一種長白松試管內快速育苗方法技術

本發明專利技術涉及一種植物繁殖技術，即一種長白松試管內快速育苗方法。其步驟如下：（1）將長白松野生植株主干枝條水培，處理后留莖段和莖尖作為外植體備用；（2）基本培養基＋吲哚丁酸0.07～0.08mg·L-1＋萘乙酸0.03～0.04mg·L-1＋玉米素0.16～0.17mg·L-1＋赤霉素2.90～3.20mg·L-1；（3）長白松植株的快速繁殖、煉苗和移栽。采用長白松野生植株的主干莖段為材料，在試管內調控主干莖段生根同時主干芽萌發生長，以達到莖節增殖的一步快繁目標，解決了種子繁殖困難和扦插繁殖生根率和移栽成活率低及野生資源受滅絕性威脅等問題，為進一步人工規?；敝澈驮耘嚅L白松提供優質種苗。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及一種植物繁殖技術，即。
技術介紹
在現有技術中，長白松DdZzw1S sylvestris var.sylvestriformi5(Takenouchi)Chenget C.D.Chu]又稱美人松，松科松屬常綠喬木，是長白松特有種。該種在長白山區數量稀少，分布區域十分狹窄，僅集中分布在長白山國家級自然保護區(100余hm2)和安圖縣二道白河鎮(100余hm2),其余散生在二道白河和三道白河沿岸的針闊混交林和針葉林中。被《中國珍稀瀕危保護植物名錄(第一冊)》定為漸危種，國家三級重點保護植物。被《國家重點保護野生植物名錄(第一批)》定為國家一級重點保護植物。被《中國物種紅色名錄》定為瀕危種(NE)。在《吉林省野生動植物保護管理暫行條例》一文中被定為省級一類重點保護植物。長白松材質好，易加工，耐腐蝕，不扭不裂，是良好的材用樹種。松節和花粉入藥，主治風濕性關節炎、大骨節病、眩暈、胃痛等。也可作東北及華北地區的綠化及造林樹種。長白松通常以插條扦插或種子繁殖為主，但其種子小、種皮堅硬，種子萌發率較低；插條扦插繁殖不僅生根率和移栽成活率極低，而且導致野生資源受到滅絕性威脅。長白松大規模人工栽培、開發和利用受到極大限制。
技術實現思路
本專利技術的目的是針對上述不足而提供一種利于長白松莖段生根同時頂芽萌發生長成苗，滿足人工規?；敝澈驮耘嗟?a title="一種長白松試管內快速育苗方法原文來自X技術">長白松試管內快速育苗方法。本專利技術的技術解決方案是:，其步驟如下: (I)將長白松野生植株主干枝 條水培使其主干芽萌發生長，處理后留莖段和莖尖作為外植體備用。(2)基本培養基中進行莖段生根同時頂芽萌發生長成苗:基本培養基成分和含量為:100.0 mg.L-1 (NH4) 2S04,650.0 mg.L-1KNO3, 32.0 mg.IZ1CaCl2.2H20, 38.0mg.L-1MgSO4.7H20，90.0 mg.L-1KH2PO4 ；2.8 mg.L-1MnSO4.4H20, 2.2 mg.L-1ZnSO4.7H20,0.30 mg.L-1KI，1.0 mg.[1H3BO3 ；4.5 mg.L-1FeSO4.7H20,6.0 mg.L-1Na2.EDTA.2H20 ；0.2mg七1煙酸,0.2 mg七1鹽酸卩比卩多醇(VB6)，1.30 mg七1甘氨酸；附加卩引哚丁酸0.07 0.08mg *L 1 + 蔡乙酸 0.03 0.04 mg *L 1 + 玉米素 0.16 0.17 mg *L 1 + 赤霉素 2.90 3.20mg.!/1 ;瓊脂條7.5 g.!/1，添加食用白糖30.0 g.L—1，調節pH值至5.8，嫩莖段在光照周期8 h.Cf1、光照強度1000 Ix和溫度24±2°C條件下培養。優選吲哚丁酸0.08 mg-T1 +萘乙酸 0.04 mg.L-1 + 玉米素 0.17 mg.L-1 + 赤霉素 3.20 mg.L-1。(3)長白松植株的快速繁殖、煉苗和移栽。步驟(I)中水培前把將長白松野生植株主干枝條置于-10 O °C的冰柜中休眠50CL步驟(I)的處理是指待主干萌發生長至3.0 4.0 cm時，將主干剪下并切割成段后，摘去嫩針葉及短小葉柄，用5%碳酸鈉溶液浸泡3 min以除去表面油脂，75%乙醇涮洗30s，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min,無菌水沖洗6次，無菌濾紙吸干表面水分。步驟(3)中的快速繁殖是指按每瓶接種8個莖段，40天為I個周期，每個莖段在I個培養周期內平均可切割成4 5段計算，每年有多個周期進行擴繁。步驟(3)的煉苗和移栽是指種苗擴繁到一定數量后，選取1.00 cm以上的小植株進行煉苗移栽，小植株成活率可達到92.8%以上。本專利技術的優點是:1、本專利技術利用植物組織培養技術，采用長白松野生植株的主干莖段為材料，在試管內調控主干莖段生根同時主干芽萌發生長，以達到莖節增殖的一步快繁目標，利于長白松莖段生根同時頂芽萌發生長成苗，解決了種子繁殖困難和扦插繁殖生根率和移栽成活率低及野生資源受滅絕性威脅等問題。2、本專利技術為進一步人工規?；敝澈驮耘嚅L白松提供優質種苗。3、成苗率達99.5%以上；小植株成活率可達到92.8%以上。下面將結合實施例對本專利技術的實施方式作進一步詳細描述。具體實施例方式: I材料與方法 1.1材料及處理 11月上旬，取長白松野生植株主干枝條，置于-10 O °c的冰柜(保證芽充分休眠)中休眠50 d后取出進行水培促使其主干芽萌發生長，待主干萌發生長至3.0 4.0 Cm時，將主干剪下并切割成段(長度為1.5 cm)后，摘去嫩針葉及短小葉柄，用5%碳酸鈉溶液浸泡3min以除去表面油脂，75%乙醇(體積分數)涮洗30 S，移至飽和次氯酸鈉溶液中浸泡8 min,無菌水沖洗6次，無菌濾紙吸干表面水分，切除被乙醇和次氯酸鈉毒傷的組織后留1.0 cm的莖段和莖尖作為外植體備用。1.2長白松莖段生根同時頂芽萌發生長、植株快速和煉苗栽培 基本培養基成分和含量:100.0 mg.L-1 (NH4)2SO4,650.0 mg.T1KNO3, 32.0mg.L-1CaCl2.2H20, 38.0 mg.L-1MgSO4.7H20,90.0 mg.L-1KH2PO4 ；2.8 mg.L-1MnSO4.4H20,2.2 mg.L-1ZnSO4.7H20, 0.30 mg.IZ1KI，1.0 mg.[1H3BO3 ；4.5 mg.L-1FeSO4.7H20, 6.0mg.L-1Na2.EDTA.2H20 ；0.2 mg.L-1 煙酸,0.2 mg.L-1 鹽酸卩比卩多醇(VB6), 1.30 mg.L-1 甘氨酸。培養基中附加吲哚丁酸IAA (0.12 0.17 mg.Γ1)、萘乙酸NAA (0.08 0.13 mg.Γ1)、玉米素 ZT (0.10 0.15 mg.I71)和赤霉素 GA3 (1.70 2.80 mg.I71)，瓊脂條 7.5 g.I71,添加食用白糖30.0 g.!/1，調節pH值至5.8，嫩莖段在光照周期8 h ^cT1、光照強度1000 Ix和溫度(24±2) °C條件下培養。為提高長白松嫩莖段生根的速度及生根率和頂芽萌發生長速度，通過均勻設計法設計實驗，選用U12 (124)均勻表，每個處理接種10個主干嫩莖段，重復3次取平均值，篩選確定影響長白松主干莖段生根同時頂芽萌發生長的吲哚丁酸、萘乙酸、玉米素和赤霉素最佳濃度配比。主干莖段培養40 d統計生根率和苗的長度，以均出現莖段生根和頂芽萌發生長的苗為準。生根率(％)=(生根的莖段數/接種的莖段總數)χιοο%，生長率(％)=(苗總長度-1.0)/ 1.0X 100%。莖段生根后頂芽萌發生長至3.00 cm時，在無菌條件下打開培養瓶，將莖段留3個針葉剪下苗干，并將苗干切割成0.5 cm的莖段，再次將小莖段轉接到莖段生根同時頂芽萌發生長培養基中，計算出每個莖段生根同時頂芽萌發生長的增殖倍數和周期。當種苗擴繁到需要數量后，且小植株長至1.00 cm時，將小植株從培養瓶中取出，放在高錳酸鉀溶液(濃度為5 mg.Γ1)中洗凈根上的瓊脂，將小植株栽植到經多菌靈(300倍液)消毒過的腐熟草炭土、腐爛松針和珍珠巖(3: 3:1)的基質中，覆蓋塑料薄膜(透性好)本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種長白松試管內快速育苗方法，其特征在于步驟如下：（1）將長白松野生植株主干枝條水培使其主干芽萌發生長，處理后留莖段和莖尖作為外植體備用；（2）基本培養基中進行莖段生根同時頂芽萌發生長成苗：基本培養基成分和含量為：100.0?mg·L?1(NH4)2SO4，650.0?mg·L?1KNO3，32.0?mg·L?1CaCl2·2H2O，38.0?mg·L?1MgSO4·7H2O，90.0?mg·L?1KH2PO4；2.8?mg·L?1MnSO4·4H2O，2.2?mg·L?1ZnSO4·7H2O，0.30?mg·L?1KI，1.0?mg·L?1H3BO3；4.5?mg·L?1FeSO4·7H2O，6.0?mg·L?1Na2·EDTA·2H2O；0.2?mg·L?1煙酸，0.2?mg·L?1鹽酸吡哆醇，1.30?mg·L?1甘氨酸；附加吲哚丁酸0.07～0.08?mg·L?1＋萘乙酸0.03～0.04?mg·L?1＋玉米素0.16～0.17?mg·L?1＋赤霉素2.90～3.20?mg·L?1?；瓊脂條7.5?g·L?1，添加食用白糖30.0?g·L?1，調節pH值至5.8，嫩莖段在光照周期8?h·d?1、光照強度1000?lx和溫度24±2℃條件下培養；（3）長白松植株的快速繁殖、煉苗和移栽。...

【技術特征摘要】
1.一種長白松試管內快速育苗方法，其特征在于步驟如下: (1)將長白松野生植株主干枝條水培使其主干芽萌發生長，處理后留莖段和莖尖作為外植體備用； (2)基本培養基中進行莖段生根同時頂芽萌發生長成苗:基本培養基成分和含量為:100.0 mg.L^1(NH4)2SO4, 650.0 mg.L^1KNO3, 32.0 mg.L^1CaCl2.2H20,38.0mg.L-1MgSO4.7H20，90.0 mg.L-1KH2PO4 ；2.8 mg.L-1MnSO4.4H20, 2.2 mg.L-1ZnSO4.7H20,0.30 mg.L-1KI，1.0 mg.[1H3BO3 ；4.5 mg.L-1FeSO4.7H20，6.0 mg.L-1Na2.EDTA.2H20 ；0.2 mg.171煙酸,0.2 mg七1鹽酸批P多酉享，1.30 mg.171甘氨酸；附加Π引哚丁酸0.07 0.08mg.L 1 + 蔡乙酸 0.03 0.04 mg.L 1 + 玉米素 0.16 0.17 mg.L 1 + 赤霉素 2.90 3.20 mg.L—1 ;瓊脂條7.5 g. Λ添加食用白糖30.0 g.L—1，調節pH值至5.8，嫩莖段在光照周期8 h.Cf1、光照強度1000 Ix和溫度24±2°C條件下培養； (...

【專利技術屬性】
技術研發人員：顧地周，顧川岳，姜云天，朱俊義，程廣有，潘雨，禚玲玲，張學士，王秋爽，付航，
申請(專利權)人：通化師范學院，
類型：發明
國別省市：