本發明專利技術涉及生物技術、環境微生物及水處理領域，公開了一種用于污水處理的好氧反硝化菌及其應用。本發明專利技術菌株是從污水處理廠取得的活性污泥中篩選所得，本發明專利技術提供的菌株可以有效的去除污水中的硝態氮和亞硝態氮,去除硝態氮和去除亞硝態氮的能力分別為3.01mgN/(g·L·h)和1.80mgN/(g·L·h)。該菌株的脫氮方法歸屬于生物脫氮領域，生物脫氮方法不僅高效而且成本較低，該菌株在應用于含氮廢水的處理過程中具有很好的前景。
【技術實現步驟摘要】
本專利技術涉及生物技術、環境微生物及水處理領域，尤其涉及了一種用于污水處理的好氧反硝化菌及其應用。
技術介紹
隨著水體富營養化的日益嚴重，去除水中氮素污染已經成為當今水污染防治領域的一個熱點問題。氮在污水中主要以分子態氮，有機氮，氨氮，硝態氮，亞硝態氮，硫氰化物及氰化物形式存在，而在未經處理的原廢水中主要以有機態氮及氨氮的形式存在；經二級生化處理后主要剩下氨氮及硝態氮。長期以來，脫氮主要強調污水中氨氮的脫除，不對硝態氮進行處理，導致水體中硝酸鹽含量不斷升高。傳統生物脫氮包括硝化和反硝化兩個過程，即氨氮由好氧硝化細菌轉化為硝態氮，然后再通過厭氧或缺氧的反硝化細菌還原為氮氣，排出水體。近年來的國內外研究表明，一些微生物在不同的溶氧條件下，也能表現出一定的反硝化能力。比如已經報道過的 pan to tropha, Alcaligenes faecalis,Pseudomonas aeruginosa, Thaurea mechernichensis, Acinetobacter calcoaceticus，Providencia rettgeri, Pseudomonas stutzeri 取 Bacillus strains 等均可在好氧條件下進行反硝化，而對于紅球菌屬)則報道較少。好氧反硝化菌的出現為生物脫氮提供了一條全新的途徑，使得傳統的生物脫氮途徑更加完善，也為脫氮工藝研究提供了一定的理論基礎。好氧反硝化菌的篩選方法很多，主要包括:1.富集培養法:利用選擇性培養基進行篩選，在培養基中添加限制性碳源和氮源，或根據反硝化為堿增加的過程在培養基中添加PH指示劑。2.稀釋法，將樣品稀釋一定倍數后培養，然后將pH值發生變化的再進行稀釋，重復操作，將本來不占優勢的好氧反硝化菌分離出來。3.間歇曝氣法，好氧反硝化菌可同時利用氧分子和硝態 氮，好氧、缺氧的頻繁轉換有利于其在競爭中取得優勢地位。
技術實現思路
本專利技術提供了一株好氧反硝化菌，能夠在好氧條件下有效降解水體中的硝態氮及亞硝態氮。為了解決上述技術問題，本專利技術通過下述技術方案得以解決: 用于污水處理的好氧反硝化菌，所述好氧反硝化菌16S rDNA分子鑒定為紅平紅球菌iRhodococcus erythropolis )，命名為 Rhodococcus erythropolis Sunda 1101，該菌株于2011年6月23日，保藏于中國典型培養物保藏中心，菌種保藏編號為CCTCC M 2011211。本專利技術提供一種篩選好氧反硝化菌的方法。本專利技術的菌種篩選采用多種篩選方法相結合，首先通過添加限制性氮源，間歇曝氣來富集好氧反硝化菌，然后再通過在培養基中添加PH指示劑來快速有效地篩選好氧反硝化菌。為實現上述目的，本專利技術采取的技術方案是:對污水處理廠的活性污泥進行曝氣富集培養，篩選出好氧菌，然后根據反硝化菌產堿的性能，通過在培養基中添加溴甲基芬蘭指示劑的方法，來有效地篩選好氧反硝化菌。用模擬好污水復篩高反硝化能力的好養反硝化菌。其步驟依次是取樣，曝氣富集培養，初篩，復篩，最后得到I株在好氧條件下，能同時降解模擬污水中的硝態氮和亞硝態氮，反硝化能力較高的菌株。本專利技術提供了菌株鑒定的方法。本專利技術的菌株鑒定方法主要是通過16S rDNA鑒定的方法，利用通用引物擴增出進化過程中保守的16S rDNA片段進行測序，然后與基因文庫中的數據進行比對，根據菌株同源性比例確定菌株的屬性，最后再根據系統進化樹進行確認。本專利技術的好氧反硝化菌應用于降解污染的水體中的硝態氮和亞硝態氮。具體為對菌體進行擴大培養后，接種于含硝態氮和亞硝態氮污染的水體。本專利技術由于采用了以上技術方案，具有顯著的技術效果: 本專利技術提供的菌株可以有效的去除污水中的硝態氮和亞硝態氮，去除硝態氮和去除亞硝態氮的能力分別為3.01 mgN/ (g.L.h)和1.80 mgN/ (g.L.h)。該菌株的脫氮方法歸屬于生物脫氮領域，生物脫氮方法不僅高效而且成本較低，因此該菌株在應用于含氮廢水的處理過程中具有很好的前景。生物材料保藏信息 生物材料名稱:紅平紅球菌erythropolis)； 保減單位:中國典型培養物保減中心； 保藏日期:2011年6月23日； 保藏編號:CCTCC M 2011211。 附圖說明圖1是本專利技術16S rDNA PCR擴增后的結果圖。圖2是本專利技術的菌株與其它菌株的親緣關系圖。具體實施例方式下面結合附圖1至附圖2與實施例對本專利技術作進一步詳細描述: 實施例1 好氧反硝化菌的篩選1.富集培養:將從蘆村污水處理廠取得的活性污泥進行曝氣富集培養，裝液量2 L/3.6L，每天更換新鮮培養基。更換新鮮培養基時先靜置lh，移除600mL體積，然后再補加600mL新鮮培養基，總共富集約40天。2.初篩:將富集好的活性污泥進行稀釋，在溴百里酚藍培養基上進行涂布，然后置于30° C培養箱中培養，培養2-3天。將溴百里酚藍培養基上出現的藍色單菌落進行分類，革蘭氏染色，然后將每個形態的菌落挑選3-4個進行劃線分離，置于30° C培養箱中培養，培養2-3天。對劃線分離得到的藍色單菌落進行分類，挑選有特征的菌落保存到斜面上，供復篩用。3.復篩:將初篩保存的菌株接入菌體擴大培養基，30°C，200 rpm，培養24h，然后按1%的比例分別接入IOOmL檢測培養基，培養24 h，30°C，200 rpm,測定接種前后硝態氮和亞硝態氮的變化。選擇硝態氮降解率達40%以上且亞硝態氮降解率達25%以上的菌株進行反硝化性能測試，得到一株性能相對較好的菌株。4.檢測方法: 4.1硝態氮的測定:紫外分光光度法，參見中華人民共和國環境保護行業標準HJ/T346-2007。4.2亞硝態氮的測定:N-(l-萘基)_乙二胺鹽酸分光光度法，參見國標GB7493-87。4.3菌體干重(DCW)的測定:取菌體培養液,在8000 rpm的條件下離心5min,棄去上清液，然后在105° C的恒溫干燥箱中干燥至菌體恒重。5.相關培養基 富集培養基(g/L): (NH4)2SO4 0.5 ;丁二酸鈉 2.17 ;維氏鹽溶液 50ml ；pH 7.2。維氏鹽溶液(g/L): K2HPO4 5.0 ；MgS04.7H20 2.5 ；NaCl 2.5 ；FeS04.7H20 0.05 ；MnSO4.4H20 0.05。初篩培養基(g/L):瓊脂20 ；ΚΝ03 I ；KH2PO4 I ；FeS04.7H20 0.5 ；CaCl2 0.2 ；MgSO4.7H20 I; 丁二酸鈉8.5;溴百里酚藍(取0.1g溴百里酚藍溶于IOmL酒精)lmL，pH7.0 7.3。菌體擴大培養基(g/L)=KNO3 I ；KH2PO4 I ；FeS04.7H20 0.05 ；CaCl2 0.02 ；MgSO4.7H20 I ；T二酸鈉.6H20 8.5。檢測培養基(g/ L)=KH2PO4 I ；MgS04.7H20 I ； 丁二酸鈉 2.8 ；NaNO3 0.6 或 NaNO20.50。實施例2 好氧反硝化菌的鑒定1.提取細菌基因組 將目的菌株接入LB培養基，隔夜培養后，取ImL離心得菌體，然后用基因組試劑盒提取細菌基因組，瓊脂糖凝膠電泳(1%)驗證，紫外分析本文檔來自技高網...
【技術保護點】
一株用于污水處理的好氧反硝化菌，其特征在于：該菌株經16S?rDNA分子鑒定為紅平紅球菌（Rhodococcus?erythropolis），菌種保藏編號：CCTCC?M?2011211，保藏時間：2011年6月23日，保藏地點：中國典型培養物保藏中心。
【技術特征摘要】
1.一株用于污水處理的好氧反硝化菌，其特征在于:該菌株經16S rDNA分子鑒定為紅平紅球菌(WAotZococciAs 6 r7iAro/7o7i5.),菌種保藏編號:CCTCC M 2011211,保藏時間:2011年6月23日，保藏地點:中國典型培養物保藏中心。2.根據權利要求1所述的用于污水處理的好氧反硝化菌，其特征在于:所述的好氧反硝化菌應用于降解污染的水體中的硝態氮和亞...
【專利技術屬性】
技術研發人員：鄭展望，楊瑾，王斌，
申請(專利權)人：浙江商達環保有限公司，
類型：發明
國別省市：
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