本發明專利技術公開了一種提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,特點是對長春花栽培植株整株進行誘導劑噴施處理,一定時間后進行采收即可,其中對長春花栽培植株用100umol/L茉莉酸甲酯進行噴施處理,30天后采收長春花整株即得到高生物堿含量的長春花;或者對長春花栽培植株用10mg/L花生四烯酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花;或者對長春花栽培植株用10mg/L磺基水楊酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花,優點是對提高長春花栽培植株的生物堿產量效果顯著,操作簡單方便,費用低,生產周期短,適于批量處理和工廠化生產。?
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及一種長春花采收前處理方法,尤其是涉及。
技術介紹
長春花(Catharanthus roseus L.)屬夾竹桃科一年生草本植物,可產生100多種具有很高藥用價值的抗癌職類卩引哚生物堿(Terpenoid Indole Alkaloids, TIAs)。如長春喊(Vinblastine)、長春新喊(Vincristine)、阿嗎喊(Ajmalicine)、利血平(Reserpine)、文多靈(Vindoline)、長春質堿(Catharanthine)等。長春堿臨床上主要用于治療何杰金氏病及絨毛膜癌,對乳腺癌的治療效果也非常好。因此,長春花被認為是一種具有很高開發應用價值的藥用植物。然而,由于這 些藥物在長春花中的含量極其微少(僅為百萬分之幾至十萬分之幾),所以從天然植物中提取TIAs遠遠不能滿足市場需求,導致長春花藥用成分的供需矛盾相當嚴重(每年只能生產12 kg長春堿和I kg長春新堿),使其價格極為昂貴(高達6000美元/克),而用化學合成和半合成因成本太高而不具有商業價值。長春花生物堿主要從天然植物中提取得到,長春花全株均含有生物堿。目前已有報道采用施肥技術提高長春花生物堿產量的報道,但對長春花成熟植株采收前處理措施研究較少。因此,如何提高栽培長春花生物堿含量,特別是在采收前短時間內快速提高長春花生物堿產量,整合出一條長春花生物堿產量的栽培和處理措施,對長春花堿的規模化工廠化生產具有重要意義。目前,國內外還沒有關于快速提高長春花生物堿產量的采收前處理方法的相關研究報道。
技術實現思路
本專利技術所要解決的技術問題是提供一種提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,該方法對提高長春花栽培植株的生物堿產量效果顯著,操作簡單方便,費用低,生產周期短,適于批量處理和工廠化生產。本專利技術解決上述技術問題所采用的技術方案為:,對長春花栽培植株整株進行誘導劑噴施處理,一定時間后進行采收即可。所述的誘導劑為100 umol/L的茉莉酸甲酯,對長春花栽培植株用100 umol/L茉莉酸甲酯進行噴施處理,30天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花。所述的誘導劑為10mg/L花生四烯酸,對長春花栽培植株用10mg/L花生四烯酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花。所述的誘導劑為10mg/L磺基水楊酸,對長春花栽培植株用10mg/L磺基水楊酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花。與現有技術相比,本專利技術的優點在于:專利技術首次公開了一種提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,該方法對提高長春花栽培植株的生物堿產量效果顯著,操作簡單方便,費用低,生產周期短,適于批量處理和工廠化生產,以降低生物堿生產成本,提高企業經濟效益,滿足人類防病治病的需要,具有很好的經濟效益和社會效益。附圖說明圖1為實施例1采前噴施100 umol/L茉莉酸甲酯的長春花中文多靈、長春質堿和長春堿的含量檢測結果 圖2為實施例2采前噴施10mg/L花生四烯酸的長春花中文多靈、長春質堿和長春堿的含量檢測結果 圖3為實施例3采前噴施10mg/L磺基水楊酸的長春花中文多靈、長春質堿和長春堿的含量檢測結果圖。具體實施例方式以下結合附圖實施例對本專利技術作進一步詳細描述。一、實驗方法 收集經不同誘導處理的栽培長春花植株的地上部分,稱取鮮重,60°C,48 h烘干至恒重,稱其干重。將烘干的長春花材料放入研缽中,加入少量石英砂,研磨,加入95 %乙醇適量(1:5, W/V),50°C超聲波提取30 min,冷卻至室溫,對提取液12,000 rpm離心10 min,吸取上清,12,000 rpm再離心10 min,吸取上清,用于HPLC法測定長春花中文多靈、長春質堿和長春堿的含量。分別精密稱取文多靈、長春質 堿和長春堿標準品(Sigma公司,99.9% )10.0 mg,用I mL甲醇完全溶解,分別得到10 mg/mL文多靈、10 mg/mL長春質堿和10 mg/mL長春堿對照品溶液,作為標準品貯備液,_20°C保存備用。色譜柱:C_18反相娃膠柱(SymmetryShield C18, 5mm, 250 4.6 mm,Waters)。流動相為水:二乙胺(986: 14),用磷酸調節pH = 7.2(溶液A),甲醇:乙腈=4:1(溶液B),380 mL A和620 mL B混合作為流動相,經真空泵抽濾脫氣。檢測波長220 nm,柱溫30°C,流速1.0 mL/min,進樣量10 uL,靈敏度(AUFS=L O),理論塔板數按文多靈、長春質堿和長春堿峰計算不低于2000。分別精密吸取對照品溶液和供試樣品溶液各10 μ L,注入高效液相色譜儀,記錄各組分峰面積,代入線性回歸方程,計算即得樣品文多靈、長春質堿和長春堿含量。二、具體實施例 本專利技術對長春花栽培植株整株進行不同誘導劑噴施處理,一定時間后進行采收得到生物堿含量提高的長春花。實施例1 對長春花栽培植株用100 umol/L茉莉酸甲酯進行噴施處理,30天后采收長春花整株作為提取長春花生物堿的原料。提取長春花植株生物堿,采用HPLC法測定長春花生物堿含量。檢測結果實驗組中長春堿、長春質堿和文多靈產量均比對照顯著提高。長春堿產量是對照組的1.24倍,長春質堿產量是對照的1.66倍,文多靈產量是對照的2.61倍。茉莉酸甲酯對長春花植株生物堿產量的影響,具體如表圖1所示。實施例2 對長春花栽培植株用10mg/L花生四烯酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株作為提取長春花生物堿的原料。提取長春花植株生物堿,采用HPLC法測定長春花生物堿含量。檢測結果實驗組中長春堿、長春質堿和文多靈產量均比對照顯著提高。長春堿產量是對照組的2.58倍,長春質堿產量是對照的1.68倍,文多靈產量是對照的1.88倍。花生四烯酸對長春花植株生物堿產量的影響,具體如表圖2所示。實施例3 對長春花栽培植株用10mg/L磺基水楊酸進行噴施處理,10天后采收長春花整株作為提取長春花生物堿的原料。提取長春花植株生物堿,采用HPLC法測定長春花生物堿含量。檢測結果實驗組中長春堿、長春質堿和文多靈產量均比對照顯著提高。長春堿產量是對照組的3.96倍,長春質堿產量是對照的1.54倍,文多靈產量是對照的1.95倍。磺基水楊酸對長春花植株生物堿產量的影響,具體如表圖3所示。三、對比試驗 選取生長健壯的長春花植株,設置四種處理,第一種為在采收前不施用誘導子誘導的普通長春花植株對照。第二種為在采收前用100 umol/L茉莉酸甲酯噴施植株。第三種為在采收前噴施10mg/L花生四烯酸。第四種為在采收前噴施10mg/L磺基水楊酸。對處理和未處理的長春花分別于處理0d、10d、20d、30d時取樣稱量鮮重,提取生物堿并采用HPLC法測定整株生物堿含量,結果如表I所示, 表I經處理的長春花中各生物堿含量本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一種快速提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,其特征在于:對長春花栽培植株整株進行誘導劑噴施處理,一定時間后進行采收即可。
【技術特征摘要】
1.一種快速提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,其特征在于:對長春花栽培植株整株進行誘導劑噴施處理,一定時間后進行采收即可。2.根據權利要求1所述的一種快速提高長春花生物堿產量的采收前處理方法,其特征在于:所述的誘導劑為100 umol/L的茉莉酸甲酯,對長春花栽培植株用100 umol/L茉莉酸甲酯進行噴施處理,30天后采收長春花整株得到高生物堿含量的長春花。3.根據權利要求1所述的一種快速提高長春...
【專利技術屬性】
技術研發人員:龔一富,袁泉,盧鵬,王何瑜,章麗,劉曉丹,李君,
申請(專利權)人:寧波大學,
類型:發明
國別省市:
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