小檗堿作為組蛋白乙酰化的促進劑及其用途制造技術

本發明專利技術涉及小檗堿作為組蛋白乙酰化的促進劑及其用途。更具體地，涉及小檗堿及其藥學上可接受的鹽可廣泛、非特異性地促進組蛋白乙酰化，也可以通過促進肉堿棕櫚酸轉移酶I的組蛋白乙酰化，從而促進肉堿棕櫚酸轉移酶I的表達，小檗堿具有使用安全、來源豐富等優點，是一種經濟、有效地促進組蛋白乙酰化的促進劑。

【技術實現步驟摘要】

本專利技術涉及小檗堿的醫藥用途，更具體地是涉及小檗堿作為組蛋白乙酰化的促進劑的用途。
技術介紹
組蛋白(histories)真核生物體細胞染色質中的堿性蛋白質，含精氨酸和賴氨酸等堿性氨基酸特別多，二者加起來約為所有氨基酸殘基的1/4。因氨基酸成分和分子量不同，主要分成5類H1、H2A、H2B、H3、和H4。它們富含帶正電荷的堿性氨基酸，能夠同DNA中帶負電荷的磷酸基團相互作用，從而與帶負電荷的雙螺旋DNA結合成DNA-組蛋白復合物。在生物體中，組蛋白會發生多種形式的修飾或變化，例如乙酰化和甲基化。組蛋白的乙酰化主要有兩種方式一是H1、H2A、H4組蛋白的氨基末端乙酰化，形成α-乙酰絲氨酸，組蛋白在細胞質內合成后輸入細胞核之前發生這一修飾；二是在Η2Α、Η2Β、Η3、Η4的氨基末端區域的某些專一位置形成Ν6-乙酰賴氨酸。組蛋白的乙酰化，特別是Η3和Η4的乙酰化，可促進基因的表達，是某些基因活化的重要特征之一。基因的活化在DNA水平多表現為該基因啟動子序列相關組蛋白賴氨酸殘基的乙酰化。賴氨酸殘基的乙酰化修飾影響組蛋白與包繞其外周的DNA結合狀態，允許轉錄因子接近并啟動基因轉錄。已表明，生物體(如哺乳動物)的許多正常功能與基因的表達密切相關。某些基因的表達異常(如不表達、或表達過低)可導致某些生理變化或疾病。然而，目前尚不清楚哪些物質可通過何種途徑調 控(促進或抑制)基因的表達。因此，本領域迫切需要開發可調控基因表達的物質，尤其是通過調控組蛋白乙酰化來調控基因表達的物質。
技術實現思路
本專利技術的一個目的是，提供一種通過調控組蛋白乙酰化來調控基因表達的物質-小檗堿或其藥學上可接受的鹽。本專利技術的另一個目的是提供小檗堿或其藥學上可接受的鹽在促進組蛋白乙酰化的方面的應用。本專利技術第一方面提供了一種小檗堿或其藥學上可接受的鹽的用途，用于制備促進組蛋白乙酰化的組合物；或被用作促進組蛋白乙酰化的促進劑。 在另一優選例中，所述的組合物非特異性地促進組蛋白的乙酰化。在另一優選例中，所述組合物還用于降低肝臟脂肪含量。在另一優選例中，所述小檗堿或其藥學上可接受的鹽包括鹽酸小檗堿、含小檗堿或其鹽的提取物、或其組合。在另一優選例中，所述組合物包括藥物組合物。所述藥物組合物含有(a)小檗堿或其藥學上可接受的鹽；以及(b)藥學上可接受的載體。在另一優選例中，所述的藥物組合物還含有其他活性成分。一種優選的組合物是復方小檗堿制劑。在另一優選例中，所述組合物的劑型包括片劑、注射劑、膠囊、沖劑、口服液體制劑、顆粒劑、溶液劑、或混懸劑。在另一優選例中，所述的組蛋白包括哺乳動物(如鼠、狗、牛、人)的組蛋白。在另一優選例中，所述組蛋白包括組蛋白H3或H4。在另一優選例中，所述組蛋白結合以下位置基因的啟動子區、內含子、外顯子或3，-非翻譯區(UTR)。在另一優選例中，所述組蛋白結合于以下基因肉堿棕櫚酸轉移酶I (CPT-1a)基因、肝臟微粒體甘油三酯轉運蛋白(MTTP)基因、或低密度脂蛋白受體(LDLR)。 在另一優選例中，所述組合物還用于促進肉堿棕櫚酸轉移酶I的表達，或用作肉堿棕櫚酸轉移酶I的表達促進劑。在另一優選例中，所述組蛋白位于肉堿棕櫚酸轉移酶I的核心啟動子處、內含子處、翻譯起始位點ATG處或3’ -UTR末尾處。在另一優選例中，所述肉堿棕櫚酸轉移酶I是動物肝臟細胞中的肉堿棕櫚酸轉移酶I。本專利技術第二方面提供了一種非治療性的促進組蛋白乙酰化的方法，包括步驟在小檗堿或其藥學上可接受的鹽存在下，體外培養真核細胞，從而促進所述細胞中組蛋白的乙酰化。本專利技術第三方面提供了一種促進組蛋白乙酰化的方法，包括步驟給需要的對象施用藥學有效劑量的小檗堿或其藥學上可接受的鹽、或含小檗堿或其藥學上可接受的鹽的藥物組合物。在另一優選例中，所述藥物組合物含有l-2000mg小檗堿或其藥學上可接受的鹽/齊U，更佳地，含有10-200mg小檗堿或其藥學上可接受的鹽/劑。本專利技術第四方面提供了一種確定測試物是否是組蛋白乙酰化抑制劑的方法，包括步驟在對照組中在小檗堿或其藥學上可接受的鹽存在下，體外培養真核細胞，以及在測試組中在小檗堿或其藥學上可接受的鹽以及測試物存在下，體外培養所述真核細胞；和比較對照組和測試組中所述細胞中組蛋白的乙酰化水平，其中測試組的乙酰化水平顯著低于對照組則提示所述測試物是組蛋白乙酰化抑制劑。在另一優選例中，所述的測試物包括化合物、或提取物。應理解，在本專利技術范圍內中，本專利技術的上述各技術特征和在下文(如實施例)中具體描述的各技術特征之間都可以互相組合，從而構成新的或優選的技術方案。限于篇幅，在此不再一一累述。附圖說明圖1顯示了三個實驗組中，肉堿棕櫚酸轉移酶I基因在四個不同的位點組蛋白H3乙酰化的對照圖；三個實驗組正常組、高脂飲食組和高脂飲食后小檗堿干預組；四個不同的位點-300bp、12000bp、27200bp 和 61170bp。圖2顯示了三個實驗組中，肉堿棕櫚酸轉移酶I基因在四個不同的位點組蛋白H4乙酰化的對照圖；三個實驗組正常組、高脂飲食組和高脂飲食后小檗堿干預組；四個不同的位點-300bp、12000bp、27200bp 和 61170bp。具體實施例方式本專利技術人通過長期而深入的研究，意外地發現，小檗堿可以促進結合于基因的組蛋白的乙酰化，或上調乙酰化水平，從而促進基因的表達。本專利技術的實驗結果表明，說小檗堿對組蛋白乙酰化的促進作用是整體、廣泛和非特異的，可促進例如基因內含子區域、ORF區或3’ -UTR區域等處的組蛋白的乙酰化。在此基礎上，專利技術人完成了本專利技術。黃連素如本文所用，術語“小檗堿”和“黃連素”可互換使用，它是一種重要的生物堿，可從黃連、黃柏、三顆針等植物中提取或合成。在本專利技術中，小檗堿的藥學上可接受的鹽包括小檗堿與無機酸或有機酸所形成的鹽，常用的鹽包括鹽酸小檗堿(又叫鹽酸黃連素)。在另一優選例中，所述小檗堿或其藥學上可接受的鹽包括鹽酸小檗堿、含小檗堿或其鹽的提取物、或其組合。黃連素具有顯著的抑菌作用，同時對心血管系統也有較好的作用，具有使用安全、來源豐富等優點。組合物 本專利技術還提供了一種含有小檗堿或其藥學上可接受的鹽的組合物。本專利技術的組合物可作為促進組蛋白乙酰化的促進劑，也可通過促進肉堿棕櫚酸轉移酶I的組蛋白乙酰化，從而促進肉堿棕櫚酸轉移酶I的表達，還可用于降低肝臟脂肪含量。所述組合物中的活性成分包括小檗堿或其藥學上可接受的鹽，還可以含有其他活性成分。本專利技術的組合物包括藥物組合物和非藥物組合物(如膳食補充劑、保健品組合物)。本專利技術的藥物組合物可含有(a)小檗堿或其藥學上可接受的鹽；以及(b)藥學上可接受的載體。一種優選的組合物是復方小檗堿制劑。本專利技術的藥物組合物包含安全有效量(或藥學有效劑量)范圍內的小檗堿或其藥學上可接受的鹽及藥學上可接受的載體。其中“安全有效量”或“藥學有效劑量”指的是化合物的量足以明顯改善病情，而不至于產生嚴重的副作用。通常，藥物組合物含有l_2000mg小檗堿或其藥學上可接受的鹽/劑，更佳地，含有10_200mg小檗堿或其藥學上可接受的鹽/劑。較佳地，所述的“一劑”包括(但不限于)一個膠囊或藥片。“藥學上可以接受的載體”指的是一種或多種相容性固體或液體填料或凝膠物質，它們適合于人使用，而且必須有足夠的純度和足夠低的毒本文檔來自技高網...

【技術保護點】
一種小檗堿或其藥學上可接受的鹽的用途，其特征在于，它用于制備促進組蛋白乙酰化的組合物；或被用作促進組蛋白乙酰化的促進劑。

【技術特征摘要】
1.一種小檗堿或其藥學上可接受的鹽的用途，其特征在于，它用于制備促進組蛋白乙酰化的組合物；或被用作促進組蛋白乙酰化的促進劑。2.權利要求1所述的用途，其特征在于，所述的組合物非特異性地促進組蛋白的乙酰化。3.權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組合物還用于降低肝臟脂肪含量。4.權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組蛋白包括組蛋白H3或H4。5.權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組蛋白結合以下位置基因的啟動子區、內含子、外顯子或3’ -非翻譯區(UTR)。6.權利要求1或5所述的用途，其特征在于，所述組蛋白結合于以下基因肉堿棕櫚酸轉移酶I (CPT-1 α )基因、肝臟微粒體甘油三酯轉運蛋白(MTTP)基因、或低密度脂蛋白受體(LDLR)。7.權利要求1所述的用途，其特征在于，所述組合物還用于促進肉堿...

【專利技術屬性】
技術研發人員：高鑫，顏紅梅，常薪霞，夏明鋒，卞華，曾蒙蘇，盧大儒，饒圣祥，姚秀忠，姜明紅，
申請(專利權)人：高鑫，復旦大學附屬中山醫院，
類型：發明
國別省市：