權利要求1的檢測方法，其中步驟I所述對照品采用橙黃決明素、蘆薈大黃素、大黃素和大黃酚。3.根據權利要求2的檢測方法，其中步驟I所述對照品溶液的制備，步驟如下:稱取對照品橙黃決明素5.1mg,蘆薈大黃素2.85mg,大黃素5.0lmg,大黃酹4.18mg,置于IOOml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，取續濾液作為對照品溶液。4.根據權利要求1的檢測方法，其中步驟2所述供試品溶液采用DlOl大孔樹脂柱和聚酰胺柱制備。5.根據權利要求4的檢測方法，其中步驟2所述供試品溶液的制備，步驟如下:稱取未加入輔料的養血清腦顆粒浸膏100g，用20%的乙醇溶解，以DlOl大孔樹脂柱層析分離，5bv20%乙醇、5bv 95%乙醇分別洗脫，收集95%乙醇洗脫液，將可能的藥效物質進行富集；將95%乙醇洗脫液濃縮，用30%乙醇溶液溶解，以100-200目的聚酰胺柱層析分離，5bv 30%乙醇、5bv 95%乙醇分別洗脫，收集95%乙醇洗脫液即為目標蒽醌部位。6.根據權利要求5的檢測方法，其中色譜條件如下: 液相條件:色譜柱PhenomenexC18 (250 X 4.60mm, Gemini 5 μ m);流動相A為乙腈，流動相B為0.5%的甲酸-水，采用梯度洗脫；體積流量為l.0ml/min，檢測波長為254nm，190-500nm全波長掃描，柱溫為30°C，進樣量10 μ I。7.根據權利要求6的檢測方法，其中質譜條件:檢測模式為電噴霧離子化方式，檢測離子為正、負離子，掃描范圍lOO-lOOOm/z，干燥氣的流量為8L/min，干燥氣的溫度為350°C，霧化氣的壓力為35psi。8.根據權利要求7的檢測方法，其中流動相梯度洗脫程序如下:9.根據權利要求8的檢測方法，包括以下步驟: 步驟I，對照品溶液的制備 稱取對照品橙黃決明素5.lmg，蘆薈大黃素2.85mg，大黃素5.0lmg，大黃酷4.18mg，置于IOOml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，搖勻，用0.22 μ m微孔濾膜過濾，取續濾液作為對照品溶液;步驟2,供試品溶液的制備 稱取未加入輔料的養血清腦顆粒浸膏100g，用20%的乙醇溶解，以DlOl大孔樹脂柱層析分離，5bv 20%乙醇、5bv 95%乙醇分別洗脫，收集95%乙醇洗脫液，將可能的藥效物質進行富集；將95%乙醇洗脫液濃縮，用30%乙醇溶液溶解，以100-200目的聚酰胺柱層析分離，5bv 30%乙醇、5bv 95%乙醇分別洗脫，收集95%乙醇洗脫液即為目標蒽醌部位； 步驟3，注入色譜儀，得到色譜圖，色譜儀為液相色譜-質譜聯用儀器，色譜條件如下:液相條件:色譜柱PhenomenexC18 (250 X 4.60mm, Gemini 5 μ m);流動相A為乙腈，流動相B為0.5%的甲酸-水，梯度洗脫見表；體積流量為l.0ml/min，檢測波長為254nm，·190-500nm全波長掃描，柱溫為30°C，進樣量10 μ 1， 質譜條件:檢測模式為電噴霧離子化方式，檢測離子為正、負離子，掃描范圍·lOO-lOOOm/z，干燥氣的流量為8L/min，干燥氣的溫度為350°C，霧化氣的壓力為本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種養血清腦顆粒蒽醌類成分檢測方法，包括以下步驟：步驟1，對照品溶液的制備；步驟2，供試品溶液的制備；步驟3，注入液相色譜?質譜聯用色譜儀，得到色譜圖；步驟4，根據色譜圖得到供試品溶液中蒽醌類成分的種類。

【技術特征摘要】

【專利技術屬性】
技術研發人員：靳元鵬，軋霽，郝曉霞，張蘭蘭，周水平，
申請(專利權)人：天士力制藥集團股份有限公司，
類型：發明
國別省市：